从牛海绵体组织分离纯化磷酸二酯酶5.pdf
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1、书书书 第 !“ 卷第 # 期 $%“ 年 ). 郝顺祖!, 钱 晖!, 王卉放!, 钱宇平!, 黄诒森!, 张均田$ (!%) 摘 要 目的: 纯化磷酸二酯酶 (?A) 用以研究其抑制剂及临床意义。方法: 利用快速蛋白液相层析系统, =-B. 线性梯度分离 ?A。结果: 从牛海绵体组织与牛海绵体血管均得到 # 个蛋白峰, C5265+, 印迹实验证实峰 ! 为 ?A, 其余二峰可能为 ?A$ 和 ?A#。结论: 哺乳类海绵体组织有 :DE? 特异性 ?A 存在, 在海绵体血管尤为丰富。采用 快速蛋白液相系统成功分离 ?A, 方法简便可靠。 关键词 牛海绵体; 磷酸二酯酶 ; :DE?; 分离
2、纯化; 鉴定; 快速蛋白液相层析系统 中图分类号 F G#$ 文献标识码 H 文章编号 !#(%PHDFH, 伟哥) 的重要作用即在于该药品选择性抑 制 ?A, 能阻止海绵体中的 :DE? 的降解, 使细胞 内 :DE? 维持较高水平, 继而使阴茎海绵体血管扩 张, 促使阴茎勃起, 治疗阳痿。因此如能分离提纯 ?A, 就可将 ?A 为作用靶点来筛选壮阳药物。 基金项目江苏省教育厅自然科学基金资助项目 (%!(Q#!%!) 作者简介郝顺祖 (!“I G ) 女, 上海人, 副教授, 从事医学生物化学技术研究。 万方数据 本文介绍快速蛋白液相层析 (!“#$ % 简便可靠, 为进一步研究 478;
3、 的结构和 功能及其抑制剂提供了条件。 C = 主要试剂 磷酸缓冲溶液 (%0#%0“$(1:-!( 22+I 5 871 A?; ;) ; C D 22+I 5 87A?; D 22+I 5 苯脒。缓冲液 E (E-!(I;) , 调 节流速为 M= 478; 抑制实验= 采用 ;, ;, G ;=478; 9(#$(, 主要实验步骤包括“ 将 478 提取液用 F7F1聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (F7F14?B8) 进行电泳分离; #将电泳产物转移到 硝酸纤维膜 (J6) 上; $采用 478; 抗体进行 9(#$(D , GD 2)* 后改 MD , 样品进入分离胶后调电压至 G) ; AE
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- 关 键 词:
- 海绵 组织 分离 纯化 磷酸二酯酶
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