【SN商检标准大全】SNT 2154-2008 进出口食品中凝固酶阳性葡萄球菌检测方法 兔血浆纤维蛋白原琼脂培养基技术.pdf
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1、书书书 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖犜 进出口食品中凝固酶阳性葡萄球菌 检测方法 兔血浆纤维蛋白原琼脂培养基技术 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犮 狅 犪 犵 狌 犾 犪 狊 犲 狆 狅 狊 犻 狋 犻 狏 犲狊 狋 犪 狆 犺 狔 犾 狅 犮 狅 犮 犮 犻 犻 狀犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 犳 狅 狅 犱 犜 犲 犮 犺 狀 犻 狇 狌 犲狌 狊 犻 狀 犵狉 犪 犫 犫 犻 狋狆 犾 犪 狊 犿 犪犳 犻 犫 狉 犻 狀 狅 犵 犲 狀犪 犵 犪 狉犿 犲 犱 犻 狌 犿 发布 实施 中华人民共和国 国家质量监督检
2、验检疫总局 发 布 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 书书书 前 言 本标准中直接平板计数法参照了 食品和动物饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的检测 方法 第部分: 兔血浆纤维蛋白原琼脂培养基技术 狊 狋 犪 狆 犺 狔 犾 狅 犮 狅 犮 犮 犻(狊 狋 犪 狆 犺 狔 犾 狅 犮 狅 犮 犮 狌 狊 犪 狌 狉 犲 狌 狊 ) : , 法参照了 食品和动物饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的检测方法 第部分: 检测技术 ( )
3、: 。 本标准的附录和附录均为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位: 中国检验检疫科学研究院、 中华人民共和国山西出入境检验检疫局。 本标准主要起草人: 赵贵明、 刘沛、 李卫华。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 进出口食品中凝固酶阳性葡萄球菌 检测方法 兔血浆纤维蛋白原琼脂培养基技术 范围 本标准规定了进出口食品中凝固
4、酶阳性葡萄球菌的检测方法。 本标准中直接平板计数法适用于食品中凝固酶阳性葡萄球菌的计数, 法适用于凝固酶阳性 葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食品。动物饲料等其他食品可参照执行。 设备和材料 灭菌设备: 高压蒸汽灭菌锅和干热灭菌箱。 水浴箱: 。 培养箱: 。 吸管: 和 , 分刻度分别为 和 。 接种环: 直径。 天平: 量程 , 灵敏度 。 灭菌样品处理器具: 取样勺, 剪刀, 开罐器等。 样品稀释瓶: 、 。 无菌培养皿: 直径 。 均质器。 无菌试管。 酒精灯或煤气灯。 计。 金黄色葡萄球菌( 凝固酶阳性) 标准质控菌株: 或其他来源的经验证合格的菌株。 培养基和试剂 兔血浆纤维蛋白原
5、( ) 琼脂培养基( 见附录第 章) 。 改良 肉汤( , 见附录 第 章) 。 水琼脂( 见附录 第 章) 。 蛋白胨氯化钠溶液( 见附录 第 章) 。 第一法 直接平板计数法 检验程序 检验程序见图。 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 图 凝固酶阳性葡萄球菌直接平板计数法检验程序 操作步骤 样品的制备 样品的整个制备过程均应遵循无菌操作程序。 冷冻样品检验前可在条件下解冻, 时间不超过 , 也可在温度
6、不超过 的条件 解冻, 时间不超过 。 液体样品应先将其充分摇匀。 样品匀液的制备 固体和半固体食品: 以无菌操作称取 样品, 于盛有 蛋白胨氯化钠溶液的无菌均质 杯内, 于 均质 , 制成 样品匀液; 或于装有 蛋白 胨氯化钠溶液的无菌均质袋中, 用拍击式均质器拍打 制成 的样品匀液。 液体样品: 以无菌吸管吸取样品 放入装有 蛋白胨氯化钠溶液的无菌玻璃瓶( 瓶 内预置适当数量的无菌玻璃珠) 中, 充分振摇, 制成 的样品匀液。 用 无菌吸管或微量移液器吸取 样品匀液 , 沿管壁缓慢注于装有 稀 释液的无菌三角瓶中, 振摇均匀或换用支无菌吸管反复吹打使其混合均匀, 制成 的样品匀液。 如需进
7、一步稀释, 按上述顺序操作。 接种及培养 根据对样品污染情况的估计, 选择个连续稀释度的样品匀液( 液体样品可包括原液) , 分别在 做 倍递增稀释的同时, 吸取 样品匀液于无菌平皿内, 每个稀释度做两个平皿。 样品匀液移入平皿后, 应及时将凉至 左右的 琼脂培养基( 可放置于 恒温 水浴箱中保温) 注入平皿约 , 并转动平皿使混合均匀。同时将 琼脂培养基倾入加 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载 有 空白
8、稀释液的无菌平皿内作对照。 待琼脂凝固后, 翻转平板, 置 培养箱, 培养 。 典型菌落计数 凝固酶阳性葡萄球菌在 琼脂培养基平板上形成黑色、 灰色或白色的小菌落, 外围有沉淀晕环。 注:菌落色泽与葡萄球菌还原亚碲酸钾的能力相关, 大部分金黄色葡萄球菌形成黑色或灰色菌落, 其他不还原亚碲 酸钾的葡萄球菌则为白色菌落。凝固酶阳性的葡萄球菌产生的凝固酶将纤维蛋白原分解为不溶性纤维蛋白, 使菌落外围出现沉淀晕环。 选择菌落数在 之间的平板, 挑典型菌落计数( 见 描述) , 按平均典型菌落数乘以 稀释倍数计算。 若有两个连续稀释度在适宜计数范围内时, 按式( ) 计算: 犖 犆 ( 狀 狀 ) 犱
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