SN 1210-2003 国境口岸梅毒检验规程.pdf.pdf
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1、SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N/ T 1 2 1 0 - 2 0 0 3 国境口岸梅毒检验规程 E x a m i n a t i o n c o d e s f o r s y p h i l i s a t f r o n t i e r p o r t 2 0 0 3 - 0 3 - 1 7 发布 2 0 0 3 - 0 9 - 0 1 实施 中华人民共和匡 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 辰 S N/ T 1 21 0 -2 0 0 3 前言 本标准附录 A、 附录B为资料性附录. 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国天
2、津出人境检验检疫局负责起草, 中华人民共和国上海出人境检验检疫 局、 中华人民共和国福建出人境检验检疫局参加起草。 本标准主要起草人: 柴宏森、 何晨光、 李智慧、 季风英、 黄金宝。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 S N / T 1 2 1 0 - 2 0 0 3 国境 口岸梅毒检验规程 范 围 本标准规定了梅毒的检验对象、 检验程序和检验结果的报告。 本标准适用于国境口岸卫生检疫、 旅行保健机构梅毒的检验和报告。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件, 其随后所有 的修改单( 不包括勘误的内容) 或修订版均不适用于本标准, 然而,
3、 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。 G B 1 5 9 7 4 -1 9 9 5 梅毒诊断标准及处理原则 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 梅毒s y p h i l i s 由梅毒螺旋体引起的一种慢性系统性传染病。 国境口岸 f r o n t i e r p o r t 国际通航的港口、 机场、 车站、 陆地边界和国界江河的关口。 检验对象 人出境人员; 申请检验人员。 检验程序 51 标本的处理 5 , 1 . 1 样本的核查 核实化验单或送检单与样本相符; 检查并记录有无溶血、 血脂过多以及黄疽等情况; 记录样品容器有无破损, 遗漏情况。 5 .
4、 1 . 2 制样 将血液室温放置 1 h后, 3 0 0 0 r / m二离心 1 5 mi n , 吸取血清进行检测。 5 . 1 . 3 血清保存 离心后的血清如在3d内检测, 可放 2 C- - - 8 冰箱保存; 短期内贮存可在一2 0 以下保存, 长期贮存, 应在一7 0 以下保存。 S N/ T 1 2 1 0 -2 0 0 3 5 . 2实验室检测 5 . 2 . 1 初筛试验 a ) 样 本验收合格后, 用符合规定的初筛检测试剂进行检测; b ) 结果呈阳性反应的标本, 应进行确认试验证实; c ) 方法参见附录Aa 5 . 2 . 2 确认试验 a ) 核 对标本和化验单,
5、 确认无误后, 应进行梅毒抗体确认试验; b ) 初筛试验呈阳 性反应的 标本用梅毒螺旋体血球凝集试验( T P H A ) 或梅毒螺旋体颗粒凝集试验 ( T P P A ) 进行确 认检测; c ) 方法参见附录 B ; d ) 当非特异性脂类抗原的检测用于疗效观察、 判定复发及再感染时, 可以不进行确认试验。 6 检验结果报告 6 . 1 初筛检测结果报告 a ) 检测阴性结果应填记“ 阴性” 并注明检验方法; b ) 检测中发现阳性反应的标本, 应进行梅毒抗体确认试验。 6 . 2 确认检测结果报告 a ) 阴性结果, 应出具梅毒螺旋体抗体检测阴性报告并注明确认试验方法; b ) 阳性结
