一氧化氮缺乏鼠肾损害以及氟伐他汀保护作用.pdf
《一氧化氮缺乏鼠肾损害以及氟伐他汀保护作用.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《一氧化氮缺乏鼠肾损害以及氟伐他汀保护作用.pdf(4页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、岭南心血管病杂志2 0 0 5 年4 月第1 1 卷第2 期 1 3 3 基础研究 一氧化氮缺乏鼠肾损害以及氟伐他汀保护作用 徐宁 , 程晓曙2 杨人强2 院第二附属医院心内科, 南昌 ( 佛山市第二人民医院心内 科, 广东 佛山5 2 8 0 0 0 ; 江西医学 3 3 0 0 0 6 ) 摘要: 目的 观察一氧化氮( n i t r i c o x i d e , N O ) 缺乏性大鼠肾 脏损害的 机制以 及氟伐他汀的保护作用。方 法 雄性S D大鼠4 0 只, 随机分成对照组和处理组。 对照组1 6 只大鼠自由 进食及饮水; 处理组2 4 只大鼠 加用左旋硝基精氨酸甲 醋 N ( o
2、 m e g a ) - n i t r o - L - a r g i n i n e m e t h y l e s t e r , L - N A M E 5 0 m g - k g -, - d - . 4 周后两组各 取8 只 大鼠 处死。 处理组1 6 只 大鼠 再随 机分为: TL 组: 给予L - N A M E 5 0 m g - k g - d - ; L + S 组: 给予L - N A M E 5 0 m g - k g - - d - 和氟 伐他汀5 m g - k g - - d - o 1 2 周后处 死所 有大鼠 。 量血压, 测定尿微白 蛋白 含量、 血 脂、
3、 血及肾皮质N O和血管紧张素11 ( a n g i n o te n s i n - It , A n g II ) 的水平; 取肾皮质做病理检测; 测定肾皮质转 化生长因子(3 , ( t r a n s f o r m i n g g r o w t h f a c t o r (3 , , T G F - (3 , ) 的含量。结果 给予L - N A M E 2 周后血压开始持续升 高, 1 2 周时, L 组与对照组相比, 尿微量白蛋白明显升高( P 0 .0 0 1 ) 0 4 周后给予氟伐他汀对尿微量白 蛋白 降 低 ( P 0 ,0 5 ) 。 与对照组相比, L 组大鼠
4、血及肾 皮质N O 水平降 低( P 0 . 0 0 1 ) ; A n g II 水平升高( P 0 . 0 0 1 ) 0 与L 组相比, L + S 组大鼠血和肾皮质N O 水平均增高( P 0 .0 0 1 ) ; 肾皮质中A n g II 浓度降低 ( P 0 .0 5 ) 。病 理检测L 组大鼠的肾小球硬化。 L 组大鼠肾皮质中T G F - P , 表达升高. 氟伐他汀可减轻上述损害。 结论 高 血压肾 脏损害主要表现为肾小球硬化, 与血及肾 皮质N O 水平降低, A n g II 水平升高相关, T G F - (3 , 在肾小球 硬化中起重要作用, 氟伐他汀能减轻上述损害。
5、 关键词: 左旋硝基精氨酸甲醋; 肾损害; 高血压; 转化生长因子0 1 ; 氟伐他汀; 一氧化氮 中图分类号: R - 3 3 2 , Q 4 9 1 . 1文献标识码: A文章编号: 1 0 0 7 - 9 6 8 8 ( 2 0 0 5 ) 0 2 - 0 1 3 2 - 0 5 P a t h o g e n e s i s o f r e n a l i n j u r y i n n i t r i c o x i d e d e f i c i e n t r a t a n d t h e r e n o p r o t e c t i v e e f f e c t s o
6、f f l u v a s t a t i n X u N i n g , C h e n g X i a o s h u , Y a n g R e n q i a n 扩 D e p a rt m e n t o f C a r d i o l o g y , F o s h a n 2 “ s H o s p i t o l , F o s h a n G u a n g d o n g 5 2 8 0 0 0 , C h i n a ; 2 D e p a rt m e n t o f C a r d i o l o g y , 2 “ a H o s p i t o l o f J
7、i a n g x i M e d i c a l C o l l e g e , N a n c h a n g J i a n g x i 3 3 0 0 0 6 , C h i n a A b s t r a c t ; O b j e c ti v e s T o i n v e s t i g a t e t h e r e n o p r o t e c t i v e e ff e c t s a n d t h e p o s s i b l e m e c h a n i s m o f fl u v a s t i n t o a m e l i o r a t e r e
8、 n a l i n j u r y i n n i t r i c o x i d e ( N O ) d i f e c i e n t r a t s w i t h r e n a l l e s i o n s . Me t h e d s 4 0 S D r a t s w e r e d i v i d e d i n t o t w o g r o u p s r a n d o m l y ; C o n t r o l g r o u p , ( 0 g r o u p , n = 1 6 ) t a p w a t e r ; L g r o u p , ( n = 2
