两种冷冻方法对形态正常精子百分率的影响.pdf
《两种冷冻方法对形态正常精子百分率的影响.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《两种冷冻方法对形态正常精子百分率的影响.pdf(3页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、第 12 卷 第 4 期中华男科学杂志Vol. 12 No. 4 2006 年 4 月National Journal of AndrologyApr. 2006 研究简报 两种冷冻方法对形态正常精子百分率的影响 王洪亮1,刘睿智2,孙 妍2,许宗革2 (吉林大学, 1. 第一临床医院泌尿外科, 2. 基础医学院细胞生物学教研室,吉林 长春 130021) 关键词:精子;冷冻保存;精子形态 中图分类号:R321. 1;R454. 5 文献标识码:B 文章编号: 1009-3591(2006)04-0362-03 目前人类精液冷冻方法主要分为速冻和缓慢冷 冻法两大类。精液冷冻保存过程中, 精子经
2、历了降 温冷却、 冻结、 解冻复温, 其中冰晶形成对精子结构 不可避免造成损伤 1。精子形态是决定精子能否受 精的重要因素 2。低温是否对精子形态产生影响, 本研究比较了两种冷冻方法对人精子形态影响, 现 报告如下。 1 对象和方法 1. 1 研究对象 41 例精液标本均来自 2003 2004 年吉林大学第一医院泌尿外科不育门诊初诊者, 年 龄 24 40 岁, 身体健康, 无外伤及遗传性疾病家族 史, 无性功能障碍病史, 体检未发现有明显睾丸、 附 睾及输精管异常。 1.2 精液标本收集 禁欲 3 7 d 后手淫或取精器 取精液于干燥消毒量杯内, 置 37 水浴箱内液化, 待精液液化后,
3、按世界卫生组织 人类精液及精子- 宫颈粘液相互作用实验室检验手册(第四版) 进行 精液常规分析, 选用 (a + b) 级精子百分率 50%、 精子密度 20 106/ ml、 精液量 2ml 的精液标本。 1. 3 精液冷冻 每例标本一式 3 份。1 份立即涂 片, 空气干燥, 进行冷冻前精子形态分析。另 2 份加 入甘油-卵黄-枸橼酸钠 (GYC) 精液冷冻保护剂, 或 缓慢逐滴加入等量7. 5%甘油, 分别进行快速冷冻和 缓慢冷冻。快速冷冻直接投入到 -196 液氮冷冻 保存; 慢速冷冻先置室温下静置 10 15 min、 4 冰 箱内 10 min、- 20 冰箱内 10 min, 再
4、置入液氮蒸 汽层 10 min, 最后浸入液氮内保存。冻存 6 个月后, 将精液标本取出迅速置于 37 解冻复温、 洗涤, 进 行精子形态分析。 1. 4 精子形态分析 采用国产 WLJY-9000 型伟力 彩色精子质量检测系统进行精子形态分析, 精子形 态染色采用改良 Papanicolaou 染色法。精子形态按 系统设定的程序分为 11 类, 即形态正常精子、 大头 精子、 小头精子、 梨形头精子、 锥形头精子、 无定形头 精子、 空泡样头精子、 双头精子、 颈部和中段缺陷精 子、 尾部缺陷精子、 其他畸形精子。 1. 5 统计学分析 检测数据用 x s 表示, 采用 SPSS 11. 5
5、 软件包进行分析, 均值比较采用 t 检验。 2 结果 2. 1 GYC 组速缓冷冻方法对形态正常精子百分率 影响 GYC 组速冻法和缓慢冷冻法保存复温后形 态正常精子百分率均显著低于冷冻前 (P 0. 05) 。见表 1。 2. 2 甘油组速缓冷冻方法对形态正常精子百分率 影响 甘油组速冻法和缓慢冷冻法保存复温后形态 正常精子百分率均显著低于冷冻前 (P 0. 05) 。见表 2。 3 讨论 精子形态在受孕过程中起重要作用, 被认为是 衡量男性生育中较好指标, 形态正常精子百分率与 受孕有直接关系, 比精子密度、 精液量和运动性更能 263 收稿日期: 2005-04-22;修回日期: 20
6、05-12-15 基金项目:吉林省科技厅资助项目 (20030433) 作者简介:王洪亮 (1963-) , 男, 吉林长春市人, 副教授, 博士, 从事男科学专业。 表 1 GYC 组速冻法和缓冻法间形态正常精子百分率比较 (x s,%, n =20) 组别 冷冻前 GYC 速冻法 GYC 缓慢冷冻法 正常形态精子33.89 10.5515. 75 9. 31*14. 59 7. 70* 非正常形态精子66.12 10.5584. 25 9. 31*85. 42 7. 70* 大头精子1.50 1.872. 40 2. 211. 89 1. 90 小头精子3.30 4.194. 55 4.
7、984. 49 4. 62 锥形头精子10.45 7.599. 40 9. 239. 27 7. 22 梨形头精子10.05 6.178. 60 5. 6510. 12 7. 76 无定形头精子9.15 6.7510. 05 6. 529. 67 5. 81 空泡样头精子2.20 2.533. 05 2. 682. 65 2. 72 双头精子0.15 0.370. 45 0. 690. 45 1. 00 颈部和中段缺陷精子5.39 2.719. 20 7. 21*9. 38 6. 57* 尾部缺陷精子4.73 5.646. 10 6. 024. 65 4. 70 其他畸形精子19.22 9.7
8、730. 45 7. 84*32. 85 10. 11* 与冷冻前比较, *: P 0. 05) 。 缓冻法和速冻法的优劣众说不一 4。缓冻法 是通过分步降温, 使精子细胞逐步适应低温环境, 减 少 “冷休克” 的发生。速冻法是迅速跨过冰晶形成 的危险温度区 ( -5 - 80 ) , 最大限度地减少冰 晶形成。过快地降温使细胞内液来不及脱水, 大量 冰晶形成, 可造成精子损伤甚至死亡。而过慢降温 使细胞过度脱水, 也导致精子损伤。本研究结果显 示冷冻速度对形态正常精子百分率并没有显著影 响。 参考文献 1 Meseguer M,Garrido N,Martinez-Conejero JA,e
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 冷冻 方法 形态 正常 精子 百分率 影响
链接地址:https://www.31doc.com/p-3697823.html