α生育酚对精索静脉曲张大鼠生殖细胞凋亡的影响.pdf
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1、临床泌尿外科杂志 2 0 0 6年 1 月第 2 1 卷第 1 期 6 5 (X 一 生育酚对精索静脉曲张大鼠生殖细胞凋亡的影响 赖建生 夏强 张孝斌2 张杰, 许胜利 赵国平 郑东升 摘要 目的: 探讨a 一 生育酚对精索静脉曲张( V C ) 大鼠翠丸生殖细胞损害的保护作用。方法: 采用成年雄 性Wi s t a : 大鼠1 0只复制精索静脉曲张疾病模型. 4 周后开始每日肌注。 一 生育酚0 . 5 m g / ( 1 0 0 g 体重) , 共4 周( 生 育酚组) 。同时设手术组及假手术组进行对照。8 周后用原位末端脱氧核昔酸转移酶标记法( T U N E I ) 检测擎丸 生殖细胞
2、凋亡指数( A I ) 。结果: 生育酚组动物左侧肇丸重量显著高于手术组( P 0 . 0 5 ) , 低于假手术组( P 0 . 0 5 ) ; 生育酚组细胞凋亡率 左侧( 5 . 3 4 土1 . 2 8 ) %, 右侧( 5 . 8 7 士1 . 2 5 ) % 高于假手术组 左侧( 4 . 7 2 土1 . 0 2 ) %, 右侧( 4 . 8 8 士1 . 2 8 ) % ( P 0 . 0 5 ) , 而显著低于手术组 左侧( 9 . 0 5 士2 . 5 1 ) 0 0 , 右侧( 7 . 2 2 士1 . 3 5 ) % ( P 0 . 0 5 ) 。结论: a 一 生育酚能降
3、低精索静脉曲张大鼠生殖细胞的凋亡指数, 延缓架丸细胞损害的病程, 对精索静脉曲 张导致的肇丸损害具有一定的保护作用。 【 关键词 动物模型; a 一 生育酚; 精索静脉曲张; 细胞凋亡 中 图 分 类号 R 6 9 7 . 2 4 文 献 标识 码 A 文 章 编 号 1 1 0 0 1 - 1 4 2 0 ( 2 0 0 6 ) 0 1 - 0 0 6 5 - 0 3 T h e e f f e c t s o f a - t o c o p h e r o l o n s p e r m a t e g e n i c c e l l u l a r a p o p t o s i s i
4、 n v a r i c o c e l e L A I J i a n s h e n g X I A Q i a n g Z H A N G X i a o b i n 2 H A N G J i e 2 X U S h e n g l i Z H A O G u o p i n g Z H E N G D o n g s h e n g ( D e p a r t m e n t o f U r o l o g y , J i a n g m e n Mu n i c i p a l H o s p i t a l ,G u a n g d o n g P r o v i n c e ,
5、 J i a n g m e n 5 2 9 0 0 0 , C h i n a ; D e p a r t m e n t o f U r o l o g y , P e o p l e s H o s p i t a l o f Wu h a n U n i v e r s i t y ) A b s t r a c t O b j e c t i v e : T o s t u d y t h e e f f e c t s o f a 一t o c o p h e r o l o n s p e r m a t e g e n i c c e l l u l a r a p o p t
6、 o s i s i n e x p e r i m e n t a l v a r i c o c e l e i n r a t s . Me t h o d s : T h i r t y a d u l t m a l e Wi s t a r r a t s w e r e r a n d o m i z e d i n t o 3 g r o u p s ( n=1 0 ) : t r e a t e d g r o u p ( T G ) , o p e r a t i o n g r o u p ( O G ) , a n d s h a m o p e r a t io n
