丘脑中央下核内的阿片受体在介导大鼠电针镇痛中的作用.pdf
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1、研究原著文章编号: 1000-2790 (2006) 15-1376-04 丘脑中央下核内的阿片受体在介导大鼠电针镇痛中的作用 朱娟霞1, 唐 超2, 肖丹秦1 (1西安医学院生理学教研室, 陕西 西安 710068, 2 西安咸阳国际机场急救中心, 陕西 西安 710082 = ) 收稿日期: 2005-08-22; 接受日期: 2005-11-14 作者简介: 朱娟霞. 硕士, 讲师. Tel:(029) 88462771 Email: juanx tom. com Role of opioid receptor in nucleus sub- medius in mediating el
2、ectroacupunc- ture analgesia in rats ZHU Juan-Xia1,TANG Chao2,XIAO Dan-Qin1 1Department of Physiology, Xian Medical College, Xian 710068, China, 2Department of Emergency,Xian Xianyang International Airport Aviation Service,Xian 710082,China 【Abstract】AIM:To study the role of opioid receptor in thala
3、mic nucleus submedius( Sm)in mediating the electroacupuncture (EA)analgesia. METHODS:The latency(TFL)of tail-flick (TF)reflex was used as an index of nociceptive response. The effects of the opioid receptor antagonist naloxone(1. 0 g,0. 5 L)microinjected into the Sm on the TF reflex inhibition induc
4、ed by EA stimulation of the “zusanli point“(St. 36)with high(5. 0 mA) - and low(0. 5 mA) -intensity were examined in the lightly anesthetized rats.RESULTS:Sm microinjection of naloxone antagonized the high-intensity EA-induced inhibition of the TF reflex,but did not influence the inhibition induced
5、by the low- intensity EA stimulation.When naloxone was applied to the replacements with more than 0. 5 mm dorsal, ventral and lateral to the Sm,the EA-induced inhibition was not influenced under either high- or low-intensity condition.CONCLUSION:The opioid receptors in Sm are involved in mediating t
6、he analgesia by high-intensity EA stimulation for exciting small afferent fibers (A and C groups) . 【Keywords】thalamic nuclei;opioid receptor;naloxone;elec- troacupuncture analgesia;tail flick reflex 【摘 要】目的:观察丘脑中央下核 (Sm) 内的阿片受体是否 参与介导电针 (EA) 的镇痛作用. 方法:以辐射热诱发甩尾 (TF) 反射的潜伏期 (TFL) 作为伤害性反应指标,观察 Sm 内 微量
7、注射阿片受体拮抗剂纳洛酮对强 (5. 0 mA) 、 弱 (0. 5 mA) EA “足三里” 穴(St. 36)抑制大鼠 TF 反射的效应. 结果: Sm 内微量注射纳洛酮 (1. 0 g, 0. 5 L) 阻断高强度 EA 对 TF 反 射的抑制效应, 但对低强度 EA 诱发的 TF 反射抑制无明显影 响. 当纳洛酮注射到 Sm 以外的部位时,对强、 弱 EA 诱发 TF 反射的抑制均无明显影响. 结论: Sm 内的阿片受体参与介导 强 EA 兴奋细传入纤维 (A 和 C 类) 产生的镇痛作用. 【关键词】丘脑核; 阿片受体; 纳洛酮; 电针麻醉; 甩尾反射 【中图号】Q426 【文献标识
8、码】A 0 引言 研究 1证明, 丘脑中央下核 (nucleus submedius, Sm) 不仅参与痛觉感受, 也参与痛觉调制, Sm - 腹外 侧眶皮层 (ventrolateral orbital cortex,VLO)- 导水管 周围灰质 (periaqueductal gray,PAG) 构成一个痛觉 调制的通路, 通过激活脑干下行抑制系统, 在脊髓水 平抑制伤害感受性输入以产生镇痛. 电解损毁双侧 Sm 或 Sm 内微量注射局部麻醉剂利多卡因可明显减 弱强电针 (electroacupuncture,EA) 诱发的甩尾 (tail flick,TF) 反射和脊髓背角伤害感受神经元
