不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响.pdf
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1、8 7 9 基 础 研 究 不同脑缺血方式对大鼠学习记忆能力的影响 柯荔宁王玮张更赵小贞 【 摘要】 目 的 建立一种合适的脑缺血动物模型对于探寻疾病的发生以及防治至关重要。方法 本研究采用双侧颈总动脉( C C A ) 永久性结扎法、 双侧椎动脉( V A ) 电凝并双侧颈总动脉反复夹闭法、 双侧 颈总动脉反复夹闭并全身低血压3 种不同的脑缺血模型制作方法处理大鼠, 并于术后1 5 d , 3 0 d , 6 0 d , 9 0 d 4 个不同时间点进行M o r r i s 水迷宫测试, 应用S P S S 1 1 . 0 统计软件分析各组大鼠的行为学检测结果, 采用平 均逃避潜伏期和搜索
2、策略两个指标评价大鼠学习记忆能力。结果脑缺血3 0 d 以内, 大鼠的学习记忆能 力以双侧V A电凝并双侧C C A反复夹闭法和双侧C C A反复夹闭并全身低血压制作的模型组最差 术后3 0 d , 逃避潜伏期分别为: ( 2 9 . 2 3 士 5 . 3 9 ) s , ( 3 0 . 0 3 士 8 . 8 4 ) s ; 综合得分: ( 7 6 6 . 2 0士 1 7 3 . 5 5 ) 分, ( 6 1 0 . 2 0 士 7 3 . 8 1 ) 分 ; 脑缺血3 0 一 6 0 d , 以双侧C C A永久性结扎法和双侧V A电凝合并双侧C C A反复夹闭法制作的 模型组最差 术
3、后6 0 d , 逃避潜伏期为: ( 1 8 . 5 6 士 4 . 巧) s , ( 2 0 . 6 1 土 4 . 8 7 ) s , 综合得分: ( 4 4 9 . 4 1 9 5 . 4 5 ) 分, ( 4 3 7 . 4 士 8 0 . 2 2 ) 分 ; 6 0 d 以上, 以双侧C C A永久性结扎法制作的模型组成绩最差 术后9 0 d 该组的逃避 潜伏期: ( 1 6 . 6 3 土 3 . 0 0 ) s ; 综合得分: ( 4 1 0 . 8 士 9 2 . 3 7 ) 分 。结论 不同脑缺血方式对大鼠 学习记忆能力的 影响和不同的缺血时间密切相关, 适合于不同病因诱发的
4、脑缺血梗死疾病的研究。 【 关键词】 脑缺血; 学习记忆; 大鼠 I n fl u e n c e s o f s t u d y a n d m e m o r y a b i li ty i n r a t f o ll o w i n g t h e d i f f e r e n t w a y s o f c e r e b r a l i s c h e m i a K E L i - n i n g , W A N G W e i , Z H A N G G e n g , e t a l . D e p a r t m e n t o f A n a t o m y a n d
5、 H is t o l o g y a n d E m b r y o l o g y , F u j i a n M e d i c a l U n i - v e r s i t y , F u z h o u 3 5 0 0 0 4 , C h i n a A b s t r a c t O b j e c t i v e S e t t i n g u p o n e s u it a b l e c e r e b r a l i s c h e m i a a n i m a l m o d e l f o r s e e k i n g e m e r g e n c e a n
6、 d p r e v e n t i o n o f d i s e a s e . Me t h o d s T h i s r e s e a r c h a d o p t s t h e p a i r s o f s i d e c o m m o n c a r o t i d a rt e ry( C C A ) p e r m a n e n t l i g a t u r e, p a i r s o f s i d e v e rt e b r a a rt e ry( V A ) e l e c t r i c i t y c o n g e a l a n d p a
7、i r s o f s i d e c o m m o n c a r o t i d a rt e ry i n s e rt c l o s - i n g r e p e a t e d l y , p a ir s o f s i d e c o m m o n c a r o t id a rt e ry( C C A ) i n s e rt c l o s i n g r e p e a t e d l y a n d w h o l e b o d y h y p o t e n s i o n t h r e e d i ff e r e n t c e r e b r a
8、l i s c h e m i a m o d e l m a n u f a c t u r e m e t h o d s t o p r o c e s s t h e r a t s , a n d t h e n t e s t M o r r i s w a t e r m a z e i n 1 5 d , 3 0 d , 6 0 d , 9 0 d a f t e r t e c h n i q u e , a n a l y z e s e a c h g r o u p s b e h a v i o r s t u d y e x a m i n a t i o n r
9、e s u l t u s i n g t h e S P S S 1 1 . 0 s t a t i s t i c s s o f t w a r e , u s e s t h e a v e r a g e t o a v e r a g e e s c a p e l a t e n c y a n d t h e s e a r c h s tr a t e g y t w o t a r g e t s 场a p p r a i s e s t h e r a t s t u d y m e m o ry a b i l i t y . R e s ul t s B y t h
10、e d a y 3 0 p o s t c h a l l e n g e , t h e g r o u p w h i c h V A e l e c t r i c i t y c o n g e a l e d a n d C C A i n s e rt c l o s i n g r e p e a t e d l y o r t h e g ro u p w h i c h C C A i n s e rt c l o s i n g r e p e a t e d l y a n d w h o l e b o d y h y p o t e n s i o n a r e t