7、g r o u p ( S O G ) . R a t s i n t r e a t e d g r o u p w e r e i n j e c t e d i n t r a m u s c u - l o u s l y a - t o c o p h e r o l ( 0 . 5 m g / 1 0 0 g b o d y - w e i g h t , o n e t i m e d a i l y f o r 4 w e e k s ) a f t e r v a r i c o c e l e b e i n g i n d u c e d b y p a r t i a
8、l l i g a t io n o f t h e l e f t r e n a l v e i n f o r 4 w e e k s . Al l t h e r a t s w e r e b r e e d i n t h e s i mi l a r c o n d i t i o n f o r e i g h t w e e k s . T h e a p o p t o s i s c e l l s w e r e d e t e c t e d b y i n s i t u t e r m i n a l d e o x y n u c l e o t i t y l
9、 t r a n s f e r a s e m e d i a t e d d T U P n i c k e n d l a b l e l i n g ( T U N E I )R e s u l t s : T h e l e f t v e n a s p e r m a t i c a o f T G a n d O G w e r e f o u n d c i r s o i d m a r k e d l y c o m p a r i n g w i t h S O G ( P 0 . 0 1 ) . t h e w e i g h t o f l e f t t e s
10、t i c l e i n T G w a s i n t e r v e n e d b e t w e e n t h e O G a n d S O G( P 0 . 0 5 ) .T h e c h a n g e s o f h i s t o l o g y w e r e e x t r a m a r k e d b o t h i n T G a n d O G . T h e a p o p t o s i s i n d e x o f T G w a k l o w e r t h a n t h a t o f O G( P 0 . 0 5 ) , a n d h i
11、g h e r t h a n t h a t o f S O G ( P 0 . 0 5 ) . C o n c l u s i o n s : I t s h o w s t h a t a - t o c o p h e r o l c a n d e c r e a s e t h e a p o p t o - s i s i n d e x i n g e r m c e l l s o f v a r i c o c l e r a t s , a n d s t o w d o w n t h e p r o c e e d i n g o f t e s t i c u l
12、a r i n j u r e d . K e y w o r d s A n i m a l m o d e l ; a - T o c o p h e r o l ; V a r i c o c e l e ; C e l l a p o p t o s i s 已有研究证实, 精索静脉曲张( V C ) 的病理生 理过程会导致局部氧自由基增多, 并介导细胞凋 亡, 致使肇丸生殖细胞凋亡增加 。 从而影响生育 能力。本研究使用氧自由基清除剂 a 一 生育酚, 对 V C疾病模型进行药物于预性研究. 采用原位末端 脱氧核昔酸转移酶标记( i n s i t u t e r m i n a l
13、 d e o x y n u - c l e o t i t y l t r a n s f e r a s e d T U P n i c k e n d l a b e l i n g , T U N E I . ) 技术, 初步探讨 a 一 生育酚对V C致肇丸损 害的保护作用。 1 材料与方法 1 . 1 动物分组 成年雄性 Wi s t a r 大白鼠3 0只, 鼠龄( 6 0 士1 0 ) 天, 体重2 7 0. 3 2 0 g ( 购自湖北省医学科学研究院 实验动物中心, 动物证号: 医动字第 1 9 - 0 8 4 号) , 随 1 广东省江门市人民医院泌尿外科( 广东江门,