9、的抑制, 而对弱 EA 的抑制无明显影响, 提示 Sm 可能参与介 导强 EA 兴奋细纤维产生的镇痛 2. 有研究3表明, Sm 内微量注射吗啡产生抗伤害效应, 并且这种效应 可被 Sm 内给予阿片受体拮抗剂纳洛酮所翻转, 提示 阿片及其受体参与介导 Sm 的抗伤害感受效应. 我们 旨在观察 Sm 内阿片受体是否参与介导 EA 刺激产生 的镇痛作用及 Sm 内微量注射阿片受体拮抗剂纳洛 酮对不同强度 EA “足三里” 穴 (St. 36) 抑制大鼠 TF 反射的效应. 1 材料和方法 1. 1 材料 SD 大鼠 25 只 (陕西省实验动物中心) , 雄性, 体质量 270 300 g. 脑立体
10、定位仪 (SN-3, 日 本) ; 电子蠕动泵 (浙江象山定山仪器厂) ; 温控仪; 纳 洛酮 (naloxone)(美国 Sigma 公司) . 1. 2 方法 1.2. 1 动物分组 实验完毕后根据组织学定位分为 两组, 即注射点在 Sm 内组 (14 只) 和注射点在 Sm 外 组 (11 只) . 在戊巴比妥钠 (50 mg/ kg) 腹腔麻醉下行 常规气管插管和颈静脉插管术, 将动物头固定于脑立 体定位仪上, 根据鼠脑图谱确定 Sm 位置 (前囟后 2. 3 2. 8 mm, 中线外 0. 5 0. 9 mm, 脑表面下 6. 0 7.0 mm) 4, 用牙科钻在颅骨上相应部位钻孔,
11、 在 Sm 6731 第四军医大学学报 (J Fourth Mil Med Univ) 2006; 27 (15) http: / / journal. fmmu. edu. cn 背侧垂直插入引导套管, 使其尖端在 Sm 上方 2 mm 处, 以备通过该套管插入微量注射器针头到 Sm. 术后 经颈静脉持续给予戊巴比妥钠 4 5 mg/ (kgh) , 使动物保持浅麻醉状态. 温控仪监测大鼠体温并使肛 温保持在 37 38. 1.2. 2 TF 试验 用辐射热刺激大鼠尾部以诱发 TF 反射, 以 TF 反射潜伏期 (tail flick latency,TFL) 作为 伤害性反应的指标. 调节
12、辐射热的强度, 使基础 TFL 维持在 3. 0 3. 5 s. 实验过程中每隔 5 min 测一次 TFL, 为防止烫伤大鼠尾部皮肤, 若 TFL 达到或超过 7 s 时及时停止刺激, 并记当次 TFL 为 7 s. 1. 2. 3 穴位电针刺激 在一侧后肢相当于 “足三 里” 穴 (St. 36) 处, 用一对不锈钢针灸针垂直于皮肤 刺入, 进针深度约为 5 mm, 针间距为 5 mm. 通过针灸 针施加恒流方波脉冲 (波宽 0. 3 ms) , 弱电针用 0. 5 mA(50 Hz) , 强电针用 5 mA(5Hz) , 持续 15 min. 1. 2. 4 核团微量注射 当连续3 次测
13、定的 TFL 稳定 在 3. 0 3. 5 s 范围后, 将微量注射器针头经过预先 插入的引导套管插入 Sm, 通过微量注射器将纳洛酮 (1. 0 g, 0. 5 L) 缓慢注入, 2 3 min 注完. 之后施 加 EA 刺激, 持续 15 min, 观察 EA 期间及停止后 15 min 内每 5 min TFL 的变化. Sm 内注射 0. 5 L 的生 理盐水作为对照, 重复上述步骤. 统计学处理:实验数据以 x sx表示, 用重复测 量方差分析(ANOVA) 及 t 检验 (Bonferroni t-test) 作 统计学处理, P 0. 05 认为检验的差异有显著性. 2 结果 2
14、. 1 电针 “足三里” 穴对 TF 反射的抑制效应 强 EA 和弱 EA 均可明显抑制 TF 反射,TFL 明显延长. 在 15 min 强 EA 期间,TFL 平均增加基础值的 (68. 3 2. 2) % (n =14) , 而 15 min 弱 EA 期间, TFL 平均增加 (33. 7 2. 1) % (n =14) ,两者之间差异显 著 (P 0. 001) . 停止 EA 后 TFL 即恢复到基础水平 (图 1) . bP 0.001 vs 弱电针组;dP 0.001 vs 对照组. 图 1 强电针和弱电针 “足三里” 穴抑制甩尾反射效应的比较 2. 2 Sm 注射纳洛酮对强
15、EA 抑制 TF 反射的效应 Sm 内微量注射纳洛酮完全阻断强 EA 诱发的 TF 反射抑制 (图 2A) , 在 15 min 强 EA 期间, Sm 内注射 生理盐水对 EA 诱发 TF 反射的抑制效应无任何影 响, TFL 平均增加 (68. 3 2. 2) % (n =14) , 而注射纳 洛酮后仅增加 (2. 6 1. 2) % (n = 14) . 两者之间差 异显著 (t =23. 77,P 0. 001) . bP 0. 001 vs 盐水 + 强电针组. 图 2 丘脑中央下核内微量注射纳洛酮对强电针 (A) 和弱电 针 (B) 抑制甩尾反射的阻断效应 (n =14) 2. 3
16、 Sm 注射纳洛酮对弱 EA 抑制 TF 反射效应的 影响 Sm 内微量注射纳洛酮对强 EA 抑制大鼠 TF 反射的效应无影响 (图 2B) , 在 15 min 弱 EA 期间, Sm 内注射生理盐水后 TFL 增加 (33. 7 2. 1) % (n = 14) , 注射纳洛酮后 TFL 增加 (29. 3 2. 4) % (n = 14) , 两者之间无显著性差异 (t =1. 60,P =0. 67) . 2. 4 Sm 邻近区注射纳洛酮对 EA 抑制 TF 反射效 应的影响 微量注射纳洛酮到 Sm 的邻近区域, 对强 或弱 EA 诱发 TF 反射抑制的效应均无影响. 这些区 域注射生
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