丹酚酸B和高氧液对兔肢体缺血再灌注损伤代谢酶的影响.pdf
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1、塑壶处壁堂盘查垫! ! 堡! 旦箜! ! 鲞箜! 塑望兰堕垒型! Q 堕墨塑垒生Q 墅曼垒垦垦! ! ! ! :垫! Q :! ! ! :! ! :塑! :! 1 论著 丹酚酸B 和高氧液对兔肢体缺血再灌注损伤代谢酶的影响 涂泽松陈志维李选群 广东佛山市中医院骨科佛山 5 2 8 0 0 0 【摘要】目的探讨高氧液和丹酚酸B 对肢体缺血再灌注损伤的影响。方法选用健康新西兰家兔2 4 只,随机分为4 组,在缺血前从耳缘静脉推注等量的生理盐水( A 组) 、高氧液( B 组) 、丹酚酸B ( c 组) 或高氧液加丹酚酸B ( D 组) 。夹阻股动 静脉,建立肢体缺血再灌注损伤模型,在缺血前和再灌注
2、4 h 抽血检测L D H 、C K 。取腓肠肌作L D H 酶组织化学染色。结果再 灌注4 h 。血清肌酸激酶活性较前明显升高,高氧液和丹酚酸B 可以抑制其升高( P 0 0 1 ) 。两者有协同作用( P = 0 0 5 ) ;血清 乳酸脱氢酶活性较前明显升高,高氧液和丹酚酸B 可以抑制其升高( P 0 0 1 ) ,两者有协同作用( P 0 0 1 ) 。L D H 酶组织化 学显色见:相对于对照组其他组组织织L D H 酶活性较低,以联合用药组最低。结论 高氧液和丹酚酸B 对缺血再灌注损伤起 预防作用,而且两者有协同作用。 【关键词】高氧液;丹酚酸B ;缺血再灌注损伤 【中图分类号】
3、R 一3 3 【文献标识码】 A 【文章编号】1 0 0 7 8 9 9 1 ( 2 0 1 0 ) 0 4 0 0 0 1 0 3 I n v e s t i g a t et h ee f f e c t so fS a i v i a n o l ia c i dBa n dh y p e r o x i cs o l u t i o no ne x p e r i m e n t a ll s c h e m i ar e p e r f u s i o ni n j u r yo fe x t r e m i t y T uZ e s o n g ,C h e n gZ h i w
4、e i ,L iZ h i w e i D e p a r t m e n to fO r t h o p a d i c s ,G u a n g d o n gF u s h a nt r a d i t i o n a lh o s p i t a l , F u s h a n5 2 8 0 0 0C h i n a 【A b s t r a c t 】0 b j e c t i v eA i mt oi n v e s t i g a t et h ee f f e c t so fS a l v i a n o l ia c i dBa n dh y p e r o x i cs
5、o l u t i o no ne x p e r i m e n t a lI s e h e m i ar e p e r f u s i o ni n j u r yo fe x t r e m i t y M e t h o d st w e n t y f o u rh e a l t h yN e wZ e a l a n dr a b b i t sw e r ed i v i d e di n t of o u rg r o u p sr a n d o m l y E q u i v a l e n t0 9 N a c l ( Ag r o u p ) ,h y p e r
6、 o x i cs o l u t i o n ( B ) ,S a l v i a n o l ia c i dB ( C ) ,S a l v i a n o l ia c i dBa n dh y p e r o x i cs o l u t i o n ( D ) w e r ei n j e c t e dt h r o u g he a r e d g ev e i nb e f o r ei s c h e m i a T h ef e m o r a la r t e r ya n dv e i nW a Sb l o c k e da n ds e tu pt h em o
7、d e lo fi s c h e m i ar e p e d u s i o ni n j u r yo fe x t r e m i t y B e f o r ei s c h e m i aa n da f t e r4h o u r s r e p e r f u s i o n ,t h eb l o o ds a m p l e sw e r et a k e nt om e a s u r et h el e v e l so fb l o o dC r e a t i n eK i n a s e ( C K ) ,L a c t a eD e h y d r o g e
