SN-T 1420-2004 昏眩病诊断操作规程.pdf.pdf
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1、SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N/ T 1 4 2 0 -2 0 0 4 昏 眩 病 诊 断 操 作 规 程 P r o t o c o l o f d i a g n o s i s f o r w h i r l i n g d i s e a s e 2 0 0 4 - 0 6 - 0 1 发布2 0 0 4 - 1 2 - 0 1 实施 中华人民共和匡 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 婿 S N/ T 1 4 2 0 -2 0 0 4 月U吕 本标准的附录 A, 附录C, 附录 D均为规范性附录, 附录 B为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会
2、提出并归口。 本标准起草单位: 中华人民共和国珠海出人境检验检疫局。 本标准主要起草人: 吴小伦、 薄清如、 黄建珍、 赖子平、 兰乃洪。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 S N/ T 1 4 2 0 -2 0 0 4 昏 眩 病 诊 断 操 作 规 程 范 围 本标准规定了昏眩病的诊断操作规程。 本标准适用于进出口继缚 鱼的昏眩病检验检疫。 2 材料 2 . 1 仪器设备 普通天平, 分析天平, 普通离心机, 微型振荡器, 水浴锅, 振荡水浴装置, 普通显微镜, 血球计, p H试 纸, 研钵, 解剖刀, 镊子, 烧杯, 玻片, 离心管, 可调移液管等。 2 . 2 试剂 漂白粉
3、, 1 0 %福尔马林, 1 %孔雀绿, 7 0 %, 8 0 %, 9 0 %, 9 5 %, 1 0 0 %酒精, 二甲苯, 姬姆萨染色液( 见附 录 A ) , 胃蛋白酶液( 0 . 5 %)( 见附录A) , 酪蛋白酶液( 0 . 1 %)( 见附录 A ) , 0 . 1 m o l / L氢氧化钠, 1 0 %牛 血清蛋白, 磷酸盐缓冲液( P B S )( 见附录 A ) , 甲醇, 丙酮。所有化学试剂均为分析纯。 昏眩病诊断 3 . 1 临床症状 病鱼作狂乱追尾运动, 特别当喂食或被惊吓时症状加剧。在冷水条件下, 旋转运动的临床表现通常 发生在感染后 2 个3 个月, 并可持续
4、长达一年。2 月龄8月龄的病鱼, 躯干后部和尾部呈黑色。昏 眩病后期的病鱼鳃盖骨萎缩, 鳃裸露在外, 下领骨畸形, 脊椎弯曲, 眼后头盖骨严重凹陷, 这种鱼染病三 年后仍带有病原体。 3 . 2 寄生虫检查 3 . 2 . 1 病原体形态 该病病原体为脑粘体虫( M y x o s o m a c e r e b r a L i s ) ,脑粘体虫的抱子大小为( 6 . 5 k m -7 t m ) X ( 7 . 5 p m- - - 8 E + m) , 微卵形, 侧面观似小扁豆; 有两个梨形极囊, 袍质中有两个圆形的胚核, 一条无缝合脊 的明显可见的缝合线, 无嗜碘泡 ( 参见附录B )
5、 , 3 . 2 . 2 采样 3 . 2 . 2 . 1 采样原则 选择有临床症状的鱼作寄生虫检查, 若无症状, 可根据鱼的数量随机抽样检查。 3 . 2 . 2 . 2 采样数皿 对有症状的鱼取5 尾1 0 尾作寄生虫检查, 或对无症状鱼群则按表 C . 1 进行抽查 3 . 2 . 3 涂片检查 3 , 2 . 3 . 1 将头部纵切开, 观察耳区软骨组织中有无胞囊( 乳白色, 直径为 1 mm-2 m m) , 3 . 2 . 3 . 2 若有胞囊, 取一小块胞囊放在载玻片上, 压碎, 用 4 5 。 倍6 0 0 倍显微镜检查, 观察是否有脑 粘体虫抱子 3 . 2 . 3 . 3
6、如果没有发现胞囊, 则从耳石区将软骨组织切开, 刮取内含物作涂片检查。左右耳石区都需 检查。 3 . 2 . 3 . 4 上述两项检查都未发现抱子, 可按 3 . 2 . 4检查。 3 . 2 . 4 涂片染色检查 3 . 2 . 4 . 1 将可疑鱼的头部割下并纵切开, 4 5 水中孵育 1 mi n -3 m i n , 将松散的肉和脑移到一废物容 S N/ T 1 4 2 0 -2 0 0 4 器( 水和家用漂白剂比例为 1: 1 ) 消毒, 从脑壳、 耳石、 鳃拱处收集骨和软骨样。用等体积的 1 0 %福尔马 林于研钵磨碎样品。用水将所有磨碎样冲人小烧杯并使物质沉淀。 3 . 2 .
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