[农业标准]-NYT568-2002.pdf
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1、I C S 1 1 . 2 2 0 B 4 1 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 N Y / T 5 6 8 =2 0 0 2 肠病毒性脑脊髓炎诊断技术 D i a g n o s t i c t e c h n i q u e s f o r e n t e r o v i r u s e n c e p h a l o my e l i t i s 2 0 0 2 一 0 8 一 2 7 发布 2 0 0 2 一 1 2 一 0 1实施 中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 发 布 5 41 N v / f 5 6 8 2 0 0 2 A IJ舌 本病属于细小核糖核酸病
2、毒科的肠道病毒属肠道病毒 ( 型( 简称Y E V) , 病毒主要感染动物的中枢 神经系统并繁殖, 使运动神经节细胞变性, 导致非化脓性脑脊髓炎 此病多见于哺乳仔猪和断奶仔猪, 成 年猪多为隐性感染, 引起发烧、 庆食、 共济失调、 四肢麻痹和痉挛, 该病的发病率和死亡率都很高, 造成严 重的经济损失 肠病毒r 1 . 脑脊髓炎( E n t c r o v i r u s e n c e p h a l o my e l i t i s ) , 曾称做捷中/ 塔尔凡氏病( T e s h e n / T a l f a n d i s e a s e ) , 是猪的一种严屯病毒性传染病, 被
3、世界动物卫生组织 Wo r l d ( ) r g a n i z a t i o n f o r A n i m a l H e a l t h ( 英) , O f f i c e I n t e n t i o n a l d e s E p i z o o t i c ( 法) , O I E 和我国农业部分别列为l 3 类和二类动物疫病 本标准是依据( N E ( 诊断试验和疫苗标准手册 ( 2 0 0 0 年版) ( M a n u a l o f S t a n d a r d s f o r D i a g n o s t i c b e s t s a n d V a c c
4、 i n e s , 2 0 0 0 ) 第2 . 6 . 3 章规定的主要技术制定的。两者的主要差异 是: 一本标准根据本国和国外实践经验规定 厂 使用主要致病原Y E V 1 )V病毒作为抗原. 未采用2 - 1 3 型Y E V, 未采用酶联免疫吸附( E L I S A) 技术; - 一 本标准根据本国实践经验将操作程序更加具体化。 本标准附录A、 附录B是规范性附录。 本标准由农业部畜牧兽医局提出 本标准山全国动物检疫标准化技术委员会归门。 木标准起草单位: 农业部动物检疫所。 本标准主要起草人: 封启民、 李昌琳。 N v / T 5 6 8 - - 2 0 0 2 肠病毒性脑脊髓
5、炎诊断技术 1 范 围 本标准规定了( 猪) 肠病毒性脑脊髓炎诊断技术要求 本标准适用于( 猪) 肠病毒性脑脊髓炎的病原鉴定及流行病学检查。 进出l 7 检疫和免疫抗体的检测 2 临床症状检查 临床上 分为四个型, 即急性型、 亚急性型、 慢性型和温和型, 此外还有无症状仅检出抗体的隐性感 染, 根据临床症状和病理变化( 见第 3 章) 可作出怀疑性诊断 该病潜伏期为 2 d 一2 8 d 2 . 1 急性型 病猪首先出现体温升高, 多在 4 0 . 0 C-4 1 . 1 C左右或更高, 病猪表现为厌食、 倦怠、 呕吐、 严重鼻 炎、 腹泻及行动失调。发病 1 d - - 2 d后, 体温降
6、至正常, 出现中枢神经系统症状, 如寒战、 感觉过敏、 抽 搐、 共济失调、 四肢僵直( 特别是后肢) 、 角弓反张和昏迷, 接着发生麻痹, 病猪呈犬坐姿或于一侧卧地, 前 肢作划水样. 受声响或触摸刺激时, 可引起四肢不协调运动, 或角弓反张, 也可见面部麻痹和失音。病猪 发生便秘。 传染性脑脊髓炎的病程发展迅猛, 瘫痪出现后的2 d - - 3 d . 就有8 0 %-9 5 %的病猪可因呼吸 中枢麻痹而死亡. 有些病猪死于吸人性肺炎, 有些病例急性期之后食欲有所恢复, 但见消瘦并伴有麻痹 症状 。 2 . 2 亚急性型 病程为6 d -8 d . 症状与急性型相似, 但较轻缓, 死亡较少
7、 2 . 3 慢性型 多发于成年猪, 病程为几周到几个月, 特征为沉郁、 行动困难, 尾部麻痹、 前肢瘫痪, 其中有 2 0 %的 病猪因肺炎、 褥疮、 败血症等原因死亡。 2 . 4 温和型 毒力较低的毒株引起, 症状较轻, 发病率和死亡率较低, 主要侵害仔猪 病初体温升高, 运动失调 这 些症状大多在几天内消失, 但有些病猪则随后出现兴奋、 发抖、 平衡失调、 运动失调. 最后麻痹等症状 3 组织病理学检 查 组织学诊断采集的样品有大脑、 小脑、 间脑、 延髓和颈腰部脊髓 这此样品用甲醛固定, 制成切片, 用 常规组织学方法染色, 显微镜检查可发现血管周围非化浓性淋巴细胞浸润, 浸润现象限
8、于灰质部, 偶尔 波及白质部。 间脑和小脑有明显的变化; 大脑半球较轻, 病的后期神经兀细胞变性. 并被胶质结缔组织细 胞代科; 常见非化浓性脑脊髓炎, 特别是在小脑部分 4 病毒分离及鉴定 4 . 1 材料准备 4 . 1 . 1 病料的采集 将发病期的猪扑杀, 用无菌操作法取脑和脊髓样品, 放在p H 7 . 2 的磷酸I t a缓冲A ( P B S ) , I ( P B S NY/r 5 6 8 2 0 0 2 和甘油等录棍合) , 配力见附录 八 4 . 1 . 2 细胞 P K, 或 MR S : 猪肾细胞, 至生民良好的单层细胞 4 门. 3 细胞培养液 配方见附录B 4 .
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