五羟色胺转运体启动子区多态性与焦虑症的关联研究.pdf
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1、中国 行为医学科学2 0 0 6 年1 月第1 5 卷第1 期 C h i n J o f B e h a v i o r a l M e d S c i , J a n u a ry2 凶6 户 鱼 些坚 巡0 . 1 临 床 研 究 五经色胺转运体启动子区多态性 与焦虑症的关联研究 李春波邹政方芳汪栋祥吴文源 摘要】 目 的 探讨焦虑症与五经色胺转运体基因启动子区( 5 - H TTL P R ) 多态性的相关性。方法 运用聚合酶链反应技术检测8 8 例焦虑症患者( 包括4 2 名广泛性焦虑障碍和3 8 名惊恐障碍) 和8 7 名健康 对照者5 - H TTL P R的分布频率。结果 对照
2、组检测到1 例E L / E L 基因型, 未见其他文献报道。患者组启 动子区多态性的超长( E L ) 等位基因频率为1 . 1 %, 对照组为4 . 6 %, 两组间差异有显著性( P 0 . 0 5 ) , 平均年龄差异有显著性( t = 3 . 4 6 , P 1 8 岁, 汉族。排除患遗传性疾病或既 往有遗传性疾病史; 既往有血液病病史或正患有血液 病, 处于全身感染的急性期, 正患有其他严重躯体疾病 等情况。对本次研究均知情同意。 二、 方法 1 . 一般资料收集与临床特征评定: ( 1 ) 一般资料 收集: 使用自 制调查表收集人口学资料、 发病年龄、 病 程、 发病诱因、 病前
3、性格、 家族史等; ( 2 ) 量表评定: 汉 密尔顿抑郁量表( H A M D ) “ 、 汉密尔顿焦虑量表( H A - M A ) X 3 1 、 焦虑状态 / 特质问卷( S T A I ) 1 3 1 、 简化3 6 项医 疗结果研究( M O S S F - 3 6 ) 1 3 1 。 2 . 5 - H TTL P R测定: 按平行对照设计, 对患者和正 常对照均采用P C R - R F L P 等方法进行基因型测定。血 样采集与处理: 所有人组对象采取静脉血约 2 m l , 中国行为医学科学2 0 0 6 年1 月第1 5 卷第1 期C h i n J o f B e h
4、a v io r a l M e d S c i , J a n u 2 0 0 6. V o l 1 5. N o . 1 E D T A 抗凝, 其中1 M I 用于提取D N A , 1 m l 用于分离白 细胞。P C R分析: P C R引物为: 5 - C C G C T C T G A A T G C C A G C A C C T A A C 一 3 ; 5 - G A G G G A C T G A G T T G G A C A A C C A C - 3 . P C R反应体系如下: H 2 O 2 4 p ,1 , 1 0 x b u f f e r 3 w 1 , 1
5、 0 m M d N T P s O . 6 R I , 2 0 p m o U L 两引物各 0 . 5 0, 2 5 m M M g C 1 2 1 . 2 p ,1 , 5 U / w 1 T a q 酶0 . 4 p ,1 , 模板1 闪。P C R反应程序: 9 5 C 3 m i n 预变性, 继以9 5 变性 2 0 s , 6 0 退火 2 0 s , 7 0 延伸 1 m i n , 共 3 5 个循环, 7 2 延伸5 m i n , 4 保存。最后将P C R产物予2 . 3 % 琼脂糖凝胶电 泳( 1 0 x b u ff e r , M g C I 2 ,T a q
6、酶均采用M B I 公 司的试剂) 。 3 . 资料分析: 采用 S P S S 1 0 . 0软件进行数据的统 计 分析。 统计 方 法包括才检 验、 S p e a r m a n s 非参数相 关分析、 H a r d y - W e i n b e r g 吻合度检验、 Z检验等。 结果 表2 焦虑症亚型间5 H TTL P R等位基因 基因型分布比较( 例, %) 等 位 基 因基 因 型 组列倒狱 L L L J t u )口 L口 J澎 J G A D 组 P D 组 1 ( 1 ) 2 ( 1 ) 2 4 ( 2 9 ) 2 2 ( 3 0 ) 5 7 ( 7 0 ) 1 (
7、2 ) 4 ( 1 0 ) 1 6 ( 3 9 ) 5 1 ( 6 9 ) 1 ( 3 ) 3 ( 8 ) 1 6 ( 4 3 ) 2 0 ( 4 9 ) 1 7 ( 4 6 ) 一、 5 - H TTL P R 在 人 群中 的 分 布 5 - H TTL R R基因多态性在两组间的分布, 经 H - W 吻合度检验, 差异无显著性( P 0 . 0 5 ) 。 二、 5 - H TTL P R与焦虑症的关联 焦虑症组与对照组间5 H TTL P R的 E L等位基因 的分布差异有显著性( P 0 . 0 5 ) 。见表1 。 表 1 患者组与对照组间5 H TTL P R等位基因 基因型分
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- 羟色胺 转运 启动 子区 多态性 焦虑 关联 研究
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