丙烯腈对大鼠睾丸抗氧化酶活力和脂质过氧化水平的影响.pdf
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1、中华劳动卫生职业病杂志2 0 0 5 年4 月第2 3 卷第2 期C h i n J I n d H y a O c c u p D ie , A p ri l 2 0 0 5 , V o l . 2 3 , N o . 2 论 著 丙烯睛对大鼠翠丸抗氧化酶活力 和脂质过氧化水平的影响 黄简抒钟先玖吴鑫金泰滨 摘要】 目的探讨丙烯睛( A C N ) 的雄性生殖毒性机制。方法健康雄性 S D大鼠分别以0 , 7 . 5 , 1 5 . 0 , 3 0 . 0 rn g / k g 剂量腹腔注射A C N 染毒, 测定其辜丸谷肤甘肤( G S H ) 、 丙二醛( M D A ) 含量和超氧 化
2、物歧化酶( S O D ) 、 谷胧甘肤过氧化物酶( G S H - P x ) 、 谷脱甘肤S - 转移酶( G S T ) 活力。 结果A C N染毒4 周后, 1 5 . 0 , 3 0 . 0 m g / k g 组大鼠 肇丸G S H 含量 ( 7 . 4 4 t 0 . 9 6 ) , ( 6 . 9 5 t 0 . 7 7 ) m g / g p r o 增加, 3 0 . 0 m g / k g 组大鼠G S H - P x 活力【 ( 7 0 . 8 9 :t 4 . 0 1 ) U / m g p r o 升高, 与对照组的差异均有统计学意义( P 9 9 . 9 %) ,
3、 北京福星化工厂生产。 2 . 染毒方法: 实验动物随机分成 4 组, 每组 2 7 只, 饲养在清洁级动物房中( 温度2 0一 2 2, 湿 度5 0 %- 7 0 %) , 自由进食和饮水, 每周称体重1 次。 A M 每次染毒前用生理盐水新鲜配制, 分别以 0 , 7 . 5 , 1 5 . 0 , 3 0 . 0 ( 1 / 3 L D 50 ) m g / k g 剂量腹腔注射染毒, 每只动物注射体积1 m l / k g , 每天1 次, 每周5 次, 连 续染毒 1 3 周。停止染毒后继续饲养2 周, 分别于染 毒第4 , 8 , 1 3 , 1 5 周末分批处死动物。 3 .
4、样品前处理及指标测定: 动物处死后取辜 丸, 用预冷的 P B S制备质量分数为 1 0 %的匀浆, 3 0 0 0 r / m i n 离心, 取上清, T B A法测定 M D A , 黄嗓吟 氧化酶法测 S O D , 二硫代二硝基苯甲酸法测定 G S H ; 1 0 0 0 0 r / m i n 离心, 取上清液, 二硫代二硝基苯甲酸 法测定G S H - P x , 比色法测定 G S T , L o w ry法测定蛋白 含量。各指标单位分别为: M D A ; n m o l / m g p ro , G S H : m g / g p ro, S O D : N U / m g
5、 p ro, G S H - P x : U / m g p ro, G S T : U / m g p ro. 4 . 统计学处理: 使用 S P S S 9 . 0 统计软件包, 资料 先经正态性分析, 然后经方差分析和D u n n e t t 检验。 3 . A C N染毒8 周后各组大鼠肇丸氧化和抗氧化 指标的变化: A C N染毒8 周后, 随剂量增加, 大鼠辜 丸S O D活力明显升高; M D A与对照组无明显差异; 各剂量组G S H含量均开始下降, 3 0 . 0 m g / k g 组下降 的程度与对照组的差异有统计学意义( P 0 . 0 1 ) , 各剂量组 G S
6、H - P x , G S T活力无明显差异( 表 1 ) 0 mg / k g - - a- 1 5 . 0 mg / k g 5 mg / k g一 X - 3 0 . 0 mg / k g 岁|从述 500450400350300250200150 汉阁长 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 染毒时间 ( 周) 图1 丙烯睛染毒大鼠休重增长趋势 4 . A C N染毒 1 3 周后大鼠肇丸氧化和抗氧化 指标的变化: 表 1 可见, A C N染毒 1 3 周后, 大鼠辜丸 G S H水平下降比对照组更明显; 各染毒组大鼠皋丸 G S H - P
