健康成人刺激性全唾液流速及一氧化氮含量的增龄性变化.pdf
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1、作者单位: 浙江省立同德医院口腔科 310012 (徐俊峰) 浙江大学附 属口腔医院修复科 (刘丽) 通讯作者: 刘丽 0571-85516010 健康成人刺激性全唾液流速及一氧化氮含量的增龄性变化 徐俊峰 刘丽 【摘要】 目的: 研究不同年龄阶段健康成人的刺激性全唾液流速及唾液一氧化氮含量的变化。方法: 将 97 例 健康成人分成 4 个年龄组, 分别为青龄组 (20 39 岁) 、 中龄组 (40 59 岁) 、 老龄组 (60 79 岁) 、 长寿组 (80 岁以上) 。在上午 8: 00 10: 00 空腹, 以2. 5 ml/ L 洗必太漱口, 以20 ml/ L 柠檬酸刺激舌背前1
2、/3, 以双蒸水漱 口后采集全唾液5 min, 记录样本容量, 并计算其流速。用硝酸还原酶法检测唾液中 NO 浓度, 并计算其唾液中 NO 的单位时间含量。结果:(1) 青龄组刺激性全唾液流速高于中龄组、 老龄组、 长寿组 (P 0. 05) ;(2) 不同年龄组间两两比较, 刺激性全唾液 NO 浓度无显 著性差异 (P 0. 05) ; 青龄组 NO 单位时间含量显著高于中龄组、 老龄组和长寿组 (P 0. 05) 。结论:(1) 中老年人群的刺激性全唾液流速显著低 于青年人群;(2) 随年龄增长, 健康成人刺激性全唾液中的 NO 浓度未发生明显变化, 但其单位时间含量呈降 低趋势。 【关键
3、词】 唾液; 流速; 一氧化氮; 增龄性变化 Age-related changes of stimulated whole saliva flow rate and nitric oxide level in healthy a- dults Xu Junfeng, Liu Li. Department of Stomatology, Zhejiang Tongde Hospital,Hangzhou 310012,China 【Abstract】Objective: To study age-related changes of stimulated whole saliva flow r
4、ate and nitric oxide level in healthy adults. Methods: 97 healthy adults were divided into four age groups: 20 - 39 years(youth group) ,40 - 59 years(middle-aged group) , 60 -79 years(elderly group) ,and 80 years and over(macrobian group) . The volun- teers were asked to restrain from breakfast in t
5、he morning. After mouth rinse with 2. 5 ml/ L chlorhexidine, 20 ml/ L cit- rate was dropped on the anterior third of the tongue dorsum of the subjects for two minutes at the pace of 1 drop every 20 seconds. Then the subjects rinsed their mouth 3 times with double-distilled water within 1 minute, the
6、n saliva was collected for 5 minutes. The volume of saliva was documented. Samples were frozen at - 70 until assayed. The rates were calculated. Nitric oxide concentrations were measured with nitrate reductase and the Griess reagent,and then nitric oxide output(mol/ min)was calculated. Results:(1)Th
7、e flow rate of stimulated whole saliva in youth group was significantly higher than that in middle-aged,aged and macrobian groups (P 0. 05) .(2)There were no significant differences in nitric oxide concentrations between any two of the groups. Output of nitric oxide in youth group was significantly
8、higher than that in middle-aged, aged and macrobian groups (P 0. 05) . Conclusion: Nitric oxide exists in saliva of healthy adults. Stimulated whole saliva flow rate and nitric oxide output decreases with aging. 【Key words】 Saliva flow rate; Nitric oxide; Age-related changes 中图分类号: R333. 1 文献标识码: A
