【SN商检标准大全】SNT 2126-2008 黑麦草腥黑穗病菌检疫鉴定方法.pdf
《【SN商检标准大全】SNT 2126-2008 黑麦草腥黑穗病菌检疫鉴定方法.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《【SN商检标准大全】SNT 2126-2008 黑麦草腥黑穗病菌检疫鉴定方法.pdf(12页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、书书书 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖犜 黑麦草腥黑穗病菌检疫鉴定方法 犐 犱 犲 狀 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犜 犻 犾 犾 犲 狋 犻 犪狑 犪 犾 犽 犲 狉 犻犆 犪 狊 狋 犾 犲 犫 狌 狉 狔犪 狀 犱犆 犪 狉 狉 犻 狊 发布 实施 中华人民共和国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 书书书 中华人民共和国出入境检验检疫 行 业 标 准 黑麦草
2、腥黑穗病菌检疫鉴定方法 中 国 标 准 出 版 社 出 版 北京复兴门外三里河北街 号 邮政编码: 网址 电话: 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本 印张 字数 千字 年 月第一版 年 月第一次印刷 印数 书号: 定价 元 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f x w .c o m 免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 书书书 前 言 本标准的附录和附录 为规范性附录, 附录 和附录为资料性附录。 本标准由国家认证认可
3、监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位: 中华人民共和国上海出入境检验检疫局、 中华人民共和国天津出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人: 易建平、 周国梁、 黄国明、 印丽萍。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 黑麦草腥黑穗病菌检疫鉴定方法 范围 本标准规定了进出境植物检疫中黑麦草腥黑穗病菌( 犜 犻 犾 犾 犲 狋 犻 犪狑 犪 犾 犽 犲 狉 犻) 的检测和鉴定方
4、法。 本标准适用于进出境禾本科草种和粮谷类产品中黑麦草腥黑穗病菌的鉴定。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件, 其随后所有 的修改单( 不包括勘误的内容) 或修订版均不适用于本标准, 然而, 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本适用于本标准。 植物检疫 小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法 缩略语 下列缩略语适用于本标准。 犘 犆 犚 犘 狅 犾 狔 犿 犲 狉 犪 狊 犲犆 犺 犪 犻 狀犚 犲 犪 犮 狋 犻 狅 狀 聚合酶链式反应。 犇 犖 犃 犇 犲 狅 狓 狔 狉 犻 犫
5、狅 狀 狌 犮 犾 犲 犻 犮犪 犮 犻 犱 脱氧核糖核酸。 犱 犖 犜 犘 犇 犲 狅 狓 狔 狉 犻 犫 狅 狀 狌 犮 犾 犲 狅 狊 犻 犱 犲 狋 狉 犻 狆 犺 狅 狊 狆 犺 犪 狋 犲 脱氧核苷三磷酸。 犫 狆 犫 犪 狊 犲狆 犪 犻 狉 碱基对。 犜 犪 狇 酶 聚合酶。 犈 犅 溴化乙锭。 原理 黑麦草腥黑穗病菌( 犜 犻 犾 犾 犲 狋 犻 犪狑 犪 犾 犽 犲 狉 犻 ) 属真菌界( ) , 担子菌门( ) , 黑粉菌纲( ) , 黑粉菌目( ) , 腥黑粉菌科( ) , 腥黑粉菌属 ( 犜 犻 犾 犾 犲 狋 犻 犪) 。被侵染的植株结实时, 种子被病菌冬孢子侵占,
