【SN商检标准大全】SNT 2033-2007 绵羊地方性流产病微量补体结合试验操作规程.pdf
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1、书书书 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 ? ? ? ? ? ? ? ? 绵羊地方性流产病微量补体结合试验 操作规程 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?发布? ? ? ? ? ? ? ? ? ?实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t
2、) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 书书书 中华人民共和国出入境检验检疫 行?业?标?准 绵羊地方性流产病微量补体结合试验 操作规程 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 中 国 标 准 出 版 社 出 版 北京复兴门外三里河北街? ?号 邮政编码? ? ? ? ? ? ? 网址? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 电话? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 ? 开本? ? ? ? ? ? ? ?印张? ? ?字数? ?千字 ? ? ? ?年?月第一版? ? ? ?年?月第
3、一次印刷 印数? ? ? ? 书号? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?定价? ? ?元 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f x w .c o m 提供免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 书书书 前?言 ?本标准的附录? 附录?为规范性附录? 附录? 附录?为资料性附录? 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口? 本标准起草单位? 中华人民共和国天津出入境检验检疫局? 本标准主要起草人? 王玉玲? 侯艳
4、梅? 姜红? 赵祥平? 董志珍? 霍蕾? 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 绵羊地方性流产病微量补体结合试验 操作规程 ?范围 本标准规定了绵羊地方性流产病微量补体结合试验的操作技术要求? 本标准适用于绵羊地方性流产病的血清学诊断? ?规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款?凡是注日期的引用文件? 其随后所有 的修改单?
5、 不包括勘误的内容? 或修订版均不适用于本标准? 然而? 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本?凡是不注日期的引用文件? 其最新版本适用于本标准? ? ? ? ? ?分析实验室用水规格和试验方法? ? ? ? ? ? ? ? ?试剂和材料 ? ?试剂 ? ? ?试验用蒸馏水为? ? ? ? ? ?中的三级水? ? ? ?稀释液? 生理盐水? ? ? ?补体结合抗原? 按说明书使用? 使用前充分摇匀? ? ? ?阳性对照血清? 使用前用蒸馏水溶解至规定容积? ? ? ?阴性对照血清? 使用前用蒸馏水溶解至规定容积? ? ? ?溶血素? 使用前用蒸馏水溶解至规定容积? ?
6、 ? ?补体? 使用前用蒸馏水溶解至规定容积? ? ? ?绵羊全血? 选健康成年绵羊? 无菌颈脉采血? ? ?份阿氏液加?份血? 混匀?冰箱内稳定? ?后使用? ? ?材料 ? ? ?玻璃试管? ? ? 圆底? 洁净? ? ? ?试管架? ? ? ?微量移液器? ? ? ?可调连续加样器? ? ? ? ?孔? 型微量板? ? ? ? ?孔平底? ? 微量板? ? ? ?水平转子离心机? ? ? ? ? ? ? ?读板仪? ? ?被检血清 ? ? ?采血和分离 按常规方法采血和分离血清?血清应新鲜? 无蛋白絮凝物? 无溶血? 无腐败气味? ? ? ?运送和保存血清 防止血清冻结? 若?内不能送到
7、实验室? 需用冷藏方法运送血清?血清应放至?冰箱内保存? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f x w .c o m 提供免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 ?操作方法 ? ?预备试验 ? ? ?红细胞悬浮液的制备 ? ? ? ?绵羊全血充分混匀后? 取所需量用稀释液洗三次? 每次水平转子离心机? ? ? ? ? ?离心 ? ? ? 最后一次离心? ? ? ? ? ? ? ?取出?份
8、沉积血泥加入到? ?份稀释液中? 充分混匀? 制成红细胞悬浮液? ? ? ? ?取出? ? ?红细胞悬浮液加入到? ? ? ?蒸馏水中? 使红细胞充分破解? 液体清亮? ? ? ? ? ?取出? ? ?破解后的液体加入到平底微量板孔内? 平行加?个孔? ? ? ? ?用? ? ? ? ?读板仪? ? ? ?下读? ?值? 算出平均? ? 值? 代入校正红细胞浓度公式? 见式? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 式中? ? ? ?校正红细胞浓度到?所需加入的稀释液量? ? ? ?平均? ?值? ? ? ?红细胞悬浮液量? ? ? ? ?取校正红细胞浓度时所需的稀释液量加入到红细胞悬浮液
9、中即得?红细胞悬浮液? ? ? ?溶血素效价的测定 ? ? ? ?稀释溶血素 取? ? ?溶血素原液? 加入到? ? ? ?稀释液中? 制成? ? ?稀释的溶血素? 再按表?稀释成不 同稀释滴度的溶血素? 表?溶血素的稀释 稀释滴度溶血素量? ?稀释液? ? ? ? ? ? ? ?溶血素? ? ? ? ? ? ? ? ? ?溶血素? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?溶血素? ? ? ? ? ? ? ? ? ?溶血素? ? ? ? ? ? ? ? ? ?溶血素? ? ? ? ? ? ? ? ? ?溶血素? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?溶血素? ? ? ? ?注?如果溶血素是由等量
10、甘油保存? 则溶血素原液所需量加倍? 并相应减少稀释液量? ? ? ? ?制备不同稀释滴度的溶血素致敏红细胞 取?个试管? 每管加? ? ? ?的红细胞悬浮液? 然后分别缓慢加入不同稀释滴度的溶血素 ? ? ? 混匀? ?水浴箱中感作? ? ? ? ? ? ? ?溶血素效价的确定 将补体原液预稀释至? ? ? 按表?进行测定? 表?溶血素效价测定 试管号 ? 稀释液? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?补体? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t
11、) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 表? 续? 试管号 ? 不同稀释滴度致敏红细胞? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 溶血素稀释滴度 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 感作 ? ?水浴? ? ? ? 每间隔? ? ?振?次? 冷稀释液? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?将各管用水平转子离心机? ? ?离心? ? ? 取上清液? ? ?分注平底微量板? ? ? ?下读? ? 值?按公式? ? ?值? ? ? ? ? ? 算出各管溶血度? 在普通坐标纸上以溶血素的稀释度为横坐标? 溶血 度为纵坐标
12、? 绘制曲线? 确定出现平高线的点? 比此浓度高? ?的稀释度定为溶血素的工作效价? 即为 ? ? ?倍? 溶血素工作效价?溶血素稀释滴度? ? ? 参见附录? ? ? ? ?制备致敏红细胞悬浮液 按测定的溶血素效价稀释溶血素? 缓慢加入到等量的?绵羊红细胞悬浮液中? 混合均匀? 置? ? 水浴箱中感作? ? ? ? ? ? ?补体效价的测定 补体预稀释至? ? ? 做?组重复管? 按表?进行测定? 表?补体效价测定 试?管?号 ? ? ? ?补体? ? ? ? ? ? ? ? 稀释液? ? ? ? ? ? ? ? ? 第一次感作 ? ?水浴? ? ? ? 致敏红细胞 ? ? ? ? ? ?
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