9、文章编号: 1001-3733 (2006) -03-0317-04 唾液流速和唾液成分是影响唾液屏障的2 个主要 因素, 也是反映唾液腺分泌功能的重要指标。目前对 于衰老过程本身是否一定伴随唾液流速降低尚存在着 争议。一氧化氮 (nitric oxide, NO) 是唾液中的有效活 性成分之一。NO 是一种不稳定、 易扩散、 化学性质极 活泼、 半衰期极短 (4 50 s) 的自由基, 在体内很快被 氧化生成亚硝酸盐和硝酸盐。有关唾液 NO 含量增龄 性变化报道不多, 而且研究都集中在非刺激性全唾液 NO 含量, 对其增龄性变化目前也尚未取得一致的结 论。而有关刺激性全唾液 NO 含量的增龄
10、性变化未见 报道。本研究拟对不同年龄段健康成人的刺激性全唾 713实用口腔医学杂志 (J Pract Stomatol) 2006 May, 22 (3) 液流速变化及唾液中一氧化氮含量变化进行研究, 进 一步探讨健康成人唾液腺分泌功能的增龄性变化。 1 材料和方法 1. 1 主要试剂和仪器 NO 试剂盒 (南京建成生物工程研究所) , 96 孔培 养板, 加样枪及配套加样头 50 300 l (Finnpipette) , 恒温振荡器 (THZ-C) , HTS7000plus 多孔板紫外荧光 高效分析仪 (PE) , 自带软件的惠普电脑。 1. 2 研究对象 入选标准: 年龄大于 20 岁
11、的健康成人, 颌面部无 明显异常, 口腔黏膜、 牙龈色泽、 质地基本正常。排除 患全身系统性疾病或口腔疾病, 半年内较规律地服用 过致口干性药物者。 共入选97 例健康成人, 其中男48 例, 女49 例, 受 试者来源于成都市多个社区和敬老院, 按年龄分成 4 组, 分别为青龄组 (20 39 岁) 、 中龄组 (40 59 岁) 、 老龄组 (60 79 岁) 和长寿组 (80 岁以上) 。 1. 3 样本收集 参考 Bodis 1及 Baum2方法, 并稍作改良, 所有操 作由同一实验人员完成。所有入选者在上午 8: 00 10: 00 间空腹, 以双蒸水、 2. 5 ml/ L 洗必太
12、漱口, 以 20 ml/ L 柠檬酸刺激舌背前 1/3, 2 min 后以双蒸水漱口, 然后采集唾液 5 min, 记录样本容量, 并分别计算其流 速 (唾液流速 = 收集总量/ 收集时间, ml/ min) 。所得 样本接在灭菌刻度试管置于 -70 冰箱保存备用。 1. 4 硝酸还原酶法 + Griess 法检测 NO 含量 NO 体内代谢很快转为 NO2 - 和 NO3 - , 而 NO2 - 又 可进一步转化为 NO3 - , 唾液 NO3 - 和 NO2 - 浓度之和 才能准确代表唾液 NO 水平。采用硝酸还原酶特异性 将 NO3 - 还原为 NO2 - , 通过显色深浅测定 NO2
13、- 浓度 的高低, 间接反映唾液 NO 浓度 (mol/ L) 。单位时间所 分泌唾液中的 NO 含量 (mol/ min)= 浓度 流速。 1. 5 统计学处理 所有数据采用 SPSS 11. 5 统计软件进行处理, 所 有定量资料均行正态分布检验。不同年龄组间平均流 速两两比较采用单因素方差分析。不同年龄组间 NO 含量比较采用秩和检验的 Kruskal-Wallis H 单因素方 差分析, 两两比较采用 Mann-Whitney U 检验。检验水 准 =0. 05 (双侧) , 以 P 0. 05) 。 表 1 不同年龄组刺激性全唾液流速(ml/ min) Tab 1 Stimulate
14、d whole saliva flow rates in different age groups (ml/ min) 分组例数平均流速 青龄组230. 5748 0. 1788 中龄组220. 2773 0. 1597 老龄组240. 2950 0. 1552 长寿组280. 2814 0. 1902 总 和970. 3534 0. 2104 2. 2 各年龄组刺激性全唾液中 NO 浓度和单位时间 含量 如表 2 所示, 不同年龄组间两两比较, 单位体积 唾液中 NO 含量无显著性差异 (P 0. 05) 。同时青龄 组单位时间所分泌唾液中的 NO 含量最高, 显著高于 中龄组、 老龄组和长
15、寿组 (P 0. 05) 。 表 2 各年龄组刺激性全唾液中 NO 浓度和单位时间含量 Tab 2 Nitric oxide concentrations (mol/ L)and outputs (mol/ min) in stimulated whole saliva in different age groups 分组NO 浓度 (10 -4mol/ L) NO 单位时间含量 (10 -7 mol/ min) 青龄组9. 698 9. 6695. 844 6. 505 中龄组8. 839 6. 0952. 439 2. 565 老龄组6. 061 5. 1351. 898 2. 316 长
16、寿组7. 455 4. 2591. 978 1. 720 总 和7. 956 6. 5462. 980 3. 984 3 讨 论 众所周知, 器官的贮备力是指器官的基础功能与 最大功能之间的差值。许多人体器官如: 心、 肺、 肝、 肾、 唾液腺等都存在贮备力。Ghezzi 等 3发现唾液腺 的贮备力随年龄的增长而下降。随年龄的变化, 正常 人器官的组织结构也发生相应的改变, 但这并不一定 影响器官的功能。Ghezzi 等 4发现在健康未服药的人 中, 随年龄增长, 唾液腺的腺泡细胞数量减少, 但唾液 分泌量仍保持稳定。生理老化过程中, 存在贮备力的 逐渐下降, 但通过发挥器官的部分贮备力可以保
17、持内 813实用口腔医学杂志 (J Pract Stomatol) 2006 May, 22 (3) 环境的稳定。 一般认为正常唾液腺产生的 NO 在生理范围之内 有助于调节腺体血管活性, 唾液流量及神经多肽释 放 5。许多动物实验证明了腺体 NO 产生的量与唾液 分泌量成正相关 6 10。正常的唾液腺在刺激状态下 NO 合成增加 1, 唾液分泌量随之增加, 这时唾液腺发 挥了贮备力。本实验发现中老年人群单位时间所分泌 的 NO 含量及刺激性全唾液流速低于青年人群, 提示 中老年人群唾液腺贮备力低于青年人群, 因而唾液腺 贮备力的变化在一定程度上可能是由于单位时间内刺 激性全唾液 NO 含量的
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