SN-T 1314-2003 水貂阿留申病对流免疫电泳操作规程.pdf.pdf
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1、1 I 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N / T 1 3 1 4 - 2 0 0 3 水貂阿留申病对流免疫电泳操作规程 P r o t o c o l o f c o u n t e r i mmu n o e l e c t r o p h o r e s i s f o r mi n k a l e u t i a n d i s e a s e 2 0 0 3 - 0 8 - 1 8 发布2 0 0 4 - 0 2 - 0 1 实施 中华人民共和国 国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 发 布 S N/ T 1 31 4 -2 0 0 3 o li舀 本标准电泳操作
2、方法参考农业部 动物检疫操作规程) ( 1 9 8 8年版) 的检疫方法, 并制定了样品加样 前处理方法。 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位: 中华人民共和国北京出人境检验检疫局。 本标准主要起草人: 赖平安、 张鹤晓、 刘艳华。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 S N/ T 1 3 1 4 -2 0 0 3 水貂阿留申病对流免疫 电泳操作规程 范围 本标准规定了水貂阿留申病对流免疫电泳试验操作规程。 本标准适用于用对流免疫电泳方法检测进、 出境水貂阿留申病抗体。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条
3、款。凡是注 日期的引用文件, 其随后所有 的修改单( 不包括勘误的内容) 或修订版均不适用于本标准, 然而, 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本适用于本标准。 G B / T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法 材料准备 3 . 1 仪器与器材 3 mm厚 1 0 0 mmX4 5 mm玻璃板; 电压 0 V-3 0 0 V, 电流 0 mA 5 0 m A的电泳仪; 宽 1 0 0 m m的 电泳槽; 直径3 mm的打孔器; 1 0 0 I L微量可调移液器及配套吸头; 塑料毛细采血管。 3 . 2 p H8 . 5
4、 -8 . 6 的三轻甲基氨基甲烷( T r i s ) 一 巴比妥钠缓冲液 巴比 妥钠1 0 . 3 1 g 三经甲基氨基甲烷6 . 0 0 5 g 叠氮钠。 , 2 9 二级水( 符合 G B / T 6 6 8 2 ) 1 0 0 0 mL 各成分加人适量二级水( 符合 G B / T 6 6 8 2 ) 中溶解后, 用盐酸将 p H值调至 8 . 5 -8 . 6 , 最后用二级 水( 符合 G B / T 6 6 8 2 ) 定容至 1 0 0 0 rnL 3 . 3 琼脂糖 国产或进口电泳用分析纯琼脂糖。 3 . 4抗原 由阿留申病毒国际标准毒株Ut a h - 1 的猫肾传代细胞
5、培养物制备而成由指定单位提供。 3 . 5血清 3 . 5 . 1 阳性血清: 由指定单位提供。 3 . 5 . 2 阴性血清: 由指定单位提供。 3 . 5 . 3 被检血清: 用塑料毛细管在貂趾尖采血, 将管两端烧融封口, 放 2 0 0 C - - 3 0 环境静置 1h . 再放 4 冰箱 1 8 h - - 2 0 h . 析出血清后加人。 . 5 mL或 1 . 5 mL离心管中. 3 0 0 0:m i n离心 5 mi n取上清液 备用 操作规程 4 . 1 铺板 取 3 m m厚 1 0 0 mrnX4 5 mm水平无划痕的玻璃板, 将油污洗净后, 平放于水平桌面上, 用 1
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