7、 x 活力比 对照组明显降低; 3 0 . 0 m g / k g 组大鼠 肇丸G S T 活力明显降低; 1 5 . 0 , 3 0 . 0 m g / k g 组大鼠辜 丸M D A含量升高; S O D活力各组间无明显差异。 5 . A C N 染毒停止后2 周大鼠肇丸氧化和抗氧化 指标的变化: 表 1 可见, 停止染毒后 2 周, 大鼠皋丸 G S H水平恢复; 3 0 . 0 m g / k g 组大鼠皋丸M D A含量下 降, 但仍高于对照组, G S H - P x 活力仍低于对照组, 差 异均有统计学意义( P 0 . 0 5 ) . 讨论 结果 1 . A C N亚慢性染毒大
8、鼠体重及健康情况: 图 1 可见, 3 0 . 0 m g / k g 组大鼠体重增长较其他各组缓慢, 染毒8 周后差异有统计学意义( P 0 . 0 5 ) ; 1 2 周末, 染毒后不久大鼠出现呼吸急促、 出汗, 继而嗜睡、 精 神萎靡等症状, 约0 . 5 h 后症状完全消失。染毒 1 3 周后, 1 5 . 0 m g / k g 组大鼠也有部分动物出现了类似 症状。 2 . A C N 染毒4 周后各组大鼠辜丸氧化和抗氧化 指标的变化: 表 1 可见, A C N染毒4 周后, 大鼠皋丸 G S H 水平升高, 1 5 . 0 , 3 0 . 0 m g / k g 组高于对照组;
9、3 0 . 0 m 岁k g 组大鼠G S H - P x 活力高于对照组。其他 指标未见明显改变。 脂质过氧化反应学说已成为中毒机制的重要理 论之一 s ) 。本研究通过检测雄性大鼠A C N亚慢性 染毒对其皋丸抗氧化酶活力及脂质过氧化产物形成 的影响, 探讨 A C N的雄性生殖毒性机制。 与G S H缀合作用是 A C N及其代谢产物 2 - C E O 在体内的主要解毒和排出途径之一。G S H作为抗氧 化剂, 与各种内源性和外源性产生的自由基缀合而 解 毒。 J i a n g 等 报道, 用A C N 体外染毒的 方 法, 使 大鼠体内G S H耗尽, 结果导致氧化损伤增强。本研
10、究结果表明, A C N染毒4 周后, 剂量)1 5 . 0 m g / k g 时, 大鼠皋丸组织G S H水平明显高于对照组; 染毒8 周后, 3 0 . 0 m g / k g 组G S H水平明显降低; 染毒1 3 周 后, 1 5 . 0 m g / k g 组G S H也明显降低。肇丸G S H水平 中华劳动卫生职业病杂志2 0 0 5 年4 月第 2 3 卷第2 期C h i n J I n d H v “ O c c u u D i s , A u ri l 2 0 0 5 , V o l . 2 3 , N o . 2 表 1 丙烯睛( A C N ) 染毒不同时间大鼠翠丸氧
11、化和抗氧化指标的变化( 无 士: ) 时间 AC N ( m g / k g ) 鼠数 MDA ( n m o l / m g p ro ) S O D ( N U / m g p ro ) GS H ( m g / g P ro ) GS H- P x ( U / m g p ro ) GS T ( U / m g p ro ) 染毒4 周后071. 8 5士8. 7 65. 5 8士0. 71 8 3. 2 6土 1 0. 0 46. 2 3 t 1. 0 2 4 4. 4 2 t 1 0. 3 4 5 9. 3 8 t 1 4. 1 3 1 0. 9 5 t 0. 7 2 1 1 . 7
12、 9土2. 1 5 心.卫钾.卫 R0 7 0. 6 8: t 1 5. 2 47 . 4 4士0 . 9 6 6 . 9 5士0 . 7 7 5. 1 4 t 1 . 0 7 5. 8 1士0. 8 8 3. 9 7t 1 . 3 0 2 . 5 0 t 0 . 9 4 “ 5 7. 3 6士 7. 7 0. 8 9士4. 1 0 . 7 6 t 2 . 0 1 9 . 2 1 t 2 . 印 72952797-88肠 8 2 1 4 . 2 4士3. 21 . 6 7 t 1 3. 0 1 . 7 9士 7. 7 8 . 8 8 t 1 0. 5 9 1 1. 4 0士 1. 1 3. 0
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