三七、川芎注射液对脊髓损伤后神经细胞凋亡及脊髓血流量变化的影响.pdf
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1、中国中医骨伤科杂志 200 8 年4 月第 16 卷第 4 期 药物研究 三七、 川芍注射液对脊髓损伤后神经细胞凋亡及 脊髓血流量变化的影响 周鹤 张晓艳, 朱超2 楚向东2 摘要1 目的: 本文观察了三七、 川芍( s qcx)注射液对脊髓损伤后神经细胞凋亡及脊髓血流量变化的影响。 方法: 将 60 只 S D大鼠随机分为脊髓损伤后应用三七、 川芍注射液组和单纯脊髓损伤组。用改良的All e n s 方法造模成功后, 分别在术后 1 , 2 , 4 , 8 , 12, 24 h 用 H och es st荧光染色法对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测, 采用氢清除法测量脊髓血流量( SCB F)变
2、化 。结果: 两组中均发现细胞凋亡, 模型组损伤 sh 后损伤节段灰质中阳性细胞达到高峰, 12h 后灰质中阳性细胞减少, 但白 质中出现凋亡细胞达到高峰。用药组sh 后细胞凋亡数与模型组有明显差异( 尸 0 . 0 5 ) , 24h后两组比较有显著性差异 ( 尸 0 . o 1 ) 。SCBF 在损伤后 lh明显下降, 4 h 后略有回升, s h后达到最低。24h 两组比较有显著性差异( 尸 。 . 0 1 ) 。结 论: 脊髓损伤后可导致神经细胞凋亡, 三七、 川芍注射液能明显抑制细胞凋亡并提高脊髓血流量。 关键词 脊髓损伤; 细胞凋亡; 脊髓血流量; 三七、 川夸注射液 中图分类号
3、R 一3 3 R 6 8 3 . 2 R 9 6 5 文献标识码 A 文章编号 1 0 0 5 一0 2 0 5 ( 2 0 0 8 ) 0 4 一0 0 2 9 一0 3 E f f e c t o f S a n q i a n dC h u a n x i o n gI nje c t i o no nA P o P t o s i s o f N e u r o c y t e a n dS P i n a I C o r dB l o o dF t o wa f t e r S P i n a l C o r d1 nju r y Z H O UP e n g Z H A N GX
4、i a o 少 a n Z HUCha o C HUX a n g d o n g Z , D e p a r t m e n t o f A n a t o m y , We nzh o u Me d i c a l Col l e g e , Z h ej i a n g 3 2 5 o 3 5 , C h i n a Z D e p a r t m e n t o f o r t h o p e d i c s , A f f i l i a t e dH o s p i t a l o f S h a n x i Col l e g e o f T r a d i t i o n a
5、l C h i n e s e Me d i c i n e A bst r act o bj e c t i ve: T oe x p l o r e t h e e f f e c t o f S a n q i a n d C h u a n x i o n g I nj e c t i o n( S Q C X I ) o na p o p t o s i s o f n e u r o c y t e a n ds p i - n a l c o r db l o o d f l o w( SCB F ) a f t e r s P i n a l c o r di nju r yi
6、 nr a t s . Me t h ods : S i x t y S P r a g u e- D a w l e yr a t s w e r e r a n d o m l y d i v i d e di n - t ot r e a t m e n t g rou p( t r e a t e dw i t hS Q C X I )a n dm o d e i g r o u P .T h em o d e 1 o f s p i n a l c o r di nju r yw a se s t a b l i s h e db yi m P rov e d A l l e n.
