三磷酸胞二钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Fas蛋白表达的影响.pdf
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1、 基础论著 文章编号 ! “ “ # $ % & ( () “ “ &) “ # $ “ # * + $ “ ) 三磷酸胞二钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后 F a s蛋白表达的影响 “ + “ “ “ 河北省唐山市, 华北煤炭医学院附属医院感染性疾病科张瑞凤刘艳清王艳玲 关键词脑缺血、 再灌注; 海马区; F a s蛋白; 细胞调亡; 三磷酸胞二钠; 大鼠 中图分类号 R$ + + ) 文献标识码 A 近几年来, 大量的研究表明脑缺血再灌注后海马区出现 神经细胞凋亡, 其发生的机制尚不十分清楚。细胞凋亡的发 生是一个主动的细胞死亡过程, 是由基因调控的。凋亡相关 的基因通常分为二大类, 即抗凋亡
2、基因和促凋亡基因。F a s 为目前发现的最重要的促凋亡基因之一。我们就大鼠脑缺血 再灌注后海马区F a s蛋白的表达规律进行研究。同时, 给予 三磷酸胞二钠 (维力安) 进行治疗, 探讨维力安的脑保护作用。 1 资料与方法 1 . 1. 动物及分组取! % “只雄性W i s t e r大鼠 (购自北京大 学医学部实验动物中心) , 体重+ & “( “ “ g, 随机分成脑缺血 再灌注组 ( “只) 、 生理盐水组 ( “只) 及维力安治疗组 ( “ 只) , 每组又分别划分为伤后, ! ),) (,( *,# ),! *等个时相 组, 并设正常对照组 (! “只) 。 1 . 2 动物模
3、型制备线栓法 !制作大鼠大脑中动脉缺血再 灌注模型, 于左侧颈总动脉分叉处做一切口, 插入直径“ . ) + m m尖端蘸有石蜡的单股尼龙线, 经颈内动脉入颅, 遇阻力后 稍退出“ . & m m, 插入深度约为 (! . * , “ . () m m, 至大脑前动脉 近端, 完全阻断大脑中动脉起始部的血供, ) h后抽出尼龙线 实现再灌注。 1 . 3 给药方法维力安用生理盐水稀释后, 维力安治疗组于 伤后& m i n和 “ m i n各接受一次维力安 (+ “ m g k g ) 腹腔内注 射; 生理盐水治疗组于伤后& m i n和 “ m i n各接受!次等量的 生理盐水腹腔内注射;
4、而脑缺血再灌注组及正常对照组于伤 后未接受任何治疗。 1 . 4. 标本的制备分别于致伤后不同的时间点以( % (的 多聚甲醛) & “ m l经心灌注固定后, 开颅取脑, 放于相同的外固 定液中( 过夜。常规石蜡包埋, 冠状切片, 片厚! “ m。 1 . 5 F a s的原位杂交检测F a s免疫组化检测试剂盒购于北 京中山生物技术公司, 试验操作严格按照该公司提供的说明 书进行。 1 . 6 图像分析采用C M I A S$真彩色医学图像分析系统 (由北京航空航天大学提供) 和O L YM P U S摄像显微镜进行 海马区F a s蛋白阳性细胞的平均光密度 (O D) 值的测定。 1 .
5、 7 统计学方法实验中所得数据均用 x,s表示, 经a c - c e s s数据库整理后应用美国S A S统计软件 . ! )T S“ ) “f o r w i n d o w s, 应用方差分析q检验。检验水准- “ . “ & (双侧) 。 2 结果 大鼠伤后 h海马C A !区出现F a s蛋白的表达增加, ! ) h 明显增强, ( * # ) h达高峰,! * h明显下降。伤后) + d维力 安治疗组较缺血再灌注组F a s蛋白的表达明显减轻, 见表!。 正常对照组海马C A !区未检测到F a s蛋白的表达。 表!各组海马C A !区神经细胞F a s蛋白表达改变 ( x,s,O
6、 D值) 组别 n h! ) h) ( h( * h# ) h! * h 缺血再灌注组 ! “ . “ & , “ . “ ! “ . “ * ) , “ . “ ! (“ . ! ! , “ . “ ) *“ . ! # , “ . “ ( !“ . ! % + , “ . “ ( *“ . “ ( # , “ . “ “ % 生理盐水组 ! “ . “ & ( , “ . “ “ %“ . “ * ! , “ . “ ! +“ . ! ! & , “ . “ ) *“ . ! # & , “ . “ ( )“ . ! % ! , “ . “ & “ . “ ( , “ . “ “ % 维力
7、安治疗组 ! “ . “ & & , “ . “ ! !“ . “ # , “ . “ ! (“ . “ * ! , “ . “ ! % * “ . ! “ ( , “ . “ ) ( * * “ . ! ) “ , “ . “ ) % * * “ . “ + & , “ . “ “ * 注: 与缺血再灌注组比较,*P “ . “ &,* *P “ . “ ! 3 讨论 F a s蛋白属于神经生长因子受体 (N G F R) 肿瘤坏死因子 受体 (T N F R) 超家族成员, 在功能上与T N F$RI密切相关, 因为二者都拥有一个能够传递细胞毒性 凋亡信号的死亡结 构域 ) 。F a s
8、L(F a s受体) 与F a s结合可促发一系列细胞内事 件, 最终导致靶细胞的c a s p a s e s激活, 细胞死亡 + 。有关脑损 伤后F a s的表达情况国内外鲜有人报道。R o s e n b a u m等 (证 实, 大鼠局灶性脑缺血后缺血区的神经元F a s及F a s L表达增 加, 说明F a s介导的凋亡参与了脑缺血的病理生理过程。本 研究发现脑缺血再灌注后海马区出现F a s蛋白的表达, 这说 明了F a s参与了缺血再灌注后神经细胞凋亡过程。 磷脂酰乙醇胺 (脑磷脂) 和磷脂酰胆碱 (卵磷脂) 是细胞膜 的主要成分, 三磷酸胞苷 (C T P) 直接参与甘油磷脂
9、与核酸的 合成。研究表明, 细胞内的磷酸乙醇胺胞苷酰基转移酶 (P E C T) 、 磷酸胆碱胞苷酰基转移酶 (P C C T) 的活性和磷酸酯 合成率对C T P的细胞浓度具有高度依赖性, P E C T对C T P的 依赖性更大 & 。C T P通过多种途径参与脑磷脂合成, 在提高 神经细胞膜的合成率方面有作用 。三磷酸腺苷 (A T P) 参与 能量合成、 转化, 而不直接参与甘油磷脂的合成, 需转化成 C T P, 但转化量是有限的。有研究表明,C T P能够有效的改善 +*# 中国煤炭工业医学杂志2 0 0 5年7月第8卷第7期 文章编号 ! “ “ # $ % & ( () “ “
10、 &) “ # $ “ # * ( $ “ + 一氧化氮合酶功能的不相匹配与硝酸甘油耐药性 及阿托伐他汀的影响 ( ) “ “ “ 河南省漯河中心医院心血管内科刘继烈阎文泰 关键词硝酸甘油; 阿托伐他汀; 一氧化氮合酶; 耐药性; 大鼠 中图分类号 R$ + + ) 文献标识码 A 硝酸甘油 (N T G) 的耐药性是指N T G持续应用时, 药物 效应的降低, 需要增加药物的剂量来达到最佳效应, N T G耐 药性的形成是限制此类药物临床效应的主要因素 ! 。本研究 将阿托伐他汀与N T G合用, 通过检测血管组织内一氧化氮 含量 (n i t r i co x i d e, N O) 、
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