一氧化氮—一氧化氮合酶系统对卵巢切除鼠骨丢失的影响.pdf
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1、中国煤炭工业医 学杂志2 0 0 1 年3 月第4 巷第3 期2 2 9 医学基础研究 文幸绷号1 0 0 7 一 9 5 6 4 1 2 0 0 1 1 0 3 一 0 2 2 9 一 0 3 一氧化氮一一氧化氮合酶系统对卵巢切除鼠骨丢失的影响 0 5 0 0 5 1 河北省石家庄市, 河北医 科大学第三医院 朴 影 马秀 敏李玉 坤李英华 关抽词 甘质跳松绝经后双侧卵泉 切除 一孰化氛 一氧化氮 合阵 介丢失 摘要目的 观察一和匕 氮 ( N O ) 供体峭胶异山桑W I - b d d e D i n i tr a , e , I D ) 及一氧化执 合喇 N O S ) 抑制荆氛基A
2、并剧定 血清N O , N O S 水平 。结果 与S h a m组 相比 , O V X组, O V X + A G组. O V X 十 A G十 E 组大鼠 胶 甘重JA , 4E, B M D残少( P 0 . 0 5 ) e摘论 N O 供体预防O V X从甘丢失, N O S 抑创别4 1 阻 止雌教素预防O v X从甘丢失的作用。 E F F E C T OF N I T R I C O X I D E一N I T R I C OX I D E S Y N T HA S E S Y S T E M ON B ONE L OS S I N OV A RI E C T O MI Z E
3、 D R A T S G u o Y m g , M a X i u m i u , L i Y u k u n , e t a t t h e th i r d H o s p i ta l o f H it M ed ic a l U n i t e r s i t y , 8 h ij i o s h t ta n g 0 5 0 0 5 1 K e y Wo r d s O s t o o p o r o s i s p o s t m e n o p a u s a l O v a r i e c t o m i m N i t r i c o x i d e N i t r i c
4、 o x i d e s y n t h a s e B o n e lo s s A b s t r a c t O b j e c t iv e T o in v e s t ig a t e t h e r e s p o n s e o f f e m u r b o n e o f o v a r i e c t o m it c d ( O V X ) r a t s t o n it r ic o x id e ( N O ) d o n o r i s a s o r b r i d e d i n i t r a t e ( I D ) a n d n i t r i c o
5、 x i d e s y n t h a s e ( N O S ) i n h i b i t o r a m i n o g u a n i d i n e ) A G ) . M e t h o d s 4 9 Mis t a r f e - m a l e r a t s w e r e r a n d o m l y d i v id e d in t o 7 g ro u p s ( 7 i n e a c h g ro u p ) ; 1 ) s h a m一 o p e r a t e d ( S h a m ) ; 2 ) O V X ; 3 ) O V X t r e a
6、t e d w i t h e s t ro g e n ( O V X + E ) ; 4 ) O V X t r e a t e d w i t h N O d o n o r ( O V X+I D ) ; 5 ) O V X t r e a t e d w it h N O d o n o r p lu s e s t ro g e n ( O V X + I D + E ) ; 6 ) O V X t r e a t e d w i t h N O S in h ib i to r ( O V X+ A G ) ; 7 ) O V X t re a t e d w i t h N O
7、 S in h ib i to r p l u s e s t r o g e n ( O V X + A G + E ) , A t t h e e n d o f 1 0 w e e k s o f t h e e x p e r im e n t , t h e r a t s w e re k il le d a n d t h e ir f e m o r a l w e ig h t , b o n e m in e r a l d e n s i t y ( B M D ) a n d t h e i r s e r u m N O a n d N O S le v e ls w
8、 e r e m e a s u r e d . R e s u l ts T h e d a t a s u g g e s t t h a t t h e w e ig h t a n d B M D o f f e m u r w e r e re m a r k a b ly r e d u c e d in O V X g ro u p , O V X + A G g r o u p a n d O V X+ A G + E g ro u p ( P 0 . 0 5 ) . C o n d o . s i o n N O d o n o r h a s t h e p r e v e
