HNRNPE2 RNA诱骗对人脐静脉内皮细胞ECV304表型的影响.pdf
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1、中国医学创新 年 月 第 卷第 期 , ,畅 畅 论 著 诱骗对人脐静脉内皮细胞 表型的影响 魏容 冯文莉 李凤 作者单位: 四川省遂宁市中心医院 通讯作者:魏容 【摘要】 目的 观察 诱骗技术是否对人脐静脉内皮细胞 表型有影响。 方法 用脂 质体 介导 野生序列 质粒(简称 )和突变序列 质粒(简称 )进入 细胞,随后在规定时间测定三类细胞的生长曲线、生长周期、凋亡。 结果 三类细胞的表型没有明显的改变(P 畅 ), 对 细胞表型没有影响。 结论 技 术对于正常的细胞表型无明显影响,这也许可以提示这类技术在用于肿瘤基因治疗中对正常细胞相对是比较安 全的。 【关键词】 ; 诱骗; 表型 The
2、 influcence of hnRNP E RNA decoy on human vena umbilicalis (ECV) phenotypics WEI Rong,FENG Wen li,LI Feng Suining Central Hospital,Suining ,China 【Abstract】 Objective Methods ( ) ( ) - , , , Results (P 畅 ), Conclusion , - 【Key words】 ; ; 笔者在前面的实验已经用 策略诱导了 粒系的分化,它是基于 的 过 度表达,抑制了 的功能性 蛋白对下游分化基 因的调控,模拟
3、了 与 的结合位点的序 列。 但是 是一种穿梭结合蛋白,它可以调控下游 许多基因的表达,而下游基因在体内多种细胞中也参与了许 多重要的生理过程,如细胞增殖,分化及生育 。 因此,我 们不得不考虑, 与 的结合,会不会影响正常 表达的细胞(绝大多数正常细胞都是 正常表达)。 因此,笔者将 转入到 人脐静脉内皮细胞 ,观察 对此细胞表型 的影响。 为研究该策略治疗白血病的可行性提供实验基础。 材料与方法 畅 主要试剂 培养基干粉,脂质体 及 (美国 公司); ( - (美国 公司); (南京 凯基生物技术有限公司); 细胞活性检测(上海生 博生物科技有限责任公司)。 畅 方法 畅 畅 细胞的培养与
4、细胞的转染 人脐静脉内皮细胞株 ,常规培养于的小牛血清的 培养基内,在 ,及饱和湿气下培养。 将处于生长对数期的细胞按 照脂质体 转染的说明书进行 细胞的转染。 转 染后用 进行筛选,得到抗性克隆,然后培养 增值,进行后续试验。 畅 畅 细胞生长曲线的测定 将空白 、 、 的细胞各自培养到对数生长期。 然后 按照 细胞活性检测的操作说明进行细胞生长曲线 的测定。 畅 畅 细胞周期的测定 流式细胞仪检测各组细胞周期, 以 荧光读数为横坐标,细胞数为纵坐标,在流式细胞仪上 计数细周期各期的细胞数目,以 期为细胞增殖能力的 表现。 畅 畅 细胞凋亡的测定( ) 离心收 集三组对数生长期, 离心 ,弃
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