WS-T 242-2004 职业接触三硝基甲苯的生物限值.pdf.pdf
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1、I C S 1 3 .1 0 0 C 5 2 甘S 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准 WS / T 2 4 2 - 2 0 0 4 职业接触 三硝基 甲苯 的生物 限值 B i o l o g i c a l l i m i t v a l u e f o r o c c u p a t i o n a l e x p o s u r e t o t r i n i t r o t o l u e n e 2 0 0 4 - 0 4 - 0 7 发布2 0 0 4 - 1 0 - 0 1 实施 中华人民共和国卫生部发 布 WS / T 2 4 2 -2 0 0 4 月 纽吕
2、本标准是根据流行病学调查和现场劳动卫生调查资料, 并参考国内三硝基甲苯研究文献和项目研 究结果提出的。 本标准的附录A是规范性附录, 附录B是资料性附录。 本标准由中华人民共和国卫生部卫生法规与监督司提出。 本标准由中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所和辽宁辽阳 1 5 3 医院共同负责起草。 本标准主要起草人: 郑玉新、 刘玉瑛、 王雅文、 王强、 庞朝强。 本标准由卫生部委托技术归口单位中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所负责解释。 WS / T 2 4 2 -2 0 0 4 职 业 接触 三硝 基 甲苯 的 生 物 限 值 范围 1 . 1 本标准规定了职业接触三硝基甲苯化合物的
3、生物监测指标、 生物限值及监测检验方法 1 . 2 本标准适用于职业接触三硝基甲苯劳动者的生物监测。 2生物监测指标和接触 限值 生物监测指标和接触限值见表 1 , 表 1 生物监测指标 职业接触生物限值采样时间 血中4 - 氨基一 2 , 6二硝基甲苯一 血红蛋白加合物2 0 0 n g / g Hb接触 4个月后任意时间 监测检验方法 血中4 - 氨基一 2 , 6 二硝基甲苯一 血红蛋白加合物的监测检验按附录 A执行。 WS / T 2 4 2 -2 0 0 4 附录A ( 规范性附录) 血中 4 - 氨基- 2 , 6二硝基甲苯一 血红蛋白加合物的竞争抑制性酶联免疫测定法 A. 1 原
4、理 4 - 氨基一 2 , 6 二硝基甲 苯( 4 A ) 是T N T在体内的主要代谢产物之一, 在体内可与血红蛋白 共价结合 形成 4 A 一 血红蛋白加合物( 4 A - Hb ) 。本实验利用抗原一 抗体的竞争性抑制反应检测半抗原( 4 A - Hb ) . 将 4 A - Hb 和一定量的等体积单克隆抗体( Mc Ab ) 按照顺序加人到已经包被有检测抗原的( 4 A - B S A) 酶 联免疫测试板上, 4 A - Hb 与包被的4 A - B S A对抗体产生竞争性结合反应。洗去未结合的抗体后, 用酶 标二抗与包被抗原的抗体相结合, 再显色测定吸光度。吸光度与结合到酶标板上抗体
5、的量成正比例关 系, 与 4 A - Hb的量呈反比例关系。 A. 2仪 器 A . 2 . 1 酶联免疫检测仪, 4 9 0 n m波长。 A . 2 . 2 离心机。 A. 3 试 剂 A . 3 . 1 包被缓冲液: 0 . 0 5 mo l / L碳酸盐缓冲液( p H9 . 6 ) . A . 3 . 2 底物缓冲液: 柠檬酸一 磷酸盐缓冲液( p H5 . 0 ) . A . 3 . 3 底物反应液: 将邻苯二胺( O P D ) 5 mg 溶解在 1 0 mL底物缓冲液中, 临用前加人 1 5 p L体积分 数为3 0 %的双氧水( Hz 0 2 ) o A . 3 . 4 4
6、A标准液。 A . 3 . 5 辣根过氧化物酶标记羊抗鼠抗体 H R P - I g G e A . 3 . 6 4 A - Hb单克隆抗体。 A . 3 . 7 稀释液: 含5 %小牛血清的。 . 0 1 mo l / L P B S 缓冲液。 A . 3 . 8 4 A - B S A溶液。 A . 3 . 9 酶标板洗涤液: 含0 . 1 %吐温- 2 0的0 . 0 1 m o l / L P B S ( P H 7 . 4 )。 A . 4 样品采集、 运输和保存 采集静脉血 1 . 0 MI , 注人经肝素处理的试管中, 混匀。 A . 5分析步骤 A . 5 . 1 样品处理 将
7、样品离心( 8 0 0 g , 5 m i n ) , 将血浆吸出, 向红细胞中加 3 mL生理盐水于红细胞中混匀, 离心 ( 8 0 0 g , 5 m i n ) 弃去上清液, 反复洗涤3 次。 冰冻过夜, 融化后剧烈振荡5 m i n , 使红细胞破裂释放出 血 红蛋白, 1 0 0 0 g 离心5 mi n , 所得上清液即为待测样品。 A . 5 . 2 样品测定与标准曲线的绘制: a ) 将 B S A用包被缓冲液稀释成2 p g / m L后, 在酶标板上每孔加入 1 0 0 p L , 4 过夜。 b ) 每孔先加人 5 0 p L待测样品, 再加人等体积的 1, 1 0 0
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