冲击波诱导人骨髓基质细胞成骨分化及机制的研究.pdf
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1、 骨科基础研究 冲击波诱导人骨髓基质细胞成骨分化及 机制的研究 胡军张爱斌刘晓岚周江南 作者单位: ! “ ! # $ “广东汕头大学医学院第一附属医院骨科 (胡军、 张爱斌) ; 湖南省郴州市第一人民医院脊柱外科 (刘晓岚) ; 中南大学湘 雅医院骨科 (周江南) 【摘要】 目的观察出生后人骨髓基质细胞 (% + ? , ( ; ; + 3 + 1 5 , 4 A + 9 5“ 2 8 + 5 1 3 2 ;B = 1 ) ? A B ? % C D % = E = D ? C E ; ) ? ; D ) ; H ; F C E = ? ; ) ? J) ? E 5 = H D C H H
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5、细胞密度为的方法, 将其置于液电冲击波仪 焦点处, 在脉冲2 1 1次的条件下, 分别经2、 孔培养板内进行培养。 (!,“C C法检测细胞增殖活力。 (8) 细胞培养; D!后统计# 组与对照组细胞集落形 成数量, 取其平均值。 . 冲击波处理原代细胞: 原代细胞传代时, 调整细 胞密度为孔培 养板中。 ; 细胞形态学观察: 应用倒置相差显微镜每日观 察冲击波处理组 (# 组) 和非冲击波处理组 (对照组) 的各代细胞形态、 贴壁、 生长增殖、 集落及钙化结节形 成情况。 2 检测C E F G ! 、 ; D、4 8、9 /!留取细胞上清液, 应用检 测C E F G ! 孔培养板各孔接种
6、相同数 量的细胞, 应用噻唑蓝 (“C C) 比色法检测第.代、 第/ 代、 第 9 1? +) 。 4 茜素红染色检测钙化结节: # 组与对照组各 代细胞持续培养8周, 吸去培养液, 将8 ;孔培养板内 的细胞以 .) 。参考 ( ? 等 ; 方法设计内对 照基因! G ( : V 组与对照组的骨钙 素+ Q R K与N = V ( G ( : V 组与对照组共传#2, 传后# )%, , 培 养的第!天可观察到部分细胞贴壁, 同时仍含有一定 数量的悬浮造血细胞, 以后每天观察贴壁细胞增多, 快 速增殖, 积聚, 细胞呈梭形, 团簇性生长倾向。至# ! ! # $ %时, 培养瓶中的细胞铺满
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