[商检标准]-SN 0168-1992 出口食品平板菌落计数.pdf
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1、5N 一 丫 苏 疼丫 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 s N 0 1 6 8 一 9 2 出 口食 品 平 板 菌 落 计 数 P l a t e c o u n t f o r b a c t e r i a l c o l o n i e s i n f o o d f o r e x p o r t 1 9 9 2 门 2 一 2 8 发布1 9 9 3 一 0 5 一 0 1 实施 中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出 口食 品 平 板 菌 落 计 数 s N 01 68 一 9 2 P l a t e c o u n t f o
2、r b a c t e r i a l c o l o n ie s i n f o o d f o r e x p o r t 代替Z B X 0 9 0 0 1 -8 6 1 主题内 容与适用范围 本标准规定了出口 食品平板菌落计数的方法. 本标准适用于各种出口食品及其原料, 有专门规定检验方法的除外。 2 设备和材料 2 . 1 工作台: 超净工作台或放于清洁、 光线充足的实验室里的水平工作台。琼脂平板在工作台上暴露 1 5 m i n , 每平板不得超过 1 5 个菌落。 2 . 2 恒温培养箱: 3 6 士1。 2 . 3 恒温水浴箱: 4 5 士1。 2 . 4 均质器。 2 .
3、5 振荡器。 2 . 6 吸管: 1 , 1 0 和 2 5 mL , 具。 . 1 mL刻度。 2 . 7 平皿: 直径为 9 0 mm, 2 . 8 稀释瓶: 广口 瓶或 三角烧瓶, 容量为2 0 0 m L 和5 0 0 m L , 2 . 9 玻璃珠: 直径为 5 m m左右。 2 . 1 0 夭平: 感量。 . 1 g , 培养墓和试剂 , 平板计数琼脂。 2 7 5 %乙醇。 3 稀释剂: 磷酸盐缓冲稀释液。 操作程序 4 . 1 样品制备 4 . 1 . 1. 以无菌操作取有代表性的样品盛于 灭菌 容器内。 如有包装, 则用7 5 %乙醇在 包装开口 处擦拭后 取样 。 4 .
4、1 . 2 制备样品匀液 4 . 1 . 2 . 1 固 体或 半固体食品: 以无菌操作取2 5 g 样品, 放人装有2 2 5 m L 稀释 剂的灭菌均质杯内, 于 8 0 0 0 r / m i n 均质1 - V 2 m i n , 制成1 : 1 0 的样品匀液。如样品 均质时间超 过2 m i n , 应 在均质杯外加冰水 冷却。 4 . 1 . 2 . 2 干燥或干粉食品; 以 无菌操作取2 5 g 样品, 放入装有2 2 5 m L稀释 剂和适量玻璃珠 的5 0 0 m l - 稀释瓶中。 迅速振摇, 将样品 混匀, 制成I : 1 0 的样品匀液。 振摇时, 幅 度为3 0 c
5、 m , 7 s 内 振摇2 5 次, 也 可用机械振荡器振荡 1 5 s 代替手摇。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1 9 9 2 - 1 2 - 2 8 批准1 9 9 3 - 0 5 - 0 1实施 I s N 016 8一 92 4 . 1 . 2 . 3 液体食品: 用灭菌吸管吸取2 5 m L 样品, 放人装有2 2 5 m L稀释剂的5 0 0 m L稀释瓶中, 按 4 . 1 . 2 . 2 条中 所 述 方法 迅速 振 摇, 制成1 : 1 0 的 样品 匀 液。 吸 取 样品 时, 吸管 插 入液 面下 不 要 超过 2 . S c m 。吸管内液 体要在2 - 4 s
6、 内完 全排 入稀释剂中。 不要在稀释剂中吹洗吸管。 4 . 2 稀释样品匀液 4 . 2 . 1 用1 0 m L灭菌 吸管准确吸 取1 , 1 0 的样品匀液1 0 m L , 放入装有9 0 m L 稀释剂的2 0 0 m L 稀释 瓶中。 按4 . 1 . 2 . 2 条中 所述的方法, 迅速振摇。制成1 : 1 0 0 的样品液。 从容器中吸取样品匀 液和以后 的 稀释操作中, 吸管尖不要碰着瓶口 。吸入的液体应先高于所要求的 刻度, 然后提起吸管使 其尖端离开 液面 并贴在容器内 壁将液体调至 所要求的 刻度。 4 . 2 . 2 分别用 1 0 mL灭菌吸管按4 . 2 . 1
7、条所述方法将样品匀液制成 1 0 倍递增稀释的样品液, 如 1 0 - , 1 。 一 , 1 0 - s . . . . 4 - 3 平板接种 4 . 3 . 1 对于每一个样品, 选用合 适的三个连续 稀释度的样品 液进行平板计数。 4 . 3 . 2 分别用灭菌吸管吸取 1 mL样品液放入作了适宜标志的平皿内。每个稀释度的样品液用两个平 皿。如果某一样品液在取出供试部分前的放置时间超过 3 min , 应按4 . 1 . 2 . 2条所述方法再振摇该样品 液。 4 . 3 . 3 分别加 1 2 1 5 mL平板计数琼脂( 已放 4 5 +1的水浴中恒温) 到各平皿内。 立即将平皿内的
8、样品液和琼脂培养基充分混合。 混合 方法是将 平皿倾 斜和旋转。 要防止把混合物溅到平皿壁和盖上。 同 时 将 平 板 计 数 琼 脂 倾 入 加 有1 m L 稀 释 剂的 另 一 灭 菌 平 皿 作 空邮寸 照。 将 样 品 液 加 入 平 皿 后应 立 即 倾 注琼脂培养基, 每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过 2 0 mi n . l 4 . 4培养 待 琼 脂 凝固 后 将 平 皿 翻 转, 立 即 放 进3 6 士 1 的 恒 温 培 养 箱内 培 养4 8 士 2 h 。 培 养 箱 应 保 持 一 定 的 湿度, 经 4 8 h培养的琼脂培养基的失重不得超过
9、 1 5 肠。 4 . 5 菌落计数和记录 4 . 5 . 1 培养后, 立即计数每个平板上的菌落数。2 5 - 2 5 0 个菌落为合适范围。如果不能立即计数, 应将 平板存放于 。 4, 但不得超过 2 4 h . 4 . 5 . 2 如只有一个稀释度的两个平板上的菌落在合适范围内, 先计算两个平板的平均值, 再将平均值 乘以相应稀释倍数, 作为每克( 毫升) 样品中平板菌落数( 下表, 样品 1 ) , 4 . 5 . 3 如有两个稀释度在合适范围内, 先计算每个稀释度两个平板的 平均值, 再计算两 个稀释度的平 均值, 然后计算每克( 毫升) 样品中平板菌落数( 下表, 样品2 ) ,
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