11、 h e w o r s t i n s t u d y m e m o ry a b i l i t y t h r o u g h t h e M o r r i s w a t e r m a z e T h e d a y 3 0 p o s t c h a l l e n g e , A v e r a g e e s c a p e l a t e n c y : ( 2 9 . 2 3 1 5 . 3 9 ) s , ( 3 0 . 0 3 土 8 . 8 4 ) s ; t h e s y n t h e s i s s c o r e s p o i n t s : 7 6
12、6 . 2 t 1 7 3 . 5 5 , 6 1 0 . 2 t 7 3 . 8 1 ; I n 3 0 d - 6 0 d p o s t c h a ll e n g e , t h e g r o u p o f C C A p e r m a n e n t l i g a t u r e a n d t h e g r o u p o f V A e l e c t r i c i t y c o n g e a l a n d C C A i n s e rt c l o s i n g re p e a t e d l y a r e t h e w o r s t T h e
13、 d a y 6 0 p o s t c h a ll e n g e , A v e r a g e e s c a p e l a t e n c y ; ( 1 8 . 5 6 土 4 . 1 5 ) s , ( 2 0 . 6 1 土 4 . 8 7 ) s ; t h e s y n t h e s i s s c o r e s p o i n t s : 4 4 9 . 4 士 9 5 . 4 5 , 4 3 7 . 4 土 8 0 . 2 2 ; 6 0 d 叮 s a f t e r i s c h e m i a , t h e g r o u p o f C C A p
14、e r m a n e n t l i g a t u r e i s t h e w o r s t T h e d a y 9 0 p o s t c h a ll e n g e , A v e r a g e e s c a p e l a t e n c y ; ( 1 6 . 6 3 土 3 . 0 0 ) s ; t h e s y n t h e - s i s s c o r e s p o i n t s : 4 1 0 . 8 士 9 2 . 3 7 1 . C o n c l u s i o n T h e s e t h re e m e t h o d s i n
15、t h e i n fl u e n c e o f s t u d y i n g m e m o ry a b i l i t y o f t h e r a t s a r e c l o s e l y r e l a t e d t o d i ff e r e n t i s c h e m i a t i m e , s u i t e d t o t h e s t u d y i n g o f t h e c e r e b r a l i s c h e m i a d i s e a s e w h i c h i n d u c e d i n t h e d i f
16、 f e r e n t c a u s e s . K e y w o r d s C e r e b r a l i s c h e m i a ; L e a r n i n g a n d m e m o ry ; R a t 随着全球人口的老龄化, 各种脑血管性疾病患病 率和发病率呈指数上升, 有调查表明脑血管疾病已经 成为 威胁人 类生 存的主 要原因 之一 , 但是由 于 病因 复杂、 病程不一, 其确切的神经病理机制尚未彻底阐 明。因此, 建立一种合适的脑缺血动物模型对于探寻 疾病的发生机制以及临床防治的研究是至关重要的。 基金项目: 福建医 科大青年教师科研基金资助项目 (
17、F J G X I 闪 4 0 1 4 ) 作者单位: 3 5 0 0 0 4福州市, 福建医科大学人体解剖学与组织胚胎 材料与方法 一、 主要仪器及参数设置 M o r r i s 系列圆形迷宫( 北京新天地科技公司制 造) : 迷宫直径1 . 5 m , 高度5 0 c m, 水深 1 7 c m 。平台直 径1 2 . 5 c m , 高度1 5 c m , 平台 选在第三象限放置并没于 水下2 c m , 水温( 2 4 土 2 ) T。实验期间保持平台位置、 实验环境与参照物基本不变。测试系统配套软件: M o r r i s 水迷宫测试系统一 2 . 5 . 2 版。 二、 动物分
18、组 经M o r r i s 水迷宫筛选出学习记忆能力处于正常值 学系 8 8 0 范围的1 8 月龄雄性S D大鼠1 1 0 只( 由福建医科大学 实 验动物中心提供) , 体质量( 5 3 1 . 0 土 5 9 . 3 ) g 。 按初 次水迷宫成绩由小到大依次编号, 取随机数字, 再按随 机数字由 小到大给大鼠 编序号1 一 1 1 0 。 规定序号1 - 2 3 号为I 组, 序号2 4 一 4 6 号为II 组, 序号4 7 一 6 8 号 为I Q 组, 序号6 9 一 8 9 号为N组, 序号9 0 一 1 1 0 号为V 组 。 三、 模型制作 所有实验动物按照不同组别施以不
19、同脑缺血模型 制作方法, 均于术前禁食1 2 h , 禁水4 h 。术中用1 0 % 水合氯醛3 m g / k g 体质量( 由福建医大附属第一医院 购进) 腹腔注射麻醉, 仰卧位固定, 颈前去毛, 常规消 毒, 颈正中切口, 术后均用1 -0号线依次缝合颈部肌肉 和皮肤, 观察其生命体征平稳后送回有通风条件的饲 养 室 饲 养、 观 察 并 分 别于 术 后1 5 d , 3 0 d , 6 0 d , 9 0 d 4 个 时相点进行 M o r ri s 水迷宫检测。 I 组: 双侧颈总动脉永久性结扎( 2 - V O ) z 7 , 分离 双侧颈总动脉并予以双重丝线永久性结扎。II 组
20、: 双 侧 椎动脉电 凝合并双 侧颈总 动脉 反复 夹闭( 4 - V O ) 1 3 1 , 游离双侧颈总动脉, 穿线备用, 然后小心分离颈前肌 群, 尽量暴露出第2 一 3 颈椎横突, 并观察到椎动脉从 中穿行, 然后在肉眼直视下用细电凝针直接探入横突 间隙灼断椎动脉。 缝合切口, 送回饲养。 2 4 h 后, 打开 原切口, 用微动脉夹行双侧颈总动脉反复夹闭, 双侧同 时夹闭5 m i n , 松开3 0 m i n , 重复3 次。I Q 组: 双侧颈总 动脉反复夹闭 合 并腹腔注射硝 普钠致全身低血压川, 硝普钠粉剂( 由福建医大附属第一医院购进) 用无菌 蒸馏水溶解后按2 . 5
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