SN-T 1384-2004 蜜柑大实蝇鉴定方法.pdf.pdf
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1、SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 S N/ T 1 3 8 4 -2 0 0 4 蜜 柑 大 实 蝇 鉴 定 方 法 Me t h o d s f o r i d e n t i f i c a t i o n o f j a p a n e s e o r a n g e f l y B a c t r o c e r a ( T e t r a d a c u s ) t s u n e o n i s ( M i y a k e ) 2 0 0 4 - 0 6 - 0 1 发布2 0 0 4 - 1 2 - 0 1 实施 人民共和国 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 发 布
2、S N / T 1 3 8 4 -2 0 0 4 o li吕 本标准的附录C为规范性附录, 附录 A 、 附录B和附录 D为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国广东出人境检验检疫局负责起草. 本标准主要起草人: 吴佳教、 梁广勤、 梁帆、 杨国海、 胡学难、 张志红. 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 S N/ T 1 3 8 4 -2 0 0 4 蜜 柑 大 实 蝇 鉴 定 方 法 范 围 本标准规定了蜜柑大实蝇的鉴定方法。 本标准适用于进口蜜柑大实蝇寄主植物( 参见附录 A ) 及其果实时对蜜柑大实蝇的鉴定。 2 原理 蜜柑大实蝇 B a c
3、 t r o c e r a ( T e t r a d a c u s ) t s u n e o n i s ( Mi y a k e ) , 属双翅目( D ip t e r a ) , 实蝇科( T e p h r i t i d - a e ) 、 寡毛实蝇亚科( D a c i n a e ) 、 离腹寡毛实蝇属( B a c t r o c e r a ) 、 大实蝇亚属( T e t r a d a c u s ) , 主要以幼虫随 被害果实( 有时也能随被害种子) 作远距离传播, 其卵也可随果实传播, 围蛹则可随果实的包装物或寄主 植物所附土壤传播。 蜜柑大实蝇的形态特征、
4、寄主植物、 传播途径及生物学特性为制定鉴定方法提供了依据。 术语和定义 下列术语 和定义适用于本标准 。 3 . 1 上额眶柔s u p e r i o r f r o n t o-o r b i t a l b r i s t l e s 位于额区靠头顶 的一对或二对鬃的统称。 下额眶撰i n f e r i o r f r o n t o-o r b i t a l b r i s t le ! 位于额区上额眶鬃之下的数对鬃的统称。 顶集v e r t i c a l b r is t le s 位于头顶、 两复眼之间, 单眼三角区周围的二对鬃( 分别称内顶鬃和外顶鬃) 的统称。 肩脾h
5、u me r a l c a l l i 中胸盾片的前侧方略为隆出的区域。 3 . 5 背gi ll 板脚 n o t o p l e u r a l c a l l i 肩脚与翅基之间的背侧板上三角形隆起 3 . 6 小盾前粱p r e s c u t e l l a r b r i s t le s 小盾片前方, 近盾片后缘的一对鬃。 小盾票s c u t e ll a r b r i s t l e s 小盾片上的一对 或二对鬃 。 前翅上撰a n t e r i o r s u p p a - a l a r b r i s t l e s 中胸背板侧缘 , 前翅翅基正上方 的一对 鬃
6、。 S N/ T 1 3 8 4 -2 0 0 4 3 . 9 后 翅上撰 p o s t e r i o r s u p p a - a l a r b r is t l e s 中胸背板后侧角, 翅基之上的一对鬃o 3 . 1 0 中侧板撰m e s o p l e u r a l b r i s t l e s 中胸侧板上, 在背侧板脾之下的鬃。 3 . 1 1 背侧撰 n o t o p l e u r a l b r i s t l e s 背侧区上的二对鬃, 分别位于三角形背侧板脚之端部和肩脚与背侧板脾之间。 3 . 1 2 肩板票 s c a p u l a r b r i s