9、 n t i v e e f f e c t o f b o n e l o s s o f P V X r a t s a n d N O S in h i b i t o r c a n b lo c k t h e e s t ro g e n t o p r e v e n t t h e OVX r a t s f rom b o n e l o s s . 中图分类号 R 一 3 3 2文献标识码 A 绝经后骨质疏松( P M O ) 又称I 型骨质硫松, 是原发性骨 质疏松的重要部分. 其发病机制仍有诸多不明之处。研究发 现, 雌激家缺乏是其主要原因, 使用雌激素替代治疗( E
10、R T ) 来 阻止本病的 发生、 发展、 取得了 一定的疗效。 但长期应用E R T 有一定的副作用。一氧化扳( N O ) 是在一氧化氮合酶( N O S ) 作用下山左精氨酸合成的。 广泛存在于机体多种组织和细胞 中, 与许多疾病的发生有密切关系, 在临床上已作为药物使 用。近几年来的研究表明. 雌二醉通过细胞因子 N O调节预 防 骨丢失 u 为了 进一 步探讨N O - N O S 系统对卵 巢性激素 缺乏导 致的 骨丢失的作用, 我们做了下述实验研究。 1 材料和方法 1 . 1 材料 1 . 1 . 1 实验动物选取3 个月龄、 体重( 2 6 0 t 1 4 ) 9 的Wis
11、t a r 雌鼠( 军事医学科学院动物中心提供) 4 9 只。随机分成7 组, 每组7 只。假手术( S h a m ) 组、 卵巢切除( O V X ) 组、 卵 巢切除+ 雌激家( O V X + E ) 组、 卵巢切除十N O供体( O V X + I D ) 组、 卵巢切除十 N O供体和雌激家( O V X 十 I D + E ) 组、 卵巢切除+ N O S 合醉抑制剂( O V X+ A G ) 组、 卵巢切除 十 N O S 抑制剂和雌激索( O V X + A G+ E ) 组。所有动物均在 ( 2 2 土 2 ) C室沮、 灯光1 2 h 交替、 相对湿度5 5 %的屏障系
12、统内 饲养, 给子标准全价顺粒饲料喂养。 1. 1 . 2 实验药物雌激家选用苯甲酸雌二醉( E s t r o d io l i B e n - - l E . I m 盯支 上海第九制药厂生产 , 每 3 d 皮下注射 1 次 每次注射3 5 p g / 味。N O供体选用硝酸异山梨酚( I s a s o r - b r i d e D in it r a t e , I D , 5 m g , 河北医科大学制药厂生产) 按2 . g / 枯剂量以无菌生理盐水配成混悬液2 - l 每d 油胃1 次I z l N O S 抑制剂选用iN O S 选择性抑制剂氨基胚( A m in o g
13、u a n i - d in e , A G 。北京理工大学宏宇化工公司生产) , 以自 来水配成 400.g/dl浓度、 自由 饮用, 据残余溶液计算A G的实际用笼 第 组A G 用 量为9 1 m g / d , 第 组A G 用 量为9 4 . g / d l “ . 1 . 2 方法 1 . 2 . 1 建立模型将大鼠以1 %硫资妥钠4 0 m g / k g 腹腔注 本课 题受河北省科委 攻关顶目 基金资助 ( 基 金编号: 9 9 2 7 6 1 6 1 D ) 河北医科大学环卫教研室 2 3 0 C h i n e e J o u rna l o f C o a l I n d
14、 u s t r y Me d i c in e Ma r c h 2 0 0 1 , V o l . 4 , N o . 3 射 麻醉. 无菌条件下, 经腰背部正中纵切1 7 进入腹腔背侧, 将血清N O S 的测定采用南京建成生物工程研究所提供的 一 组大鼠双侧卵集切除, 组仅行开关术。术后正常摄一氧化氮合酶试剂盒 据N O S 催化左精氨酸和分子氧反应生 食水。1 周后一组开始用药, 且给药剂量每周按体重校成N O , N O与亲核性物质生成有色化合物, 其原理是在 正】 次, 1 0 周后处死全部大鼠 。5 3 0 . m波长下测定代表组织N O S 活性的消光值大小, 据公式 1 .
15、 2 . 2 标本制备喂养1 0 周后称重、 断头处死大鼠, 留取全计算N O S 的浓度。 血后, 于低温超速离心机离心后取血清待检; 分离大鼠 右侧股1 . 3 统计方法实验数据使用E x c e l 软件中的t 检验、 方差 骨, 使用钮力天平( 精确到。1 g ) 秤取湿重后。 留侧骨密度分析和直线相关分析进行统计学处理, 所有数值均以三士 , ( B M D ) ,表示。P 0 . 0 5 ) ; O V X + A G组和O V X 4 A G + E组有 5 5 0 n m , 0 . 5 c m光径测定各管吸光度后, 据公式计算N O浓度。下降趋势, 但无统计学意义( P 0
16、. 0 5 ) 。见表t o 表1 各组大组休盈的变化和F W, B M I 的比较行士日 一一. . . . . . . . . . . . . 即. 休重 组别只数 休重 F W( R )B Ml ) ( a l c m , ) 实验前实验后 ShamO V X 2 6 1 . 3士1 5. 90. 20 0士0. 01 0 2 5 8 . 6士1 0. 30. 1 8 4: t 0. 011 : : : : 0 . 1 9 9 士 0 . 0 0 7 0 OVX+E OVX+I D OVX+ I D+ E1士1 5. 1 O VX+A G OVX+八G十E 9士1 3. 4 2 6 8
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