β淀粉肽140对海马神经元高电压激活钙电流的作用及银杏内酯B对该作用的影响.pdf
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1、A c t a P h y s i o l o g i c a S i n i c a , F e b rua ry 2 5 , 2 0 0 6 , 5 8 ( 1 ) : 1 4 - 2 0 h t t p : / / w w w . a c t a p s . c o m . c n A c t i o n o f (3 - a m y l o i d p e p t i d e 14 0 o n I I v A a n d it s m o d u l a t i o n b y g i n k g o li d e B C H E N L e i , L I U C h a n g -
2、 J i n “ , T A N G Mi n g , L I A i l , H U X i n - Wu , Z h o u Y i n g , J u r g e n H e s c h e l e r 2 D e p a r t m e n t o f P h y s i o l o g y , T o n g i i M e d i c a l C o l l e g e , H u a z h o n g U n i v e r s i ty o f S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y , W u h a n 4 3 0 0 3 0 ,
3、C h i n a ; I n s t i t u t e o f N e u r o p h y s i o l o g y , U n i v e r s i ty o f C o l o g n e , C o l o g n e D - 5 0 9 3 1 , G e r m a n y A b s t r a c t : W h o l e - c e l l p a t c h c l a m p r e c o r d i n g w a s u s e d t o i n v e s t i g a t e t h e a c t i o n o f (3 - a m y l
4、o i d p e p t i d e , , , ( A R , -4 0 ) o n h i g h v o l t a g e - a c t i v a t e d c a l c i u m c h a n n e l c u r r e n t 吸。 ) i n a c u t e l y i s o l a t e d h i p p o c a m p a l C A I p y r a m i d a l n e u r o n s i n r a t s a n d o b s e r v e i t s m o d u l a t i o n b y g i n k g
5、o l i d e B ( G B ) . D rug w a s a p p l i e d b y e x t r a c e l l u l a r b a t h o r a d d i n g i n t h e p i p e t t e s o l u t i o n , a n d i t s e f f e c t w a s d e t e r m i n e d b y c o m p a r i n g t h e a m p l i t u d e o f 几 V A b e f o r e a n d a f t e r t h e d ru g a p p l i
6、 c a t i o n . B a t h a p p l i c a t i o n o f a g g r e g a t e d A (3 1-4 0 a t c o n c e n t r a t i o n s o f 0 .0 1 3 0 p m o l / L i n c r e a s e d t h e a m p l i t u d e o f I H v A i n a d o s e - d e p e n d e n t m a n n e r b y ( 5 .4 3 士 3 .0 1 ) % a ( n = 8 , P 0 .0 5 ) , ( 1 0 .4 9
7、 土 4 . 1 3 ) % ( n = 1 1 , P 0 .0 5 ) , ( 4 0 .6 9 土 8 .0 1 ) % ( n = 1 6 , P 0 .0 5 ) . L - t y p e c a l c i u m c h a n n e l a n t a g o n i s t n i f e d i p i n e a b o l i s h e d t h e i n c r e a s e o f I H V A b y A p 1-4 0 T h e i n c r e a s e o f I H V A b y A p 1 -4 0 ( 1 . 0 p m o l
8、/ L ) w a s e n h a n c e d t o ( 6 6 . 1 9 士 5 .7 4 ) % ( P 0 . 0 5 ) , ( 1 0 . 4 9 1 4 . 1 3 ) % ( n = 1 1 , P 0 . 0 5 ) , ( 4 0 . 6 9 土 8 .0 1 ) % ( n = 1 6 , P 0 .0 5 ) o L 一 型 钙 通 道 阻 断 剂n if e d ip in e 可 以 抵 消A R ,_40 对I H V 、 的 增 强 作 用 。 A 民 a 0 ( 1 .0 p m o l/ L ) 对蝙 的 增 强 作 用 可 以 被c A M P
9、的 类 似 物8 - B r - c A M P 和 腺 普 酸 环 化 酶 ( a d e n y l y l c y c la s e , A C ) 的 激 动 剂f o r s k o l i n 增强 分别为 ( 6 6 . 1 9 土 5 .7 4 ) % , 尸 0 . 0 5 ) , ( 1 0 .4 9 士 4 . 1 3 ) % ( n = 1 1 , P 0 .0 5 ) , ( 4 0 . 6 9 土 8 .0 1 ) % ( n = 1 6 , P 0 .0 5 ) ( F i g . 3 ) . n = 1 6 * J且 八U山.ICU nU01100 ,1内j 0
10、011n分 八JZJJ. * * 尸 0 .0 5 . Wh e n 1 0 p m o l/ L n i f e d ip i n e w a s a p p l ie d f i r s t ly , a ft e r a s t e a d y d e c r e a s e o f 1 1v A , 1 .0 p m o l/ L A p 1a . w a s c o - a p p li e d , t h e a m p l i t u d e s o f I v A b e f o r e a n d a ft e r A p 1 -a o a p p li c a t i o
11、n w e r e ( 7 .6 4 1 4 . 1 6 ) p A / p F a n d ( 7 .8 9 1 2 . 5 6 ) p A / p F , r e s p e c - t i v e l y ( n = 6 , P 0 .0 5 ) . 2 . 3 A c t i o n o f f r e s h A p 1 -4 0 o n I H V A i n h i p p o c a m p a l neur ons A p , 、 。H - 8 9 + A p , 、 。 F i g .4 . P e r c e n t a g e o f i n c r e a s e d
12、 I H , , b y A p 1 -4 0 1 .0 g m o l / L i n t h e p r e s e n c e a n d a b s e n c e o f H - 8 9 , * P 0 .0 5 ) i n i n h i b i t - i n g i n c r e as e d I 1v , b y A (3 ,-4 , . 4 0 1 0 0 n 5 或UO一1一q一u一多好节。牙lu。ujad 2 0 岁ese巴ou一多好乞e口门ue臼。d 0 A p , 、 。8 - B r - c A M P + A p , 、 。 F i g .5 . P e r