7、t l e s 位于中胸背板前缘的鬃的统称。 3 . 1 3 中 胸侧板条 m e s o p le u r a i s t r i p e s 位于胸部侧面, 盖住中胸上前侧片后缘和上后侧片前缘, 并常延伸到下前侧片上缘的一对黄色 条带。 3 . 1 4 中 胸背 板缝m e s o n o t a l s u t u r e 中胸背板上由背侧板脾内缘至中胸背板中央的一条凹线。 3 . 1 5 缝后侧黄色条l a t e r a l p o s t - s u t u r a l v i t t a 始于中胸缝或其之前, 沿中胸背板侧缘的一对黄色带或黄色条。 3 . 1 6 缝 后中黄色条
8、m e d i a l p o s t - s u t u r a l v i t t a 位于中胸背板中线上的一条黄色带。 注:实蝇分类学常见术语图示, 参见附录B . 仪器 、 用具 和试荆 4 . 1 仪器与用具 体视显微镜、 测微尺、 干燥箱、 冰箱、 温湿度计、 量筒( 5 0 mL , 5 0 0 mL ) 、 烧杯数个( 大号、 小号) 、 培养 皿、 小型干燥器、 剪刀、 解剖刀、 解剖针、 昆虫针( 0 0号、 四号) 、 载玻片、 盖玻片、 标签纸、 三级台、 三角纸、 酒精灯、 玻璃棉、 养虫杯、 养虫盒、 养虫箱、 防虫网罩( 用 4 0目纱网做衬底) 、 白瓷盘( 大
9、号、 小号) 。 4 . 2试剂 1 0 % 氢氧化钠( 或1 0 %氢氧化 钾) 溶液、 封片胶、 苯酚、 二甲苯、 7 5 %乙醇、 丙三醇、 水合三氯乙醛、 阿 拉伯树胶粉、 蒸馏水。 4 . 3 试剂的配制 4 . 3 . 1 1 0 %氮氛化钠( 或 1 0 %氢氧化钾) 溶液的配制 称取氢氧化钠( 或氢氧化钾) 1 0 g , 加人1 0 0 m L蒸馏水, 溶解后即可。 4 . 3 . 2 封片胶的配制 称取阿拉伯树胶粉 3 0 g干烧杯中, 加人5 0 mL蒸馏水( 最好是温水以加速溶解) 。溶解后, 加人 2 0 0 m l 水合三氯乙醛及2 0 m L 丙三醇, 置于5 5
10、 0C - 6 0 的 干燥箱内。 一天后, 用玻璃棉过滤( 过滤时 仍置于5 5 -6 0 的干燥箱内进行) 。 S N/ T 1 3 8 4 -2 0 0 4 4 . 3 . 3 保存液的配制 量取 7 5 %乙醇 1 0 0 m L, 加人 1 m L丙三醇。 5实验室鉴定 5 . 1 鉴定前的培养方法 5 . 1 . 1 卵或幼虫的培养 将现场采取的卵和幼虫部分个体制成鉴定标本, 其余个体继续用原寄主果实培养。具体的培养方 法是: 将带有卵或幼虫的寄主果实放在小号白瓷盘里, 然后将小号白瓷盘放在装有自来水的大号白瓷盘 内, 再用防虫网罩盖住小号白瓷盘, 罩的下方边缘浸没于大号白瓷盘内的
11、水中, 置于温度为 2 2 0 C - - - 2 8 0C , 湿度为5 0 %-g o %的环境中培养 5 d - - 1 0 d 。在样品培养过程中, 感染在果实中的卵或幼虫发育 至老熟幼虫时将会弹跳人大号白瓷盘的水中, 易于发现。 5 . 1 . 2 围蛹的培养 取一盛有半干湿( 含水量约 5 %) 洁净细砂的养虫杯, 将现场检疫收集的或室内培养得到的围蛹埋 人距细砂表面3 c m-5 c m处( 若是老熟幼虫则可直接将其置于细砂表面, 幼虫将钻人砂中化蛹) , 然后 置于养虫箱中培养, 待成虫羽化。培养环境温度为 2 2 0C - 2 8 0 C , 湿度为5 0 % 9 0 %,
12、培养过程中注意 保湿 。 5 . 1 . 3 初羽化成虫的饲养 成虫羽化后, 悬挂相应寄主果实切片于养虫箱内供其取食, 待成虫斑纹的色泽和大小稳定后( 约需 5 d ) , 收集成虫并置于冰箱冷冻层 0 . 5 h - - 1 h , 杀死, 待鉴定。 5 . 2标本的预处理 5 . 2 , 1 成虫还软处理 如果成虫虫体已干硬, 在制作标本前应进行还软处理。具体方法是: 取一小型干燥器, 加人干净细 砂约2 c m, 加水至漫过细砂表面约 1 c m, 并滴加数滴苯酚以防标本腐烂, 上层放待还软的成虫标本, 密 闭一天即可。 5 . 2 . 2 成虫标本制备 取 0 0号昆虫针, 借助三级台
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