体外成骨细胞分离培养技术在国内实验骨科中的应用.pdf
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1、 甘肃中医) 2 0 0 3 年第1 6 卷第1 0 期 体外成骨细胞介离培养技术 在国内实脸骨科中的应用 71 9 坤 , 李盛华z , 宋贵杰a ( 1甘肃中医 学院 硕士 研究生, 甘肃 兰州 7 3 0 0 0 0 ; 2甘肃省中 医院, 甘肃兰州 7 3 0 0 5 0 ; 3甘肃中医学院, 甘肃 兰州 7 3 0 0 0 0 ) 关键词: 成骨细 胞培养; 实 验甘科; 综述 中图分类号: R - ”文献标识码:文章编号: 1 0 0 4 - 6 8 5 2 ( 2 0 0 3 ) 1 0 - 0 0 0 7 - 0 4 近几年来,越来越多的学者利用体外成骨细 胞分离培养技术开展实
2、验研究, 取得了 很大的成 绩。 经实验证实, 体外培养的成骨细胞具有与体内 成骨细胞一样的生物特性,能很好地反映成骨细 胞的功能活动特点。这就为采用体外成骨细胞分 离培养技术深入研究骨发生和生长机制、充分认 识其与外界环境间的相互作用提供了理论基础。 现把目 前国内利用体外成骨细胞分离培养技术开 展的基础研究综述如下。 1 体外成骨细胞分离培养的组织来源 体外成骨细胞培养首先要确定提供种子细胞 的 组织, 它一般由 研究者的研究目 的 所决定。 从大 鼠的乳鼠颅顶骨处分离成骨细胞是目前最常采用 的 一种获取成骨细胞的方法1 习 , 也有用小鼠 颅顶 骨的14 ,5 7 。 从兔胫骨前内 侧面
3、骨膜16 .7 1 和兔颅骨中(8 ) 分离成骨细胞进行体外培养也是实验骨科中常用 来获取成骨细胞的方法。除了 从动物骨组织提取 成骨细胞外,有些实验往往需要用到人的成骨细 胞。 于明香网 应用组织移行生长法分离人的成骨 细胞,骨组织取自因股骨颈骨折成年人或老年性 骨关节炎而行全能关节置换术的 病人。 杨林11 0 1 则 从成人松质骨中提取成骨细胞。 李彦林叨从人胚 骨膜获得成骨细胞。成骨细胞也可来自 经诱导分 化的 骨祖细 胞。 陈 兴灿1 21 、 史培良 等131分别从 大白 鼠股骨骨髓和4 周龄兔骨髓分离骨髓基质细胞, 体外培养诱导分化成骨细胞。成骨细胞的分离方 高是脑卒中后早期康复
4、的难点。 综上临床研究报道,针灸治疗脑卒中后肌张 力增高取得了较好的 疗效。但总结十余年来针灸 治疗脑卒中肌张力增高的临床研究资料,许多研 究方法尚存在不足之处, 部分科研设计缺乏严谨 性。 如疗效评定标准不统一, 未采用国际公认的疗 效评定标准; 有的仅限于自 身前后对照, 未与公认 的有确切疗效的治疗方法作对照; 客观的评价指 标较少应用于临床, 使得结果的 可信度下降。因 此, 遵循随机、 双盲、 重复和对照的原则, 规范科研 设计方法, 采用国际通用的疗效标准, 客观评价各 种治法的疗效,才能为提高脑卒中患者的生存质 量提供有效方法。 参考文献 1神经 康复 学 M 人民 军医出 版社
5、, 2 0 0 1 . 3 2 5 2 陈 加俊, 赵树华. 金针促通术治 疗中 风肢体功 能障 碍的临床研究【 J . 现代康复, 2 0 0 0 , 4 ( 7 ) : 9 9 4 3 李佩芳. 针刺拮抗肌群治 疗脑卒中 后肌张力增 高 J . 中 国 康复, 2 0 0 1 , 1 6 ( 1 ) : 4 2 4 章薇, 刘智. 针刺协调肌张 力平衡治疗脑卒中 痉挛性瘫痪6 4 例临床观 察【 7 . 湖南中医 药 导报, 2 0 0 1 , 7 ( 9 ) : 4 6 4 5 胡智慧 , 顾晓园 . 电 针缓解中 风偏瘫痉挛的 疗 效观察l i l . 中国 针灸, 1 9 9 9 ,
6、 1 9 ( 4 ) : 2 0 5 6 郭建新, 汪 润生. 分部针刺治疗中 风偏瘫痉挛 6 8 例临床观察 r 1 . 中国 针灸, 1 9 9 9 , 1 5 ( 5 ) : 7 7 尹明慧 , 吴力勇 . 针灸治 疗脑卒中 肌痉牵“例 临床观察 J . 现代康复, 2 0 0 0 , 4 ( 7 ) : 1 0 9 1 ( 收稿日 期2 0 0 3 - 0 3 - 2 9 ) 万方数据 甘肃中医) 2 0 0 3 年第1 6 卷第1 0 期 法一般都采用酶消化法。 2 体外成骨细胞分离培养在骨组织工程中的应 用 组织工程学( t i s s u e e n g i n e e r i
