二硫化二砷诱导哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的研究.pdf
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1、现代中西医结合杂志M o d e r nJ o u r n a lo fI n t e g r a t e dT r a d i t i o n a lC h i n e s ea n dW e s t e r nM e d i c i n e2 0 0 9N o v ,1 8 ( 3 1 )3 7 9 7 矗? :i :罅i 。 j ,察谁硪梵毳 二硫化二砷诱导哮喘豚鼠肺泡灌洗液中 嗜酸细胞凋亡的研究 许继德,白洪波,黄志祥 ( 广州医学院,广东广州5 1 0 1 8 2 ) 摘要】目的 观察二硫化二砷( A M 岛) 诱发哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的作 用。方法采用卵白蛋白制备哮喘豚
2、鼠模型并激发哮喘,提取肺泡灌洗液并分离其中的嗜酸 细胞。将嗜酸细胞悬浮生长于含l O 小牛血清的R P M I1 6 4 0 培养液中,嗜酸细胞初始浓度 均为2x1 0 9L 。A 组A s :岛以1 4 0 63m g L 终浓度分别加入细胞培养液中培养3 ,6 ,1 2 , 2 4 ,4 8h 。B 组将A s 2 岛终浓度调整为0 0 4 ,O 0 9 ,0 ,1 8 ,0 3 5 ,0 7 0 ,1 4 l 。2 8 1m g L ,培养6 h 。2 组均以不加A s z S 2 为对照。W r i g h t S 染色、透射电子显微镜观察嗜酸细胞的形态学变 化。流式细胞仪检测观察嗜酸
3、细胞凋亡率。结果 嗜酸细胞与胸S 2 作用6h 后,W r i g h t s 染色、透射电子显微镜均观察到嗜酸细胞出现凋亡的形态学改变。将嗜酸细胞与终浓度为 1 4 0 63m g LA s 2 1 在培养基中分别培养3 ,6 ,1 2 ,2 4 ,4 8h 后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着胸S 2 作用时间 的延长而先升高,于2 4h 达最高,凋亡率为2 7 1 9 ,而后下降。各不同时间组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较均有显 著性差异。将嗜酸细胞与不同终浓度A s 2 是在培养基中分别培养6h 后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着 A s 2 S 2 浓度的增加而升高,各不同浓度组嗜
4、酸细胞凋亡率与对照组比较亦均有显著I 生差异。结论胸S 2 可促进哮喘 豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡,随着A s 2 S 2 作用时间的延长和浓度增加这种作用更明显。 关键词哮喘;二硫化二砷;嗜酸细胞;凋亡;g g 鼠 中图分类号 R 一3 3 2 文献标识码】A 文章编号】1 0 0 8 8 8 4 9 ( 2 0 0 9 ) 3 1 3 7 9 7 0 3 S t u d yo fA s 2 s 2i n d u c i n ga p o p t o s i so fe o s i n o p h i l sf r o mb r o n c h o a l v e o l a rl a v
5、 a g ef l u i di na s t h m a t i cg u i n e ap i g s X uJ i d e ,B a iH o n g b o ,H u a n gZ h i x i a n g ( G u a n g z h o uM e d i c a lC o l l e g e ,G u a n g z h o u51018 2 ,G u a n g d o n g ,C h i n a ) A b s t r a c t :O b j e c t i v eI ti st Oo b s e r v et h ei n d u c i n gf u n c t i
6、 o no fA 眈s 2o nt h ea p o p t o s i so fe o s i n o p h i l sf r o mb r o n c h o a l v e o l a r l a v a g ef l u i di na s t h m a t i cg u i n e ap i g s M e t h o d sT h ea s t h m a t i cg u i n e ap i gm o d e l sw e r ep r e p a r e dw i t ho v a l b u m i na n dt h e e o s i n o p h i l sw
7、e r es e p a r a t e df r o mb r o n c h o a l v e o l a rl a v a g ef l u i d E o s i n o p h i l sw e r ec u l t u r e di nR P M I16 4 0c u l t u r e , s o l u t i o nc o n t a i n i n g1 0 c a l fs e r u m T h ei n c i p i e n tc o n c e n t r a t i o no fe o s i n o p h i l sw a s2X1 0 9L1 蛔S 2w
8、 i t ht h ef i n a lc o n c e n t r a t i o no f 1 4 0 63m g Lw a sa d d e di nt h ec e l lc u l t u r ef l u i df o r3 ,6 ,1 2 ,2 4a n d4 8h o u r si ng r o u pA F i n a lc o n c e n t r a t i o no fA s 2 岛i n g r o u pBw a sa d j u s t e dt O0 0 4 ,0 0 9 ,0 1 8 ,0 3 5 ,0 7 0 ,1 4 1 ,2 8 1m g Lf o
9、r6h o u r s T h o s ew i t h o u tA s 2 s 2w e r ea sc o n t r o lf o rt h et W Og r o u p s T h em o r p h o l o g yo fa p o p t o s i so fe o s i n o p h i l sW a so b s e r v e db yW r i g h t Ss t a i n i n ga n dt r a n s m i s s i o ne l e c t r o nm i c r o s c o p e T h er a t eo fa p o p t
10、o s i so fe o s i n o p h i l sw a sa s s a y e db yt h ef l o wc y t o m e t r y R e s u l t sE o s i n o p h i l sa p o p t o t i cm o r p h o l o g i c a lc h a n g e sw e r eo b s e r v e db yW r i g h t Ss t a i n i n ga n dt r a n s m i s s i o ne l e c t r o nm i c r o s c o p e6h o u r sa f
11、t e ri n t e r a c t i o nb e t w e e n e o s i n o p h i l sa n d 牺S 2 A f t e r1 4 0 63m g L 鹏s 2c u l t u r i n gf o r3 ,6 ,1 2 ,2 4a n d4 8h o u r s ,t h ea p o p t o t i cr a t eo fe o s i n o p h i l s i n c r e a s e dw i t ht h ep r o l o n g a t i o no f 如& i n t e r v e n t i o n ,a n dr e
12、 a c h e dt h ep e a kw i t ht h ea p o p t o t i cr a t eo f2 7 19 ,a n dt h e nd e c r e a s e d T h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e si na p o p t o t i cr a t eb e t w e e nd i f f e r e n tt i m eg r o u p sa n dc o n t r o lg r o u p A f t e r6h o u r s t r e a t m e n to f
13、A S 2 S 2o fd i f f e r e n tf i n a lc o n c e n t r a t i o n ,t h ea p o p t o t i cr a t eo ft h ee o s i n o p h i l si n c r e a s e dw i t hi n c r e a s i n gA s 2 s 2c o n e e n t r a t i o n T h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e si na p o p t o t i er a t eb e t w e e nd
14、 i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o ng r o u p sa n dc o n t r o lg r o u p C o n c l u s i o nA s 2 是c a np r o m o t et h ea p o p t o s i so fe o s i n o p h i l sf r o mb r o n c h o a l v e o l a rl a v a g ef l u i di na s t h m a t i cg u i n e ap i g T h i se f f e e ti sm o r eo b v i o
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