人参皂甙对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的研究.pdf
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1、第 !“ 卷第 ! 期武 汉 科 技 大 学 学 报( 自 然 科 学 版 )#$% 作者简介: 周艳玲 ()?! = ) , 女, 武汉科技大学医学院, 武汉大学医学院, 硕士生B 法原位标记凋亡的心肌细胞, 免疫组化技术和图像分析技 术检测心肌细胞内 C5%D! 蛋白的表达。缺血再灌注组电镜观察发现, 心肌细胞出现典型凋亡结构特征。 72;B 染色结果表明: 用人参皂甙保护后的心肌细胞凋亡指数明显下降 (! E (B 染色。各组实验完毕后, 取上述 部位心肌常规脱水固定, 石蜡包埋、 切片, 从各组 中取 * 张石蜡切片, 每张切片按宝灵曼公司试剂 盒 (Q1 439. O8% J809/
2、 J898593$1 R39, 简称 STJ) 提供 的脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 (72;B) 原位检测凋亡细胞的 JG 碎片。以 SC4 缓冲液代替管 ) (7* 个视野。 以目 镜 作 检 测 微 尺 (“(倍) , 其 方 格 面 积 为 ( ), 简称 /)) 为定量参数, 测定 +9;,.?+: 蛋白的 表达。 !A“统计学处理 各组定量观察结构以!“ B # 表示, 组间比较 用方差分析, 多组间比较用 $ 检验。 .结果 #A!透射电镜观察结果 !组心肌未见异常, 细胞核染色质疏松, 密度 均一, 肌节各带清晰, 线粒体初膜完整, 嵴密集。 “组电镜下可见某些心肌
3、细胞凋亡的超微结构特 征, 以细胞核改变较为明显: 核膜皱缩, 染色质趋 边于核膜下集聚呈斑块状, 核仁消失, 偶见胞核固 缩。以上改变在#, $组中偶见。“组电镜观察 下也可见心肌结构的坏死性改变。肌节缩短呈凝 聚性收缩带, 肌丝溶解, 线粒体肿胀, 膜破裂, 嵴溶 解、 融合或有电子致密颗粒沉积。在#, $组中, 线粒体大部分正常, 偶见部分肿胀, 基质泡化, 如 图 $ 所示。 #$#%,. 在胞浆中成片表 达呈棕色反应, 胞核不染色, 四组 +9;,. 强度不一。 +9;,. 染色质 /) 值,#,$组较!组有明显增高 (% E 4A4$) 。四组的 +9;,. 值统计如表 . 所示。
4、 表 # 四组心肌细胞 +,-.#/0 值的变化 (“! * “) 组别视野数 ?个/) 值 ! 344A$ B 4A4$% “ 344A4D. B 4A4$ # 344A$43 B 4A4$C $ 344A$4“ B 4A44D 注:“组与#组相比 % E 4A4$;“组与$组相比 %#E 4A4$。 !讨论 传统理论认为, 在心肌缺血再灌注损伤过程 中, 氧自由基和细胞内钙超载造成膜结构损伤, 尤 其是线粒体功能障碍导致心肌细胞坏死。本实验 结果显示, 在大鼠缺血 !4,.蛋白的表达较“组明显升高 (% E 4A4$) 。+9;,. 是目前公认的与凋亡有密切关系的 基因 C 。有研究表明,
5、 +9;,. 表达增强时, 细胞凋 DD$.44$ 年第 . 期周艳玲, 等: 人参皂甙对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的研究 万方数据 亡减弱; !“#$% 表达减弱时, 细胞凋亡增强 . ?#.,9 A B,.: (#2 ,;9 DE?F D$ G“., =-9-:9,;, ; ,.G H 3 2 1; I;( Q-.“;C;“ S(.#;L 9C T“#.(? MT= J?(LH.:(:;9 3 2 3 1.# !;9#, /+%, /+: 7+640/2 6 #(:;9 9C R?9L?(HH.G 1.# M.(:N 3 23 1.# !;9#,/+7,/%7 (/, %) : /62 (
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