7、n g ) 是应用细 响生物学和工程学的原理,研究和开发用于修复 和改善人体各种组织和器官损伤后的功能和形态 的一门科学。 如把它同骨科学结合, 就产生了 组织 工程化活性骨、 组织工程化活性软骨等。 它们有类 似于人体骨和软骨的功能,可用于解决外伤、 肿 瘤、骨关节病等各种原因引起的 骨缺损和软骨缺 损。 构建组织工程化活性骨同样应由 功能细胞、 信 号 分子、 基质材料三要素组成, 其中功能细胞就是 成骨细胞, 因为骨的形成是以成骨细胞为中心的。 成骨细胞应符合: ( 1 ) 取材容易 且对机体损伤小; ( 2 ) 增殖能力强, 通过短时间体外培养即可得到 大量细胞; ( 3 ) 有很强的
8、成骨能力, 以 便在植入人 体后能很快形成新骨以完成替代支架材料的目 的; ( 4 ) 组织相容性好, 植入体内后能适应体内环 境,保持良 好的生物学特性且不引起免疫排斥反 应。 目前, 骨组织工程中成骨细胞的分离主要有三 种来源: 骨髓来源、 骨膜来源和松质骨来源。曹军 凯等 1 41 应用同 种异体兔成骨细胞研究组织工程化 人工骨对骨缺损的修复能力, 将经过分离、 培养而 获得的成骨细胞种植到可降 解聚合物 ( P L G A ) 泡 沫材料上, 体外培养 1 周后, 将两者的复合体移植 到兔颅骨缺损区域, 结果颅骨缺损修复明显。 国内 姚 振绪等1 57实验证明 骨 膜分离 培 养的 成
9、骨细 胞在 不同的系统中可转化为不同的组织,种植于皮下 的成骨细胞转化为类骨组织,种植于耳软骨处的 成骨细胞转化为软骨组织,种植于骨缺损处成骨 细胞转化为典型的 骨组织。 史培良 137在探讨以 珊 瑚转化轻基磷灰石( C H A ) 作为骨组织工程支架材 料时,所用的成骨细胞来自 于被诱导的兔骨髓基 质细胞, 并证明该支架材料有广阔的应用前景。 李 裕标11 61 的 成骨细胞与生 物 衍生 材料联合培 养的 实 验证明冻干脱钙骨基质( F D B M ) 同 样可作为构建 组织工程骨的一种良 好支架材料。 由 此看来, 没有 细胞体外分离培养技术就无从谈起骨组织工程学 的建立和发展。 3
10、体外成骨细胞分离培养在探讨骨科用药机制 中的应用 随着老龄人口的增加, 作为老年性疾病之一 的骨质疏松症引起人们极大关注, 寻找疗效确切、 副作用小、作用机理明确的骨质疏松药物也日 益 迫切。 用体外成骨细胞分离培养技术, 观察药物对 成骨细胞的作用, 并定量地表示出其作用的大小. 为抗骨质疏松药的开发提供一种研究手段。邓力 等171 在做雌二醇 和新药X W 3 6 0 促 骨形成能力 实 验 比较时,测定了两种药物对体外培养成熟大鼠头 盖骨成骨细胞增殖能力的影响, 结果显 示雌二醇 无促骨形成作用, 新药X W 3 6 0 有促骨形成能力。 廉 凯 等网实 验证实外 源性降钙 素基因 相关
11、 肤( G R P ) 能够直接作用于成骨细胞并通过促进其增殖而有 利于骨形成。 中药防治骨质疏松症远期疗效明显且以全身 调节为特点, 副作用小, 深受广大患者喜爱, 但中 药防治骨质疏松症的作用机制不明,影响了它的 规模开发和利用。 近几年来, 有人开始运用体外细 胞分离培养技术从细胞水平来观察抗骨质疏松中 药对成骨细胞功能调整作用, 希望利用这一途径 探讨它的作用机制, 而且取得了一些成绩。 杨林等 1 9 7 用不同 浓度L i u - O G N 药物血清培养成 骨细胞, 结果表明中药L i u - O G N 对体外成骨细胞的分化有 明显的促进作用,可以作为促进骨形成的药物使 用。刑
12、国 胜等2 97 采用原代培样的 大鼠 颅骨成骨细 胞钡 ( 定细胞增殖率及骨钙素的含量来研究补肾健 骨汤对成骨细胞增殖分化的影响。 同 样可以 利用体外成骨细胞培养技术来筛选 接骨药或者探讨接骨药的作用机制,如李秋静等 2 u 观察接 骨药对体外 培养成 骨细胞 增殖影 响, 结 果显示接骨药能有效促进成骨细胞的增殖且促进 作 用与 浓度、 时间 呈正 相关。 另外, 朱 建明 等(221观 察了骨折愈合刺激素 ( 金葡液) 对体外培养成骨 细胞的作用,结论认为骨折愈合刺激素各浓度对 O B 的增殖和分化功能均无明显作用, 而对其矿化 功能具有明显刺激作用,从细胞水平阐明了骨折 愈合刺激素的
13、作用机制。 骨生长肤( o s t e o g e n i c g r o w t h p e p t i d e , O G P )是近期发 现的促 成骨、 促 造血的多 肤类生长因子, 研究O G P 对成骨细胞样 细胞的促成骨作用, 不仅有助于探索骨折愈合、 骨 病防治的新途径,而且可作为临床新药加以开发 和 利 用 f3 31 4 体外成骨细胞培养在其它实验中的应用 王前(n 做了直流电 对骨生成和骨代谢的影响 的实验研究, 发现电 流密度在8 5 - 2 1 2 u A / c m 3 之 间时, 鼠 成骨细胞排列方向与电 流方向一致, 细胞 万方数据 甘肃中医 2 0 0 3 年第
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