人白介素3乳腺表达载体的构建.pdf
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5、 酪蛋白基因A I J KD E % LM H和乳清酸蛋白基因 A N=O D E F P H等) $ 酪蛋白是乳汁中的主要蛋白成分?它的基因调控元件能够指导外源基因在乳腺组织 高水平表达) B 0 3 6 3 (Q等人E F M H对 $酪蛋白基因全部序列的测定结果表明?该基因R 端转录起始位点 前S T TU /是保守序列?在该区内有几个相当高的保守序列?这些序列元件对基因的转录调节非常重 要) V. 3 (WV等人E S T H的研究结果表明?牛 $酪蛋白基因内含子F中A主要是XF T M FU /到XF Y P TU / D ? 含有能够提高基因乳腺组织特异性表达的类似于增强子的调控元
6、件)本研究中构建乳腺表达载体所 用的调控序列?位于牛 $酪蛋白基因ZF ! S % LXF P ! FU /之间?包括了R 端已知的全部调控序列)因 此?应用该调控序列应该能够指导人白介素$ %基因在乳腺组织中高效特异性地表达) 转基因动物的研究结果表明?目的基因采用基因组序列比采用7 K=序列的表达效率高?这是因 为许多基因自身的内含子中存在转录调控元件?对基因的活体表达水平有明显的促进作用E S F H)维持 被表达蛋白从乳腺分泌的信号肽可以是乳汁蛋白基因来源?也可以是被表达基因来源 % 端及其下游 区 包括终止符O 0 端侧翼序列) 目前?制作转基因动物的方法主要有显微注射法;逆转录病毒
7、介导法;精子介导法和体细胞核移 植法等几种?其中最有应用前景的是体细胞核移植法?尤其是对于大的家畜更为有利)本研究中构建 的乳腺表达载体?带有红荧光蛋白A 6 , S D和新霉素抗性A K, 0 4 D两个标记基因?分别由I _启动子 和J Y T启动子调控它们在真核细胞中独立表达)新霉素抗性标记基因用于筛选稳定转染的体细胞) 红荧光蛋白标记基因不仅指示体细胞转染成功?更重要的是在核移植后?直接指示外源基因是否整合 到克隆囊胚细胞的染色体中)用该表达载体稳定转染体外培养的成纤维细胞为核供体?制作克隆囊 胚?再进一步筛选出表达红色荧光蛋白的囊胚进行核移植?从而能够避免制作转基因动物的盲目性? 提
8、高制作转基因动物的效率) 参考文献a b F c 乔贵林?赵君?赖良学?等)牛B # Cd : O =和牛e 6 F酪蛋白d : O =基因在家兔乳腺中的暂时表达b Q c )中国兽医学报? S T T F ? f g A ! D a R M ! LR M G ) b S c O , 4 6 2 5_=?J : 3 3 . h 4 ,_C?O 4 3 : iI ? , : . ? AB C0D E A FCG0HE A FC 0 I JE K $CL F K I M I K I N O P I Q Q L ? A? R J IS L ? E T J L M I U VE A L A J I P
9、 K I U W L A X 1 YL AVL K W? R J P E A Q F I A L TVL T I! “ # $ () * + Z . , - + 0 3 Y Y 8 0 5 7 1 9 : 1 1 =1 2 $ ! _ # HL V “ 0 ? AB C0“ I ? A F 0 I J E K $CL F X K I M I K I N O P I Q Q L ? A? R U VE AK E T J ? R I P P L AL AVL K W? R J P E A Q F I A L TVL T IU Q L A F F I A ? VL TK E T J ? R I P
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- 关 键 词:
- 白介素 乳腺 表达 载体 构建
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