SN-T 1396-2004 弓形虫病间接血凝试验.pdf.pdf
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1、SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N / T 1 3 9 6 -2 0 0 4 弓 形 虫 病 间 接 血 凝 试 验 I n d i r e c t h e ma g g l u t i n a t i o n t e s t f o r t o x o p l a s m o s is 2 0 0 4 - 0 6 - 0 1 发布2 0 0 4 - 1 2 - 0 1 实施 中华人民共和国、 * V - * -. 理 曳 _“ 尤 压, 胜 守 a -ti n户 、 4 J 、 - - 从 . - . 丝月勿c夕 J 飞氢 拈庄 幢了月 宝 立苛门. 立 t t 丈 汽乡、
2、夕 正 习 S N/ T 1 3 9 6 -2 0 0 4 月 U吕 本标准的附录 A为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国湖北出人境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人: 陈建军、 郭明星、 付文鹏、 赵晖等。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 S N/ T 1 3 9 6 -2 0 0 4 弓 形 虫 病 间 接 血 凝 试 验 范围 本标准规定了弓形虫病的间接血凝( I HA ) 试验操作方法。 本标准适用于动物弓形虫病的检疫、 诊断及抗体水平的检测。 2材料和试剂 2 . 1 9 6 ( 1 2 X8 ) 孔 1 1 0 0
3、V型血凝板及玻璃盖板 2 . 2 可调式微量移液器及吸头 2 . 3 平板振 荡器。 2 . 4 弓形虫 I HA诊断液( 抗原效价)1 : 1 0 2 4 ) , 标准阴性对照血清( 效价-1 : 4 ) , 标准阳性对照血清 ( 效价)1 , 1 0 2 4 ) 。 2 . 5 稀 释液按附录 A所示要求配制 , 所用试剂均 为分析纯 。 3 采样 无菌采动物静脉血液约1 m L -2 mL , 静置自然析出血清或待血液凝固后以6 0 0 g 离心分离血清, 5 6 水浴灭活3 0 m i n , 预冷, 用健康公绵羊红细胞( 按血清/ 红细胞体积比约 1: 1 混匀) 室温吸附 2h (
4、 或 4 冰箱过夜) , 6 0 0 g 离心 1 0 min , 取上清( 要求无血球、 无溶血、 无杂菌污染) , 置 4 冰箱备检。 4操作步骤 4 . 1 取洁净的血凝板, 于各孔中加入 7 5 I L稀释液。 4 . 2 取受检血清 2 5 f c L加人第一列孔中, 用移液器反复吹吸混匀, 取 2 5 p L加人第二列孔, 混匀后取 2 5 p L加人第三列孔中, 如此4 倍稀释至第6孔, 混匀即 1 : 40 9 6弃去 2 5 p L ( 对于大量样品可只稀释 至 1,6 4见表 1 ) , 表 1 弓形虫病 间接血凝试验操作术式 孔 号1234567 血清稀释度0,) 41
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