6、 形成菌瘿。冬孢子形态学特征和 反应 特性是鉴定该种病原菌的依据。地理分布和寄主范围参见附录 。 仪器设备 多功能显微镜。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 标准分享网 w w w .b z f x w .c o m 免费下载 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 体视显微镜。 低速离心机。 往复式振荡器。 干热灭菌器。 高压灭菌器。 仪。 凝胶成像系统。 实时荧光 仪。 生物培养箱。 可调微量加样器( ) 。 载玻片( 长宽为 , 厚 ) 。 盖玻片(
7、 ) 。 网筛( 孔径 和 ) 。 药品试剂 次氯酸钠溶液或漂白粉精片( 化学纯) 。 吐温 ( ) 。 席尔氏浮载剂( 见 附录) 。 无荧光显微镜物镜镜头浸泡油( ) 。 溴化乙锭( ) 。 封片剂: 指甲油或阿拉伯树胶。 琼脂糖。 蛋白酶 。 酶。 ( , ) 。 ( ) 。 。 无水乙醇。 酚。 三氯甲烷。 异丙醇。 异戊醇。 犜 犪 狇 聚合酶。 实验室检验 样品接收 接收待检样品时, 应核对记录, 报检号、 品名、 批号、 原产地、 样品编号、 送样员姓名、 接样员姓名和接 样日期。 制备平均样品 在样品预备室内将待检样品在样品袋内充分混匀, 制成平均样品, 每样 。 样品洗涤检验
8、 取样 从平均样品中称取 作为试验样品。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 洗涤离心 试验样品倒入灭菌三角瓶内, 加蒸馏水 , 再加吐温 滴滴, 用铝铂纸或 膜 封住三角烧瓶瓶口。将三角瓶放在往复式振荡器上振荡 , 洗涤液经过孔径 和 网筛 过滤, 用灭菌水冲洗孔径 网筛上的截留物, 洗涤三次后将截留物转移至离心管内, 离 心 , 弃上清, 取沉淀物。 定容 沉淀物中加入席尔氏浮载剂, 定容至 。 镜检 用微量加样器
9、吸取沉淀物悬浮液 至载玻片上, 加盖玻片制片。在 显微镜下镜 检, 检查是否有表面呈疣状突起的腥黑穗病菌冬孢子。每份试验样品的离心沉淀物至少检查张玻片, 每片按视野依次全部检查。 菌瘿检查 镜检发现每个玻片超过 个具疣状突起孢壁纹饰的腥黑穗病菌冬孢子, 将剩余平均样品倒入白瓷 盘内, 在充足光线下仔细检查有无菌瘿。受腥黑穗病菌侵染的种子被病菌穗状冬孢子代替而成为菌瘿, 菌瘿位于子房内, 外被一层不明显致密的寄主种皮, 通常是部分受害, 感染部分多数局限于种子的内稃 一侧, 外观症状不明显。冬孢子堆暗褐色( 茶褐色, 咖啡色) , 无明显气味。 冬孢子形态测量 发现腥黑穗病菌菌瘿, 直接挑取少许
10、冬孢子加适量席尔氏液制片, 封片剂封片。未发现腥黑穗病菌 菌瘿, 显微镜或解剖镜下从洗涤液中挑取冬孢子加适量席尔氏液制片, 封片剂封片。显微镜下观察冬孢 子形态特征并随机测量 个冬孢子的直径。每个成熟冬胞子按长短轴方向测量冬孢子直径大小, 两者 平均值为该冬孢子直径, 并计算出 个冬孢子的平均直径。 冬孢子转移和萌发 如发现菌瘿, 直接用菌瘿孢子萌发, 从菌瘿中取少许冬孢子萌发, 加入 灭菌水, 制成孢子悬 浮液, 用移液器将水和其中的冬孢子一起转移至水琼脂平板上, 连续光照条件下培养, 培养 后每天检查有无冬孢子萌发。 如未发现菌瘿, 中镜检发现有孢壁纹饰为疣状突起的腥黑穗病菌冬孢子, 重新
11、取样按 和 洗涤, 用灭菌水悬浮沉淀物, 取 沉淀物悬浮液在载玻片涂片, 置显微镜 或 解剖镜 下用细的挑针将冬孢子转移至无菌的塑料培养皿内的灭菌水中, 挑取 个以上的冬孢子, 然后在解剖镜下用 的次氯酸钠溶液 表面消毒 , 用移液器吸去次氯酸钠溶液, 再用 灭菌水洗涤三次, 最后加入 灭菌水, 用移液器将水和其中的冬孢子一起转移至水 琼脂平板上, 培养和检查方法同前。 菌丝培养 萌发的冬孢子转移至 培养基上 连续光照条件下培养, 后收集菌丝。 犇 犖 犃提取 菌丝液氮研磨后取 提取 , 提取方法可以参见附录, 也可用提取真菌或植物 组织的 提取试剂盒。 犘 犆 犚检测 菌丝培养物的犘 犆 犚
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- SN商检标准大全 【SN商检标准大全】SNT 2126-2008 黑麦草腥黑穗病菌检疫鉴定方法 SN 商检 标准 大全 SNT 2126 2008 麦草 腥黑穗病 检疫 鉴定 方法
链接地址:https://www.31doc.com/p-3696851.html