9、4 ) N ( o m e g a ) - n i t r o - L - a r g i n i n e m e t h y l e s t e r ( L - N A M E ) 5 0 m g / k g .d - . A f te r 4 w e e k s , 8 r a t s f r o m e a c h o f 2 g r o u p s w e r e s a c r if i c e d . S in c e t h e 5 t h w e e k , t h e r a t s o f L g r o u p w e r e d i v i d e d i n t o
10、2 g r o u p s o f 8 r a t s e a c h ; L g r o u p , L G N A M E 5 0 m g - k g - .d - ; L + S g ro u p , L - N A M E 5 0 m g - k g .d - + F l u v a s t a ti n 5 m g - k g .d - .S y s t o l i c b l o o d p r e s s u r e a n d u r i n a r y a l b u m i n ( U A l b ) w e r e m e a s u r e d . R a t s w
11、e r e s a c r if i c e d a f t e r a n o t h e r 8 w e e k s . T h e l e v e l o f s e r u m l i p i d , p l a s m a a n d r e n a l t i s s u e N O , A n g 1 1 w e r e m e a s u r e d . K i d n e y h i s t o p a t h o l o g i c a b n o r m a l i t y w e r e e x a m i n e d . T h e l e v e l o f t r
12、 a n s f o r m i n g g ro w t h f a c t o r 日 : ( T G F - p , ) w a s m e a s u r e d w i t h W e s t e r n b l o t ti n g . R e s u l t s B l o o d p r e s s u r e b e g a n t o c l i m b u p s i n c e t h e s e c o n d w e e k i n L g ro u p a n d a c h e i v e d t h e h i g h e s t p o i n t a t
13、w e e k 1 2 . U a l b o f L g r o u p , c o m p a r e d w i t h 0 g ro u p , i n c r e a s e d a n d a c h e i v e d t h e p e a k a t w e e k 1 2 ( P 0 . 0 0 1 ) .G l o m e r u l o s c l e r o s i s f i b r o s i s w a s d e v e l o p e d i n L g ro u p . T h e l e v e l o f p l a s m a a n d r e n
14、 a l t i s s u e N O w a s d e c r e a s e d a n d t h e l e v e l s o f p l a s m a a n d r e n a l t is s u e A n g 1 1 w e r e i n c r e a s e d i n L g ro u p , t o o . T G F - p : i n r e n a l c o r t ic a l w e r e o v e r - e x p r e s s e d a t t h e s a m e t i m e . U a l b d e c r e a s
15、e d s t a b l e l y s i n c e t h e 5 w e e k i n L + S g ro u p , c o m p a r e d w i t h L g r o u p . W h i l e i n c r e a s i n g t h e l e v e l o f N O i n p l a s m a a n d c o r t i c a l , fl u v a s t a t i n d e c r e a s e d t h e l e v e l o f A n g 1 1 i n p l a s m a a n d c o r t i
16、c a l s ig n if i c a n tl y . T h e e x p r e s s io n o f T G F - 13 , i n r e n a l c o r t ic a l w a s d e p r e s s e d r e m a r k a b l e b l y i n L + S g r o u p . C o n c l u s i o n s F l u v a s t a t i n c a n r e l i e v e t h e r e n a l i m p a i r m e n t b y a m e l io r a t i n g
