体内外成熟卵子行单精子卵胞浆内注射助孕情况比较.pdf
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1、中国误诊学杂志2 0 0 8 年I 月第8 卷第2 期 C h i n J M i s d i a g n , J a n 2 0 0 8 V o l 8 N o . 2 【 研究原著】 体内外成熟卵子行单精子卵胞浆内注射助孕情况比较 林典梁, 张小燕, 郑备红, 孙艳, 邱淑敏, 陈晓等, 康跃凡, 陈文祯 【 摘要】 目的: 比较体内外成熟卵子行单精子卵胞浆内注射的助孕效果。 方法: 体内、 外成熟的卵子行单精子卵胞浆 内注射( I C S I ) 后, 对其受精和胚胎发育情况, 以及临床结局进行比较。 结果: 体外成熟的卵子行I C S I 受精率稍高于体内成 熟卵( P 0 . 0 5
2、 . C o n c l u s i o n s ; I C S I w i t h o o c y t e s m a t u r a t e d i n v i t r o m a y h a v e t h e s i m i l a r o u t c o m e t o w i t h t h o s e ma t u r a t e d i n v i v o . Me S H I n t r o c y t o p l a s m i c s p e r m i n j e c t i o n ; I n v i t r o m a t u r a t i o n ; F e r
3、 t i l i z a t i o n i n V i t r o ; E m b r y o T r a n s f e r 通过控制性超排卵获得体内成熟的卵子行单精子 卵胞浆内注射( i n t r o c y t o p l a s m ic s p e r m i n j e c t i o n , I C S I ) 用于治疗严重的男性不育症, 能够获得较高的受 精率和卵裂率, 助孕效果较好。近年来, 也有卵子在体 外培养成熟( i n v i t r o m a t u r a t i o n , I V M) 后, 再经I C S I 受精后胚胎移植治疗因卵子成熟障碍引起的不孕
4、。有 关体内外成熟的卵子I C S I 后结果的比较文献上报道 较少。 本研究室2 0 0 4 年以来对2 3 例在门诊多次常规促 排卵治疗无效的患者, 实施卵子体外培养成熟后行IC- 5 1 受精助孕, 并将其结果与同期实施的经控制性超排 卵后体内成熟卵子I C S I 进行比较分析。报告如下。 1 对象和方法 1 . 1 对象卵子体外成熟组 2 3例均为 2 0 0 4 - 0 1 - 2 0 0 6 - 1 0 门诊多次促排卵失败不孕患者。其中原发不 孕1 9 例, 继发不孕4 例, 不孕年限( 4 . 9 4 士2 . 6 6 ) a , 平 均年龄( 2 9 . 8 8 士3 . 9
5、 2 ) 岁。 卵子体内成熟组2 7 3 例病例 均为2 0 0 4 - 0 1 - 2 0 0 6 - 1 0 男方少弱畸精而行I C S I 助孕 者。其中原发不孕1 7 7 例, 继发不孕9 6 例, 不孕年限 ( 5 . 8 7 士3 . 0 9 ) a , 平均女方年龄( 3 1 . 5 4 士3 . 2 6 ) 岁。两 基金项目: 本课题获福建省青年科学基金资助( 编号: 2 0 0 6 - 1 - 1 4 ) 作者单位: 福建省妇幼保健院辅助生殖技术研究室, 福建福州3 5 0 0 0 1 作者简介: 林典梁( 1 9 7 3 - ) , 男, 福建闽清人, 硕士研究生, 主治医
