全脑缺血-再灌注对海马CA1区GAD65表达的影响及意义.pdf
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1、 3 8 全脑缺血一再灌注对海马C A l 区G A D 6 5 表达的影响及意义 许林峰1 马文裴3 刘静2 冯忠堂D 昆明医学院1 ) 神经科学研究所2 ) 第二附属医院神经外科3 ) 生理教研室昆明 6 5 0 0 3 1 【摘要】目的探讨全脑缺血一再灌注对成年大鼠海马C A l 区G A D 6 5 表达的影响及意义。方法成年雄性S D 大鼠2 4 只, 随机分为3 组:假手术组( S H ) 、缺血一再灌注3 d 组( I R _ 3 ) 及缺血一再灌注7 d 组( I R - 7 ) ,每组8 只。采用四动脉阻断法制作全脑缺 血一再灌注模型,应用免疫组织化学方法检测海马C A l
2、区谷氨酸脱羧酶( g l u t a m i ca c i dd e c a r b o x y l a s e ,G A D ) 同工酶G A D 6 5 的表达 变化。结果与假手术组相比,I R - 3 组G A D 6 5 的表达明显增多,I R - 7 组恢复正常。结论G A B A 能中间神经元对缺血相对耐受; 全脑缺血一再灌注3 dG A D 6 5 的表达增多可能是一种代偿性的机制,以减轻脑缺血后的高兴奋性。 【关键词】脑缺血;再灌注;谷氨酸脱羧酶;海马;大鼠 【中图分类号】R 一3 3 2 【文献标识码】A 【文章编号】1 6 7 3 5 1 1 0 ( 2 0 0 8 ) 0
3、 6 0 0 3 8 0 2 E f f e c ta n ds i g n i f i c a n c eo fg l o b a li s c h e m i a - r e p e r f u s i o no nt h ee x p r e s s i o no fG A D 6 5i nh i p p o c a m p a lC A lr e g i o n X u L i n f e n 9 1 ,M aW e n p e i ”,L i uJ i n g ”,e ta 1 1 ) I n s t i t u t ef o rR e s e a r c ho nN e u r o
4、 s c i e n c e2 ) D e p a r t m e n to fN e u r o s u r g e r y ,S e c o n d A i l i a t e dH o s p i t a l3 ) D e p a r t m e n to fP h y s i o l o g y ,K u n m i n gM e d i c a lC o l l e g e 。K u n m i n g6 5 0 0 31 ,C h i n a A b s t r a c t 0 b j e c t i v e T oo b s e r v et h ee f f e c to fg
5、 l o b a li s c h e m i a - r e p e r f u s i o no nt h ee x p r e s s i o no fG A D 6 5i nt h eh i p p o c a m p a lC A I r e g i o no fa d u l tr a t s M e t h o d s 2 4m a l eS Dr a t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t ot h r e eg r o u p s :s h a m - o p e r a t i o ng r o u p ( S H ,挖= 8
6、 ) ,i s c h e m i a - r e p e r f u s i o nt h r e ed a y s ( I R - 3 ,行= 8 ) a n ds e v e nd a y sg r o u p ( I R - 7 ,雄一8 ) G l o b a li s c h e m i ce p i s o d ew a sa c h i e v e db y4 - v e s s e lo c c l u s i o n I m m u n o h i s t o c h e m i c a lm e t h o dw a sa p p l i e dt Oo b s e r
7、v et h ee x p r e s s i o no fG A D 6 5i nh i p p o c a m p a lC A Ir e g i o n R e s u l t s A ti s c h e m i a - r e p e r f u s i o nt h i r dd a y 。t h ei m m u n o r e a c t i v i t i e so ft h eG A D6 5w e r em a r k e d l ye l e v a t e di nt h eC A lr e g i o nc o m p a r e dw i t hs h a mo
8、p e r a t e d g r o u p 。b u tt h ei m m u n o r e a c t i v i t i e sr e c o v e r e dt Ot h es h a ml e v e la ti s c h e m i a - r e p e r f u s i o ns e v e n t hd a y C o n c l u s i o nG A B A e r g i ei n t e r n e u - t o n sr e l a t i v e l yr e s i s t a n tt Oi s c h e m i a - r e p e r
9、f u s i o ni n j u r y ,a n dt h ei n c r e a s i n ge x p r e s s i o no fG A D 6 53 da f t e ri s c h e m i a - r e p e r f u s i o nc a nb e ac o m p e n s a t o r ym e c h a n i s mt Or e d u c et h eh y p e r e x c i t a b i l i t ya s s o c i a t e dw i t hi s c h e m i a - r e p e r f u s i o
10、 n K e yw o r d s B r a i ni s c h e m i a ;R e p e r f u s i o n ;G A D 6 5 ;H i p p o c a m p u s ;R a t y 一氨基丁酸( 7 一a m i n o b u t y r i ca c i d ,G A B A ) 是哺乳 类动物中枢神经系统中最重要的一种抑制性氨基酸递 质 1 ,G A B A 能的抑制作用在调控谷氨酸能突触的活 动中起重要作用。因此,G A B A 能系统的异常可导致 神经元的高兴奋性,从而导致再灌注损伤。因而研究 脑缺血后G A B A 功能的变化,对脑缺血的治疗有重
11、要 的指导意义。本研究通过建立全脑缺血一再灌注动物 模型,探讨成年大鼠海马C A l 区G A D 6 5 的表达变化 及意义。 1 材料和方法 1 1 实验动物及分组 2 4 只雄性S D 大鼠,体质量 2 0 0 2 5 0 9 ( 昆明医学院实验动物中心提供) ,随机分为 3 组:假手术组( S H ,z = 8 ) ,缺血再灌注3 d 组( I R 一3 ,z = 8 ) 和缺血再灌注7 d 组( I R 一7 ,行一8 ) 。 1 2 全脑缺血一再灌注模型制备采用四血管阻断法 制作全脑缺血一再灌注动物模型。以0 4 戊巴比妥 钠( 4 0m g k g ) 腹腔注射麻醉后,从后颈部正
12、中纵形切 开皮肤,分离椎旁肌,暴露第一颈椎翼状孔,电灼烧凝 固双侧椎动脉,造成永久性关闭。再从颈前正中纵形 切开皮肤,分离双侧颈总动脉,分别用丝线绕过双侧颈 总动脉,将丝线的另一端置于皮肤切口外,不完全缝合 皮肤切口以备次日用。2 4 h 后用留置丝线将双侧颈总 动脉由皮肤切口牵出,用动脉夹夹闭双侧颈总动脉 1 0 m i n 后再通。保持肛温3 7 。模型成功标准:l m i n 内昏迷,双侧瞳孔放大,翻正反射消失。假手术组仅暴 露双侧颈总动脉和翼小孔,不作缺血处理。 1 3 标本取材及制作脑组织切片假手术组在再灌 注后2 4 h ,实验组在再灌注后相应时间点经0 4 戊巴 比妥钠( 4 0
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- 缺血 灌注 海马 CA1 GAD65 表达 影响 意义
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