17、 t h e g l o m e r u l o s c l e r o s i s . T h e m e c h a n i s m o f t h e r e n o p r o t e c t i o n i s i n v o l v e d i n t h e i n c r e a s e o f N O l e v e l , t h e d e c r e a s e o f A n g I I b o t h i n p l a s m a a n d r e n a l c o rt i c a l a n d t h e i n h i b i t i o n o f
18、t h e o v e r - e x p r e s s i o n o f T G F - (3 1 i n t h e 收稿日 期: 2 0 0 5 - 4 - 1 5 基 金项目: 国家自 然科学基金项目 ( N o . 3 0 2 6 0 0 3 7 ) 作者简介: 徐 宁( 1 9 7 1 - ) , 男, 硕士, 主治医师, 2 0 0 4 年毕业于江西医 学院。 研究方向: 高血 压肾 病。电 话: 1 3 0 1 8 5 3 4 7 8 7 ; E - m a i l : s u n i n g 2 1 0 8 9 1 6 3 . o m . 1 3 4 r e n a l
19、c o r t i c a l . K e y Wo r d s ; N ( o m e g a ) - n i t ro - a r g i n i n e m e t h y l e s t e r ( L - N A M E ) ; R e n a l i n j u r y ; H y p e rt e n s i o n ; T r a n s f o r m i n g g ro w t h f a c t o r 日 : ( T G F - 日) ; F l u v a s t a t i n ; N i t r i c o x i d e 近2 0 年来, 抗高血压治疗显著降低
20、了心脏和 脑血管等靶器官损害, 但高血压导致肾损害的患 者人数却日 渐增多。因此阐明高血压性肾损害的 机制和加强高血压肾损害保护的研究, 具有十分 重要的临床意义。 近年发现3 - 经基一 3 一 甲 基戊二酞辅 酶A还原酶抑制药( H M G - C o A r e d u c t a s e i n h i b i t o r s ) 他汀类( s t a t i n s ) 可通过抑制肾 脏局部的肾 素一 血管紧 张素系统( r e n i n - a n g i n o t e n s i n s y s t e m , R A S ) 而起到 肾脏保护作用川。本课题旨在通过先给予大鼠
21、一 氧化氮( n i t r i c o x i d e , N O ) 合酶抑制剂左旋硝基精 氨酸甲 酚 N ( o m e g a 卜 n i tr o - L - a r g in i n e m e th y l e s te r , L - N A M E ,造成N O缺乏型高血压大鼠肾脏损害 模型, , 然后给 予氟伐 他汀( fl u v a s t a t in ) , 研究氟伐 他汀对该模型肾脏纤维化的保护作用及其机制。 1 材料与方法 1 . 1 动物分组与给药 雄性S D大鼠4 0 只,随机分成2 组: 对照组 S D大鼠1 6 只,自由进食及饮水;治疗组大鼠2 4 只,
22、 给予L - N A M E 5 0 m g - k g - - d - o 4 周后两组各取 8 只大鼠处死。随后, 治疗组 1 6 只大鼠再随机分 为: OL 组大鼠8 只,口 服给 予L - N A M E 5 0 m g - k g - - d - ; L + S 组大鼠8 只, 给予口 服L - N A M E 5 0 m g - k g - 1 “ d - , 和氟伐他汀5 mg-kg-d-,) 1 . 2 血压监测 收缩期血压采用尾袖法测定 2 1 。在大鼠分组 前和喂药后第2 , 4 , 6 , 8 , 1 0 , 1 2 周进行。 1 . 3 尿液收集 采用自 制代谢笼,收集
23、各组大鼠给药后尿液, 尿液收集前动物禁饮和禁食 6 小时。 1 . 4 组织标本采集 满4 周及1 2 周时处死大鼠, 经动脉插管抽出 4 - 5 m l 血液,测定生化指标;肾 脏组织标本用 1 0 %中性福尔马林固定, 染色后观察病理形态改 变。迅速分离肾皮质, 分成数块后置于一 7 0 冰箱 保存, 作细胞因子测定。 1 . 5 生化指标测定 血脂测定和尿微白蛋白采用B e c k m a n自 动生 化分析仪; 血浆和肾皮质标本A n g II ( a n g i n o t e n s i n II)用放射免疫法测定,具体操作按试剂盒说明 书; 血清和肾皮质N O浓度测定用硝酸还原法
24、: 取 5 0 0闪血清或5 0 0闪1 0 % ff 组织匀浆上清液, 加 人1 5 0 时去蛋白 试剂。 取3 0 0 闪去蛋白 血清, 加 人络合剂, 经活化福还原, 与G r i e s s 试剂显色, 在 7 2 1 分光光度计调定波长 5 4 6 n m进行比色读数。 通过标准曲线, 从对照样本吸光度计算样品N O 水平。 1 . 6 组织形态学观察 固定后肾组织用石蜡包块, 4R m连续切片, 脱蜡后进行P A S 三色染色。由病理科两位医师进 行肾小球硬化评分 6 0 1 . 7 转化生长因 子R , 表达 用W e s te rn b l o t ti n g 法, 将经过蛋
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 一氧化氮 缺乏 损害 以及 保护 作用
链接地址:https://www.31doc.com/p-3698520.html