13、c e n t a g e o f i n c r e a s e d I v , b y A (3 , _, 0 a n d A (3 , .4 0 c o - s u p e r - f u s i o n w i t h 8 - B r - c A M P . P 0 .0 5 v s A (3 , _4 O , u n p a i r e d t - t e s t . 2 . 4 . 3 F o r s k o l i n A p p l i c a t i o n o f 1 0 p m o l 几 f o r s k o l i n i n c r e a s e d I H v
14、 A b y ( 2 8 . 1 8 1 3 . 1 9 ) % ( n = 6 , P 0 . 0 5 ) . B a t h a p p l i c a t i o n o f 1 0 E u n o l / L f o r s k o l i n i n c o m b i n a t i o n w i t h 1 .0 p m o l/ L A p 1-4 0 i n c r e a s e d I , , b y ( 7 3 .2 1 1 6 .9 0 ) % ( n = 7 , P 0 . 0 1 ) . S i m i l a r w i t h 8 - B r - c A M
15、P , t h e i n c r e a s e i n I H V A w as s i g n i f i c a n t c o m - p a r e d w i t h t h e e ff e c t o f A p ,_, w i t h o u t f o r s k o l i n ( n = 2 1 , P 0 . 0 5 ) ( F i g . 6 ) . 0 +- - 一一 . 尸-一 一 0 . 0 0 0 1 0 . 0 0 1 0 . 0 1 0 . 11 0 1 0 0 G in k g o lid e B ( p m o l/ L ) n = 7 * 萝8
16、0 6 0 F i g . 7 . C o n c e n t r a t i o n - r e s p o n s e r e l a t i o n s h i p f o r t h e i n h i b i t i o n o f G B o n t h e a c t i o n o f A p , _, 0 ( 1 .0 p m o l/ L ) i n h i p p o c a m p a l n e u r o n s . I n t h e c o n c e n t r a t i o n - r e s p o n s e c u r v e f o r G B ,
17、 e a c h p o i n t r e p r e - s e n t s t h e me a n s 1 S E M o f t h e i n h i b i t i o n r a t e o f GB f r o m 5 t o 1 0 c e l l s . T h e c u r v e s h o w n i s t h e f i t o f t h e d a t a t o t h e l o g i s t i c e q u a - t i o n Y - Y _l 1 + ( I C 5 d C ) “ , w h e r e C i s t h e c o
18、n c e n t r a t i o n o f G B , Y i s t h e f r a c t i o n o f t h e m a x i m a l i n h i b i t i o n r e s p o n s e v a l u e , n i s t h e H i l l c o e f f i c i e n t , a n d I C 5 0 i s t h e c o n c e n t r a t i o n o f G B p r o d u c i n g 5 0 % i n h i b i t i o n o n t h e i n c r e a
19、s e i n I H v A b y A p , -4 o a t 1 .0 p m o l / L . I C 5 0 v a l u e i s ( 0 . 0 1 5 2 4 1 0 .0 0 8 7 1 ) p m o l / L a n d n i s 0 .4 1 0 1 . n = 1 6 4 0 3 DI S CUS S I ON 2 0 0 F i g . 6 . P e r c e n t a g e o f i n c r e a s e d I H v A b y A 3 , -4 0 a n d A (3 , _4 0 c o s u p e r f u s i o
20、 n w i t h f o r s k o l i n . P 0 .0 5 v s A p 1-4 0 , u n p a i r e d t - t e s t . 2 . 5 E f f e c t o f G B o n t h e a c t i o n o f A p 1 -4 0 I t h a s b e e n p r o v e d b y o u r p r e v i o u s w o r k t h a t G B h a d n o E n d o g e n o u s A p i s a m a j o r c o n t r i b u t o r t o
21、 t h e p a t h o g e n e s i s o f A D . A g g r e g a t e d AR,-4o c a u s e s i m p a ir m e n t o f l e a r n i n g a n d me mo r y a n d n e u r o n a l d e g e n e r a t i o n i n r a t s a f t e r i n t r a h ip p o c a m p a l i n j e c t i o n s“ I. I t h as b e e n r e p o r te d t h a t A
22、(3 c a n c a u s e a n i n c r e a s e o f i n t r a c e l l u l a r f r e e c a l c i u m ( C a 2 + ) , l e a d in g t o d i s r u p t i o n o f c e l lu l a r C a h o m e o s t a s i s , w h i c h p l a y s a k e y r o le i n a ll A -i n d u c e d n e u ro to x ic e ff e c t s iZ . V D C C i s o n
23、 e o f t h e i m p o r t a n t p a t h s f o r e x t r a c e l l u l a r C a i n fl u x . I n t h i s s t u d y , w h o l e c e l l p a t c h c l a m p t e c h n i q u e w a s u s e d t o r e c o r d t h e I H v A o n a c u t e l y i s o l a t e d h i p p o c a m p a l estaeJ。u一多工乞06三u。日od A (30 F o
24、 r s k o lin + A 日 , 、 。 C H E N L e i e t a l : A c t i o n o f (3 - a m y l o i d P e p t i d e , o n 1 , , A a n d i t s M o d u l a t i o n b y G i n k g o l i d e B 1 9 C AI p y r a m i d a l n e u r o n s i n r a t s . T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t e x t r a c e l l u l a r a p p l i
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