6、果 , 应出具梅毒螺旋体抗体检测阳性报告并注明确认试验方法, 同时报告初筛、 确认试 验出现阳性反应的最高稀释度; 。 ) 可疑反应结果, 应出具梅毒螺旋体抗体检测可疑报告, 建议4 0 d 后复查。 S N/ T 1 2 1 0 - 2 0 0 3 附录A ( 资料性附录) 梅毒检测初筛试验方法 A . 1 快速血浆反应素环状卡片试验( r a p id p l a s m a r e a g e n t c i r c l e c a r d t e s t , 简称R P R ) A. 1 . 1 原理 试验所用的抗原( V D R L ) 是心磷脂、 卵磷脂和胆固醇的乙醇溶液。 梅毒螺
7、旋体破坏人体组织过程 中, 在体内释放出一 种抗原性心磷脂, 能 刺激机体产生反应素, 该反应素与从牛心中 提取的心磷脂在体 外可发生抗原抗体反应。卵磷脂的作用是加强心磷脂的抗原性, 胆固醇可增强抗原的敏感性。经过改 良的抗原加人活性炭颗粒, 与血清中的反应素反应, 出现可见的凝集块。 A . 1 . 2 仪器设备 离心机、 微型震荡器、 加样器。 A . 1 . 3 试剂盒构成 -R P R抗原悬液; 阳性对照 ; 阴性对照 ; -R P R卡片; 塑料加液滴管。 A . 1 . 4 定性试验 A . 1 . 4 . 1 试验步骤 a ) 分别吸取 。0 5 mL梅毒阳性对照液和梅毒阴性对照
8、液均匀铺加在卡片的两个圆圈中; b ) 在卡片其他圆圈中加人 0 . 0 5 mL待检血清, 并扩大到整个圆圈; c ) 用滴管和专用针头, 加一滴R P R抗原悬液; d ) 用手或机械转动器( 1 0 0 r / mi n ) 转动卡片 8 mi n , 观察结果。 A . 1 . 4 . 2 结果判定 阳性反应: 卡片圆圈中可见中等或较大的黑色凝集块; 阴性反应: 卡片圆圈中无黑色凝集块, 仅见均匀的不凝集现象。 A . 1 . 4 . 3 注意事项 梅毒阴性对照出现凝集物或梅毒阳性对照未出现凝集物, 本次试验结果无效; 试剂使用前应充分摇匀; 试剂使用前应平衡至室温。 A . 1 .
9、5 定f试验 待测血清用等渗盐水在卡片上作五个稀释度: 原血清、 1, 2 , 1 4 , 1 8 , 1 1 6 ; 按定性试验步骤操作, 以出现阳性反应的最高稀释度报告结果。 A. 2 A. 2 甲苯胺红不加热血清试验( T R U S T ) 1 原理 V D R L抗原悬浮于特制的甲苯胺红中, 与血清中的反应素反应, 出现红色凝集块。 A. 2 . 2仪器设备 离心机、 微型震荡器、 加样器。 S N/ T 1 21 0 -2 0 0 3 A . 2 . 3 试剂盒构成 -T R U S T抗原悬液; 阳性对照; 阴性对照; 实验专用卡片; 塑料加液滴管。 A . 2 . 4 定性试验
10、 A . 2 . 4 . 1 试验步骤 a ) 分别吸取。 . 0 5 m L梅毒阳性对照液和梅毒阴性对照液均匀铺加在卡片的两个圆圈中; b ) 在卡片其他圆圈中加人 0 . 0 5 m L待检血清, 并扩大到整个圆圈; e ) 用滴管和专用针头, 垂直滴加一滴 T R US T抗原悬液; d ) 用手或机械转动器( 1 0 0 r / mi n ) 转动卡片8 mi n , A . 2 . 4 . 2 结果判定 阳性反应: 卡片圆圈中可见中等或较大的红色凝集物; 阴性反应: 卡片圆圈中可见均匀的抗原颗粒而无红色凝集物。 A . 2 . 4 . 3 注意事项 同 A. 1 . 4 . 3 .
11、A . 2 . 5 定量试验 a ) 待测血清用等渗 盐水在卡片上作五个稀释度: 原血 清, 1 , 2 , 1 , 4 , 1 , 8 , 1 , 1 6 ; b ) 按定性试验步骤操作, 以出现阳性反应的最高稀释度报告结果。 A . 3 酶联免疫吸附试验( E L I S A ) A. 3 . 1 原理 在反应孔壁上包被基因重组的梅毒螺旋体特异性抗原, 加人待检血清和酶标记的抗原, 进行孵育。 如果待检血清中存在梅毒螺旋体抗体, 就会形成固相抗原一 抗体一 酶标抗原复合物。根据底物颜色变化, 检测抗体的存在情况。 A . 3 . 2 仪器设备 酶标仪、 洗板机、 离心机、 加样器。 A .
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