7、s m e t h o d .H o c h e s s t f l uor e s c e n t s t a i n i n g w a s a p p l i e d t o e v a l u a t e a p o p t o s i s i n n e u r o c y t e a t 1 , 2 , 6 , 8 , 1 2 a nd 2 4 h o u r s r e s p e c t i v e l y a f t e r t h e o p e ra t i o n .Me a n w h i l e , SCB Fw a s m e a s u r e db yh y
8、d r o g e nc l e a r a n c e .R es u l ts : A p o p t o s i s o f n e u r o c y t e a p p e a r e di nb o t hg r o u p s .P o s i t i v e l yl a b e l e dn e u r o c y t e s i nm o d e l g r o u pr e a c h e dt h ep e a ki nt h eg r a ym a t t e r a t 8h o u r s a n d d e c r e a s e da t l 2 h o u
9、r s m e a n w h i l e a P o p t o s i s i n t h e w h i t e m a t t e r r e a c h e dt h e p e a k . T h e r e w e r e s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s i na p o p - t o t i c n e u roc y t e s b e t w e e n t r e a t m e n t g ro u p a n dm o d e l g rou pa t 8h o u r s a nd 2 4h o u r s
10、( P 0 . 0 5 , P 0 . 0 1 , r e s P e c t i v e l y ) . S C B Fd e c r e a s e da t l h o u r , i n c r e a s e dm o d e r a t e l y a t 4h o u r s , t h e n d e c r e a s e dt ot h e l o w e s t l e v e l a t 8h o u r s a n d a p P a r e n t s t a - t i s t i c a l d i f f e r e n c e b e t w e e n t
11、 h e t w o g r o u p s w a s o b t a i n e d a t 2 4 h o u r s ( P 0 . 0 1 ) . C onc l usi on: N e u r o c y t e a p o p t o s i s e 对 s t e d i n s p i n a 1 c o r di nj u r y w h i l e S Q C X I c o u l d r e m a r k a b l y i n h i b i t a p o p t o s i s a n di n c r e a s e t h e SCB Fa f t e r
12、 s p i n a l c o r d i nj u r y . K 灯 w o r d s S P i nal cord i nju r y ; A poP t o s i , ; SPi n a l c o r db l o o df l o w; San q i a n dc h u a n 元 o n gi nject i o n 脊髓损伤( SCD后, 继发性损伤是导致不可逆转病理改变 的主要原因, 如何防止或减轻继发改变是医务科学工作者研究 的主要问题, 而神经细胞凋亡和微循环障碍是继发改变的主要 组成部分, 1一3 , 目 前临床应用大剂量甲基强的松龙治疗脊髓损 伤, 有报道大
13、剂量甲基强的松龙能抑制细胞凋亡, 川但大量激 素应用对患者产生很多负作用。 sj近年来, 中医药治疗脊髓损 , 温州厌学院解剖学教研室( 浙江 温州, 3 2 5 o 3 5) 2 陕西中医学院附属医院骨科 通讯作者: 周鹏, E-m a i l : : x n p 8 8 8 8 y a hoo . com . c n Te l : 0 5 7 7 一8 6 6 8 9 9 6 5 伤取得了可喜成果, 有报导用川芍注射液、 三七注射液治疗脊 髓损伤, 疗效较好。笔者在大鼠脊髓损伤模型早期联合应用三 七、 川芍注射液, 采用原位末端脱氧核糖核昔酸转移酶介导 d U T P 标记法( T U N
14、 E L), 观察三七、 川芍注射液对损伤脊髓神 经细胞凋亡和对脊髓血流量变化的影响, 为中医药治疗脊髓损 伤提供依据。 1 材料与方法 1 . 1 动物模型 6 0 只sD 大鼠, 体重2 0 0 士509 , 随机分为模型组、 用药组。 将大鼠用 10%水合抓醛 3 00 m g / k g腹腔注射麻醉, 暴露 C g 一 T l , 用改良的 Alle n打击法. 致伤脊髓, 并给予大鼠青霉素钠 80 万方数据 C h i n e s e J T r a d M e d T r a u m 与模型组 24h比较, P 0 . 01。 3 . 2 两组细胞凋亡数 伤后两组中均发现细胞凋亡,
15、 用药组 s h后细胞凋亡率与 模型组有明显差异( 尸0 . 05) , 24h后两组比较有显著性差异 ( P 0 . 0 1 ) ( 表 2 ) 。 表 2 各组大鼠受伤后脊髓中凋亡细胞情况 损伤后时间模型组 出 了0乙,上氏 匕JO户八Jb l h 2 h 4 h 8 h 1 2 h 2 4 h 2 . 1 4 士1 , 8 2 7 . 5 3 士5 . 4 8 1 5 . 8 9 士5 . 6 8 2 3 . 6 4 士7 , 5 8 1 4 . 5 9 士4 . 8 6 9 . 4 9 土8 . 6 2 用药组 3 . 4 2 士1 . 6 . 8 7 士4 . 1 4 . 3 8 士
16、8 . 1 8 . 1 4 士8 . 1 2 . 8 1 士5 . 6 3 4 . 2 6 士2 . 3 9 么 注: 与模型组比较, 尸 0 . 05; 尸 。 . 01. 3 . 3 脊髓血流量变化与凋亡细胞之间的相关性( 图 1) 铸 口刁 吕 细胞调亡 圈 1 资肠血流,变化与凋亡细胞之间的相关性 明S C I 后 SCB F变化与细胞凋亡率有明显的相关性。 4 讨论 有关脊髓损伤继发改变机理的研究有微循环化学调节紊 乱、 自由基和血管机制、 细胞凋亡。最近有关细胞凋亡的报道 很多, 中枢神经系统损伤后广泛存在着神经细胞凋亡, 0傅强 等用T U N EIJ 法观察到细胞凋亡在受伤后4
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