[商检标准]-SN 0296-1993 出口禽肉中莫能菌素残留量检验方法 生物自显影法.pdf
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1、食品标准网(Http:/) SN 0296-1993 出口禽肉中莫能菌素残留量检验方法生物自显影法出口禽肉中莫能菌素残留量检验方法生物自显影法 1994 年 5 月 1 日实施 1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口禽肉中莫能菌素残留量的抽样、制样和生物自显影测定法。 本标准适用于出口冻鸡中莫能菌素残留量的检验。 2 抽样和制样 2.1 检验批 以不超过 2500 件商品为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。 2.2 抽样数量 2.3 抽样方法 按 2.2 规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品,原始样品总量不少于 2kg, 放
2、入清洁容器内,加封后标明标记,及时送交实验室。 2.4 样品制备 从每袋原始样品中取出部分有代表性样品,将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均匀,充分混匀,用 四分法缩分出不少于 1kg 试样。装入清洁容器内,加封后标明标记。 2.5 样品保存 将试样于18冷冻保存。 注:在抽样及制样过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 3 测定方法 3.1 方法提要 用甲醇提取肉样中莫能菌素,经四氯化碳萃取后浓缩至干,以甲醇溶解残留物,用薄层分离,再用生物自 显影法测定。 3.2 设备和材料 3.2.1 微量注射器:50 L。 3.2.2 薄层板:硅胶,Q/YT 25785SG,5cm20cm
3、,使用前 110活化 2h。 3.2.3 展开缸:240mm57mm32mm。 3.2.4 游标卡尺:测量范围 0200mm,精度 0.02mm 或使用抑菌圈测量仪测量。 3.2.5 离心机:转速 3000 r/min。 3.2.6 旋转浓缩器。 3.2.7 恒温培养箱:371。 3.2.8 高压灭菌器。 3.2.9 长方形培养皿:20cm10cm5cm。 1 食品标准网(Http:/) 3.2.10 均质器:带均质杯 250mL。 3.3 试剂和培养基 3.3.1 试剂 3.3.1.1 甲醇:分析纯。 3.3.1.2 四氯化碳:分析纯。 3.3.1.3 乙酸乙酯: 分析纯。 3.3.1.4
4、莫能菌素标准品: 960g(效价)/mg(中国兽药监察所提供)。 3.3.1.5 试验菌种: 枯草杆菌(Bacillus subtilis), 菌种号ATCC 6633(卫生部药品生物制品检定所提供)。 3.3.2 培养基 3.3.2.1 菌种用培养基(见附录 A 第 A1 章)。 3.3.2.2 生物自显影用培养基(见附录 A 第 A2 章)。 3.3.2.3 肉汤培养基(见附录 A 第 A3 章)。 3.4 测定步骤 3.4.1 工作液制备 3.4.1.1 莫能菌素标准贮备液 准确称取适量的莫能菌素标准品,用甲醇溶解配制成浓度为 500g(效价)/mL 的莫能菌素标准溶液。 配 制后于冰箱
5、中保存,一周内使用。 3.4.1.2 莫能菌素标准工作液 吸取标准贮备液,用甲醇分别稀释成 2,3,4,5,10 和 15g(效价)/mL 的标准工作标准液。 以上稀释液均 须当日配制。 3.4.1.3 菌种培养及芽胞菌悬浮液制备 将菌种安瓿瓶的上部消毒后敲碎,加入少量肉汤培养基,使其溶解并移至肉汤管中混匀。置 371温 箱中培养 24h。将培养物接种于菌种培养基中,置于 371培养一周,镜检含芽胞菌数达 85%以上, 便可制 备芽胞悬浮液。 用适量灭菌生理盐水冲洗菌苔,然后将该菌液转移至离心管中,充分摇匀后,于 3000r /min 离心 30min, 弃去上清液,再加入同样量的灭菌生理盐水
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