[水产标准]-SCT 3024-2004 腹泻性贝类毒素的测定 生物法1.pdf
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1、I C S B 5 0 6 7 . 0 5 0 Sc 中 华 人 民 共 和 国 水 产 行 业 标 准 S C / T 3 0 2 4 -2 0 0 4 腹泻性贝类毒素的测定生物法 D e t e r m i n a t i o n o f d i a r r h o e a s h e l l f i s h p o i s o n B i o a s s a y 2 0 0 4 一 0 1 一 0 7 发布2 0 0 4 一 0 3 一 0 1 实施 中华 人 民共 和 国农业 部发 布 S C A T 3 0 2 4 -2 0 0 4 o u青 本标准参考了日本厚生省推荐使用的腹泻性贝
2、类毒素的测定方法。 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准起草单位: 国家水产品质量监督检验中心、 中国水产科学研究院东海水产研究所。 本标准主要起草人: 王联珠、 袁骥、 李晓川、 冷凯良、 陈亚瞿、 蒋玫。 S CA T 3 0 2 4 -2 0 0 4 腹泻性贝类毒素的测定生物法 1 范围 本标准规定了腹泻性贝类毒素 ( D S P )的测定方法生物法。 本标准适用于软体动物贝类可食部分中腹泻性贝类毒素 ( D S P )的测定。 2 原理 用丙酮提取贝类中毒素,再转移至乙醚中,经减压浓缩蒸干后,再以1 吐温- 6 0 生理盐水溶解 残留物,注射小鼠,观
3、察存活情况,计算其毒力。 3 试剂和材料 丙酮 ( 分析纯) 。 乙醚 ( 分析纯) 。 1 吐温一 6 0 生理盐水:称取1 . 0 g 吐温- 6 0 ,溶于生理盐水 ( 0 . 8 % N a C l )中,并定容至1 0 0 . 0 ICJq口 QQ口Q口 mL. 4 仪器和设备 4 . 1 旋转蒸发器。 4 . 2 均质器。 4 . 3 磨口烧瓶:圆底,5 0 0 m L , 1 0 0 m L o 4 . 4 布氏漏斗:0 1 0 0二 。 4 . 5 分液漏斗:具塞,5 0 0 m L o 4 . 6 天平:感量0 . 1 g o 4 . 7 刻度试管:1 0 mL,具塞。 4
4、. 8 冰箱:0 一5 和一1 5 一一2 0 C。 4 . 9 注射器:1 mL o 4 . 1 0 注射器针头: 8 # 。 4 . 1 1 小鼠:体重为1 6 g - - 2 0 g 的健康1 C l x 系雄性小鼠。 5 检样的制备 5 . 1 生鲜带壳的贝类 a )用清水彻底洗净贝类外壳,开壳,用清水淋洗内部去除泥沙及其他外来杂质,仔细取出贝肉, 切勿割破肉体; b )收集贝肉,沥水5 m i n , 捡出碎壳等杂物, 迅速冷冻,贮藏备用; c )注意不要破坏闭壳肌以外的组织,尤其是中肠腺 ( 又称消化盲囊,组织呈暗绿色或褐绿色) 。 开壳前不能加热或用麻醉剂。 5 . 2 冷冻贝类
5、 在室温下,使冷冻的样品 ( 带壳或去壳的)呈半冷冻状态,按 5 . 1方法清洗、开壳、淋洗、 S C / T 3 0 2 4 -2 0 0 4 取肉。 5 . 3 取样 a )可以切取中肠腺的贝类 ( 扇贝、贻贝、牡a等) ,称取2 0 0 g 贝肉后,仔细切取全部中肠腺, 将中肠腺称重后细切混合作为检样, 注意不要使中肠内容物污染案板; b )对于尚未确定部位毒性的贝类及不易切取中肠腺的小型贝肉,可将全部贝肉细切、混合, 作 为检样; c )为避免毒素的危害,应戴手套进行检验操作,移液管等用过的器材应在5 的次氮酸钠 溶液中浸泡 1h以上,以使毒素分解;废弃的提取液等也应用5 的次氯酸钠溶
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