8、n a s e ( L D H ) T h eG a s t r o c n e m i u sm u s c l e sw e r eo b s e r v e db yt e s to fL D Hh i s t o c h e m i c a ls t a i n i n g R e s u l t ss e n l mE n z y - m a t i ca c t i v i t yo fc r e a t i n ek i n a s e ( C K ) r a i s eo b v i o u s l y S a l v i a n o l ia c i dBa n dh y p
9、 e r o x i cs o l u t i o nc a np r e v e n tt h er a i s eo fi t ( P 0 0 1 ) T h e yp r e s e n ti n t e r a c t i o n ( P = 0 0 5 ) S e r u me n z y m a t i ca c t i v i t yo fl a e t a ed e h y d r o g e n a s e ( L D H ) r a i s eo b v i o u s l y S a l v i a n o l ia c i dB a n dh y p e r o x i
10、 cs o l u t i o nc a np r e v e n tt h er a i s eo fi t ( P 0 0 1 ) T h e yp r e s e n ti n t e r a c t i o n ( P 0 。0 1 ) T h et e s to fL D Hh i s t o c h e m i c a ls t a i n i n g s h o wt h at h eo t h e rg r o u p sa r el o w e rt h a nt h ec o n t r o lg r o u pa te n z y m a t i ca c t i v i
11、 t y T h eDg r o u pi st h el o w e s to ft h e m C o n c l u s i o nS a l v i - a n o l ia c i dBa n dh y p e r o x i cs o l u t i o nc a np r e v e n tt h el i p i dp e r o x i d a t i o ni ni s c h e m i ar e p e r f u s i o ni n j u r y T h e yp r e s e n ti n t e r a c t i o n 【K e yw o r d s 】
12、H y p e r o x i cs o l u t i o n ;S a l v i a n o l ia c i dB ;I s c h e m i aR e p e r f u s i o nI n j u r y 再灌注损伤是指组织器官在缺血一段时间后恢复血液灌 流,缺血组织的损伤不仅没有减轻,反而有所加重。肢体再灌注 损伤在骨科临床上甚为常见,如肢体手术中止血带超时应用、断 肢( 指) 再植、栓塞后的再通等。丹酚酸B 是丹参的水溶性主要 成分,既往试验研究表明其有保护心肌和脊髓再灌注损伤的作 用,但其对肢体再灌注损伤的作用不明:静脉供氧是把氧疗和静 脉输液相结合的一种全新的给氧治疗方
13、法,对各种缺血缺氧性 疾病的治疗,均取得一定疗效,所以本研究旨在探讨联合丹酚酸 B 和高氧液对兔肢体再灌注损伤过程中代谢酶的影响。 1 材料与方法 1 1 动物及分组选取新西兰家兔2 4 只,用随机数字表 基金项目:佛山市科技攻关项目( 2 0 0 7 0 8 0 6 5 ) 法将家兔随机分为A 组( 对照组) 、B 组( 高氧液组) 、c 组 ( 丹酚酸B 组) 、D 组( 高氧液和丹酚酸B 联合组) ,各组6 只。 1 2 主要试剂丹参单体丹酚酸B 购自上海沪云医药开发 公司;烟酰胺腺嘌呤双核苷酸、氯化硝基四氮唑蓝、P B S 缓冲 液、乳酸钠均购自S i g m a 公司;L D H 和
14、C K 液体试剂盒购自德 赛诊断系统有限公司。 1 3 高氧液制备应用西安高氧医疗设备有限公司研制的 高氧医用液体治疗仪制备高氧液。严格按照无菌操作规程进 行,基液选择2 5 0 m L0 9 氯化钠,氧气流量3 L m i n ,溶氧 2 0 r a i n ,使液体氧分压迅速上升至8 0 1 2 0 k P a ,所有液体于实 验当日进行充氧。 万方数据 2 塑直丛型堂盘查! ! ! Q 堡! 旦蔓! ! 鲞笙! 塑坚曼型垒塑! Q 堕垦盟垒生Q ! ! 型曼堡兰墨兰! ! :! Q ! ! :! ! ! :! ! :型! :1 1 4 动物的处理 于缺血前半小时一次将2 0 m L k
15、g 的0 9 氯化钠( A 组) ,2 0 m L k g 高氧液( B 组) ,溶有1 0 r a g k g 丹酚酸 的2 0 m L k g 的0 9 氯化钠( c 组) ,溶有1 0 m g k g 丹酚酸B 的2 0 m L k g 高氧液( 组) 从耳缘静脉推注入血,2 0 r a i n 匀速泵 完。 1 5 缺血再灌注模型制作模型按照W a n g 的方法,试 验前兔禁食1 2 h ,让其自由饮水,用2 戊巴比妥钠( 首次 4 0 r a g k g 。维持量2 0 k g k g 一2 h 1 ) 耳缘静脉注射麻醉后,将 家兔仰卧位固定,颈部去毛,常规消毒,行颈外动脉插管,抽
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