SN-T 1379.1-2004 猪瘟单克隆抗体酶联免疫吸附试验.pdf.pdf
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1、SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N / T 1 3 7 9 . 1 -2 0 0 4 猪瘟单克隆抗体酶联免疫吸附试验 P r o t o c o l o f t h e e n z y m e - l i n k e d i mm u n o s o r b e n t a s s a y u s i n g mo n o c l o n a l a n t i b o d y f o r t h e d e t e c t i o n o f a n t i b o d i e s a g a i n s t c l a s s i c a l s w i n e f e v
2、 e r v i r u s 2 0 0 4 - 0 6 - 0 1 发布2 0 0 4 - 1 2 - 0 1 实施 中华人民共和国 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 发 布 S N/ T 1 3 7 9 . 1 -2 0 0 4 月 臼吕 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国广东出人境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人: 许如苏、 郭奕亮、 肖德雄。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 S N/ T 1 3 7 9 . 1 -2 0 0 4 猪瘟单克隆抗体酶联免疫吸附试验 范 围 本标准规定了单克隆抗
3、体酶联免疫吸附试验( 间接法) 检测猪瘟抗体的方法。 本标准适用于猪瘟的检疫、 诊断和疫苗免疫监测。 仪器设备 2 . 5 酶标板。 可调移液器。 恒温培养箱。 电子天平: 感量0 . 0 0 1 g , 酶标检测仪。 ,.乃乙勺J三且 朽今2,J夕 试荆 31 诊断试剂 3 . 1 . 1 猪瘟强毒单抗纯化酶联抗原。 3 . 1 . 2 猪瘟弱毒单抗纯化酶联抗原. 3 . 1 . 3 标准阴性血清。 3 . 1 . 4 标准阳性血清。 3 . ! . 5 酶标二抗( 兔抗猪! g G辣根过氧化物酶结合物) 。 3 . 2 被检血清: 无溶血、 无污染。 3 . 3 溶 液 3 . 3 . 1
4、 试验所需溶液包括: 包被液( p H 9 . 6 碳酸盐缓冲液) ; 磷酸缓冲盐水( P B S ) ; 磷酸缓冲盐水一 吐温( P B S - T ) 洗涤液; 稀释液( P B S - T - B S ) ; 邻 苯二胺( O P D ) 底物液: 使用前配制; 终止液( 2 m o t / L H, S O , ) . 3 . 3 . 2 溶液配制见附录 A a 注: 诊断试剂由中国兽药监察所生产。给出这一信息是为了方便本标准的使用者, 并不表示对该产品的认可。如 果有其他等效产品, 则可按其使用说明书使用 操作方法 4 . 1 包被 用包被液将猪瘟病毒( 强毒或弱毒) 单抗纯化酶联抗
5、原作1 0 0 倍稀释, 每孔加人1 0 0 川 _ , 置湿 盒于 4 0C过夜。 4 . 2洗板 弃去孔内液体, 用洗涤液洗板三次, 每次 3 mi n -5 面n , 甩干孔内残液, 于滤纸上拍打吸干。 S N 丫T 1 3 7 9 . 1 - 2 0 0 4 43 加被检血清和标准血清 用稀释液将待检血清作 4 0 0 倍稀释, 每孔加 1 0 0 I L 。同时将标准阴性、 阳性血清分别作 1 0 0倍稀 释作对照, 3 7 培育1 . 5 h - - 2 h , 4 . 4洗板 重复 4 . 2 。 4 . 5 加酶标二抗 用稀释液将兔抗猪 坛G - 辣根过氧化物酶结合物稀释至工作
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