14、5 2 9 0 0 0 ) “ 武汉大学人民医院泌尿外科 机分成 3 组, 每组 1 0 只。生育酚组: 部分结扎大鼠 左肾静脉, 使其外径缩窄到 1 m m, 复制精索静脉曲 张疾病模型, 模型成功后 4 周开始每日肌注 。 一 生育 酚0 . 5 m g / ( 1 0 0 g 体重) 共4 周; 手术组: 为部分结 扎大鼠左肾静脉, 造成精索静脉曲张, 不用药; 同 时设假手术组: 只行左肾静脉分离, 不予结扎。3 组 大鼠均在同一条件下饲养至 8 周后进行观察。 1 . 2 检测方法 将实验大鼠麻醉后开腹, 显露左侧肾静脉和精 索内静脉, 用带测微器的目镜测量精索静脉直径, 观察其曲张
15、程度。取出双侧翠丸, 分析天平分别称 重。切片苏木精一 伊红染色、 封片制成病理切片, 观 察病理学变化。 沿纵轴将罕丸分成两半, 中性福尔马林固定、 石蜡包埋、 切片备检; T UN E L试剂盒购自德国 B M 公司, 按试剂盒说明书操作。光镜下观察凋亡细胞 6 6J o u r n a l o f C l i n i c a l Ur o l o g y , J a n 2 0 0 6 , Vo l 2 1 ,N o 1 并计数, 每张切片选5 个高倍视野( X 4 0 0 ) , 计数正 常细胞和凋亡细胞, 求出凋亡指数( a p o p t o s i s i n - d e x ,
16、 AI ) 。 1 . 3 统计学方法 计量数据以牙 士、 表示, 各组间均数比较应用t 检验。使用的统计软件包为 S P S S ( C h i c a g o , U S A) 。以P 0 . 0 5 为差异有统计学意义。 2 结果 生育酚组与手术组大鼠左精索静脉均呈不同 程度的曲张, 两组间左精索静脉直径比较差异无统 计学意义仁 ( 0 . 9 7 士0 . 1 5 ) m m 对( 0 . 9 6 士0 . 1 9 ) m m , 两组与假手术组 ( 0 . 1 8 士0 . 0 7 ) m m 相比, 差异均有统计学意义( P。 . 0 1 ) . 肇丸重量变化见表 t o 表 1
17、三组动物塞丸重量变化 组别只数左侧右侧 生育酚组 手术组 假手术组 1 0 1 0 1 0 1 . 5 1 9 士0 . 0 1 8 “ 1 . 5 0 3 士0 . 0 2 6 2 1 . 5 3 8 士0 . 0 2 8 1 . 5 2 0 士0 . 0 3 2 1 . 5 1 6 士0 . 0 3 5 2 1 . 5 3 3 士0 . 0 3 6 与手术组、 假手术组相比 ) P 0 . 0 5 , 与假手术组比较 2 P 0 . 0 5 假手术组双侧梁丸无明显病理改变; 手术组及 生育酚组9 0 %的大鼠双侧攀丸均出现不同程度的 生精阻滞、 曲细精管萎缩、 生精细胞稀少、 生精上皮 变
18、薄、 未成熟曲细精管向管腔内脱落、 生精细胞与 基低细胞脱离等, 以左侧为著; 生育酚组与手术组 相比无明显改善。 凋亡细胞胞浆收缩, 胞核致密深染呈棕黄色颗 粒或碎片为凋亡细胞染色阳性。凋亡细胞仍是大 多分布于精原细胞和精母细胞, 少见于精子细胞; 生育酚组生殖细胞凋亡率高于假手术组( 尸 0 . 0 5 ) , 但显著低于手术组( P 0 . 0 1 )表2 ) 0 表 2 生殖细胞凋 A l 的变化 组别只数 左侧 . 8 7 土 1 . . 0 5十 2 . 右侧 生育酚组 手术组 假手术组 1 0 1 0 1 0 . 3 4 士 1 . 2 8 . 2 2 士1 . 3 5 “ 一一
19、 4 . 7 2 士1 . 0 2 2 4 . 8 8 士 1 . 2 8 与生育酚组比较, “ P 0 . O 1 , 2 P 0 . 0 5 3 讨论 精索 V C是男性不育的首位原因。临床上精 索V C的治疗方案是只对有手术指征者行外科治 疗 2 。然而有资料显示, 单纯外科治疗并不能很好 的改善精液质量和提高受孕率, 使精索 V C治疗的 传统观念面临极大的挑战c a l . K a mi s c h k e等C 4 对 精索 V C治疗手段做了大量的探索, 大多是致力于 手术方式的改进; 也有少数是应用提高生精功能的 药物, 包括相关激素、 中药等进行经验性研究, 取得 了一定的效果
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- 生育 静脉曲张 大鼠 生殖细胞 影响
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