6、师。研 究方向: 生殖医学。 组人口学资料统计无显著差别。 1 . 2 未成熟卵的采集及体外成熟培养 .自然周期或 撤退性出血的第3 -5 天行阴道超声检查, 记录两侧卵 巢的窦卵泡数及子宫内膜厚度。于周期第9 - 1 2 天超 声检查若两侧卵巢无直径大于 1 0 m m的卵泡, 注射 H C G 1 0 0 0 0 I U或直接3 6 h 后阴道B 超引导下穿刺取 卵, 患者于术前3 0 m i n 肌注杜冷丁镇痛。用1 7 G单腔 穿刺针连续穿刺卵泡, 调负压吸引泵负压为7 . 5 k P a , 将卵泡穿刺液转移到过滤器中用含肝素的E B S S 液反 复冲洗, 尽量洗去红细胞, 待卵泡
7、液冲洗清亮后在解剖 显 微 镜 下 仔 细 查 找 卵 一 冠 一 丘 复 合 体( o o c y t e - c o r o n a - c u - m u l u s c o m p l e x e s , O C C C s ) 。 捡出O C C C S 后置2 0 0 X 倒 置显微镜下逐个进行形态学评分, 后置人卵子成熟培 养液液滴中, 配方为: T C M- 1 9 9 培养液( 美国S i g m a 公 司产品) +2 0 纬胎牛血清( G I B C O ) +0 . 0 7 5 U / m l F S H + 0 . 1 U/ ml 人绒毛膜促性腺激素( h C G,
8、瑞士S e r o n o 公司产品) +0 . 5 tt g / m l 3 一 雌二醇( 美国S i g m a 公司产 品) 。 覆以矿物油在3 7 C, 含5 %C O z , 9 0 写N : 的培养箱 中进行成熟培养。 取卵后每1 2 h 观察O C C C s 的扩展情 况, 取卵后2 8 h去除卵外周颗粒细胞观察并记录卵子 成熟情况, 不成熟则继续培养至4 8 h o 1 . 3 受精和胚胎培养去除卵母细胞周围的卵丘细 胞, 当观察到有第一极体排出时, 认为卵母细胞成熟。 万方数据 中国误诊学杂志2 0 0 8 年l 月第8 卷第2 期 C h i n J M i s d i
9、a g n , J a n 2 0 0 8 V o l 8 N o . 2 穿刺卵泡3 1 6 个, 获得未成熟卵子1 5 2 个, 体外成熟培 养 2 8 h或4 8 h后, 共培养成熟 1 0 5 个卵子, 成熟率 6 9 . 1 %。成熟卵母细胞均采用I C S I 辅助受精, I C S I 后 1 6 1 8 h观察并记录原核及受精情况, 受精卵在胚胎 培养液I V F - 3 0 ( I V F s c i e n c e , S w e d e n ) 中继续培养2 -3 d , 于取卵后第4 天进行胚胎评分和胚胎移植。 1 . 4 子宫内膜准备取卵日开始给予戊酸雌二醇( 补 佳
10、乐, 德国先灵) 4 m g / d , I C S I 日 开始肌肉注射黄体酮 针8 0 m g / d , 连续2 周。 若周期第3 -5 天的内膜厚度小 于5 m m, 则给一予口服戊酸雌二醇2 m g / d . 1 周后加量 至4 m g / d , 取卵日 内膜厚度达不到7 m m, 则取消周期。 1 . 5 胚胎移植, 妊娠测定和维持于I C S I 受精后的 第2 -3 天行宫腔内胚胎移植( e m b r y o t r a n s f e r , E T ) , E T后2 周测尿妊娠试验阳性者, 测血p - h C G的水平, 胚胎移植后4 周行B型超声检查, 见宫内有孕
11、囊且胎 心搏动正常确立妊娠。若查血h C G证实妊娠, 则继续 服用戊酸雌二醇4 m g / d和注射黄体酮针8 0 m g / d 直 至妊娠7 0 d , 期间每周检测血孕酮和雌二醇水平, 必要 时增减上述药物剂量。 1 . 6 控制性超排卵( c o n t r o l l e d o v r i a n h y p e r s t i m u - l a t i o n , C O H) 及I C S I 的操作方法参见本研究室以往文 献 。 1 . 7 统计学处理采用G r a p h p a d i n s t 3 统计学软件, 进行X 2 检验和t 检验。 结局比较见表2 0 表
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