SN-T 1358.1-2004 马传染性贫血补体结合试验方法.pdf.pdf
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1、SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N / T 1 3 5 8 . 1 - 2 0 0 4 马传染性贫血补体结合试验方法 P r o t o c o l o f c o m p l e m e n t f i x a t i o n t e s t f o r e q u i n e i n f e c t i o u s a n a e m i a 2 0 0 4 - 0 6 - 0 1 发布 2 0 0 4 - 1 2 - 0 1 实施 中华人民共和匡 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 M S N/ T 1 3 5 8 . 1 -2 0 0 4 o li吕 本标准的附
2、录 A为规范性附录, 附录B为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位: 中华人民共和国山东出人境检验检疫局。 本标准主要起草人: 王浩、 柳炳兰、 巫剑平、 曲贵威。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 S N/ T 1 3 5 8 . 1 -2 0 0 4 马 传 染 性 贫血 补体 结 合试 验 方 法 范围 本标准规定了马传染性贫血补体结合试验方法。 本标准适用于马传染性贫血抗体水平的检测。 2仪器设备 2 . 1 培养箱。 2 . 2 冰箱。 2 . 3 恒温水浴箱。 2 . 4 离心机, 离心管。 2 . 5 天平( 感量 0 . 1 g
3、 ) , 2 . 6 平皿 : 规格 9 0 mmx1 5 mm, 2 . 7三角烧 瓶( 5 0 mL-2 5 0 mL ) , 2 . 8 试管、 试管架: 规格 1 2 X 3 7 m m, 1 0 X1 0 0 mm, 2 . 9 吸管: 规格 1 m L , 5 mL , 1 0 mL , 2 . 1 0 2 0 0 p L可调微量移液器和吸头。 3材料 3 . 1 试剂: 氯化钠、 氯化钙、 氯化镁、 葡萄搪、 拘椽酸钠、 巴比妥钠、 巴比妥、 明胶均为分析纯 3 . 2 溶液的配制: 见附录 A 3 . 3 抗原: 检测用标准抗原应用同一批号的两种抗原, 即V抗原( 接毒抗原)
4、, C抗原( 对照抗原) 。 3 . 4 标准阳性血清及阴性血清: 由出售抗原的药厂同时提供。 3 . 5 被检血清: 参见附录B , 3 . 6 补体: 参见附录B , 3 . 7 溶血素 由生物药品厂购人, 保存于冰箱中备用( 由于溶血素加有等量甘油防腐, 故使用时应将甘 油扣除, 即 2 mL中溶血素的实量为 1 mL ) , 3 8红细 先将溶血素稀释 1 00倍, 即0 . Z mL溶血素加人 9 . sm L G V B溶液。按表4 测定溶血素效价。 表 3溶血素稀释 法单位为毫升 访迎 塑 缪 10 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 4 0 0 0 50 0 0 60 0
5、0 70 0 0 8 0 0 09 0 0 0 G V B液 10Q倍溶血素 1。 。 。倍溶血素 一 1 1 2 l 3 1 4 1 5 1 6 1 , 7 1 9 l 表 4 溶血素效价测定单 位 为 毫 升 次 10 0 02 0 0 03 0 0 04 0 0 0 5 0 0 0 60 0 0700 0 8 0 0 09 0 0 0 溶 血 素 1 , 4 0 倍补体 GV B液 4 %红细胞液 0 . 0 5 0 1 0 l 0 . 0 5 一 0. 0 5 0 . 1 0 , 1 0, 05 0. 05 0 . 1 0 l 0. 0 5 0. 05 0 l 0 . 1 0 0 5
6、0. 0 5 0 . 1 0 . 1 0 0 5 0 05 0 1 0 . 1 0. 05 0 0 5 O 1 0 . 1 0 0 5 0. 05 0 . 1 0 . 1 0 0 5 0. 0 5 0 . 1 0 1 0 0 5 置37水浴箱 10mn 结 果全 溶全 溶全溶全 溶全溶部 分 溶部 分 溶部 分溶不 溶 发生全部溶血的最大稀释倍数为该批溶血素的一个单位。表 4中从 1 0 00 倍50 00 倍各管都呈 现完全溶血, 而以50 00 倍管中所含溶血素量最少, 因此, 该试验溶血素效价为 1, 5o 00 倍。 在正式试验时, 溶血素按两个单位稀释使用。如效价为 1,50 00
7、倍, 则溶血素稀释成 25 00 倍 使用 , 5正式试验 5 . 1 取若干列试管 , 每列七管, 每两列为一组, 按表 5排列. S N/ T 1 3 5 8 . 1 -2 0 0 4 表 5 马传贫补反操作方 法( 示例)单 位 为 毫 升 5 . 1 . 飞 加被检血清 在每支试管中加人被检血清0 . 0 5 mL 。而阳性血清对照组加 0 . 0 5 mL阳性血清; 抗原对照组每管 加 G V B液 0 . 0 5 mL . 5 . 1 . 2 加抗 原 各组的第一列每管加人 V抗原0 . 0 5 mL 。各组的第二列每管加人 C抗原。 . 0 5 mL . 5 . 1 . 3 加朴
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