创伤反应差异与CXCL15基因关系的初步探讨.pdf
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1、基础研究 创伤反应差异与 Cxcl15 基因关系的 初步探讨 黄文 朱佩芳 王正国 冯刚 杨志焕 【摘要】 目的 观察 Cxcl15 基因 (chemokine, C - X - C motif, ligand 15) 在两系创伤反应明显 差异小鼠生理状态下及伤后表达的差异, 初步探讨创伤反应差异与 Cxcl15 基因的关系。 方法 采用荧光定量聚合酶链反应 (PCR) 技术, 对两系小鼠 Cxcl15 基因在生理状态下的表达进行定量; 采用 Northern 的实验方法, 对两系小鼠伤后 Cxcl15 基因的表达变化进行定量。 结果 在生理状 态下, Cxcl15 基因在 C57BL/6 小
2、鼠中的表达量较在 BALB/ C 小鼠中的表达量低, 差异有统计学意 义 (P CG (P 0. 05) 。 (2)伤后 24 h Cxcl15 基因的表 达量基本恢复正常。 (3)BG 中 Cxcl15 基因在伤后 6 h 内持续升高, 而 CG 中 Cxcl15 基因的表达在伤后 806中华创伤杂志 2005 年 8 月第 21 卷第 8 期 Chin J Trauma,August 2005,Vol. 21,No. 8 1 h 有一个下降的过程, 然后再上升。 (4)伤后 Cx- cl15 基因的表达高峰可能在伤后 6 h 或前后的时相 点;(5) 在每个时相点, BG 中 Cxcl15
3、 基因的表达均 较 CG 的高。见表 2、 图 5 8。 表 1 两系小鼠 Cxcl15 基因生理状态下表达荧光定量 PCR 检测结果 (-x s) 组别鼠数 GAPDH CTCopies Cxcl15 CTCopies Cxcl15/ GAPDH BALB/ C 小鼠组5 29.024 1.646 493362.380 345203.905 28. 836 1. 137 484599. 980 268622. 314 1. 163 0. 424* C57BL/6 小鼠组5 26.628 3.181 4207156.480 6244036.264 28. 448 2. 454 97823. 3
4、86 1089432. 324 0. 394 0. 145 与 C57BL/6 比较: * P 0.05 表 2 两系小鼠 Cxcl15 基因伤后表达 Northern 定量结果 (-x s) 组别伤前 伤后时间 (h) 162472 BALB/ C 小鼠组4.066 3.6194.574 1.053*11. 233 6. 214*5. 469 3. 5815. 196 2. 316 C57BL/6 小鼠组1.551 0.5391.217 0.7084. 663 1. 9731. 417 0. 2771. 250 0. 629 注: 伤前为 2 个标本, 伤后各时相点分别为 3 个标本。与 C
5、57BL/6 小鼠组比较: *P 0. 05 图5 两系小鼠伤前、 伤后1, 6 h Cxcl15 基因表达结果 (注: 单 数为 C57BL/6 小鼠样本; 双数为 BALB/ C 小鼠样本; 1 4 为 伤前小鼠样本; 5 10 为伤后1 h 小鼠样本; 11 16 为伤后6 h 小鼠样本) 图 7 两系小鼠伤后 24, 72 h Cxcl15 基因表达结果 (注: 单数 为 C57BL/6 小鼠样本; 双数为 BALB/ C 小鼠样本; 1 6 为伤 后 24 h 小鼠样本; 7 12 为伤后 72 h 小鼠样本) 图 6 两系小鼠伤前、 伤后 1, 6 h 内参 (GAPDH 基因)
6、表达结 果 (注: 单数为 C57BL/6 小鼠样本; 双数为 BALB/ C 小鼠样 本; 1 4 为伤前小鼠样本; 5 10 为伤后 1 h 小鼠样本; 11 16 为伤后 6 h 小鼠样本) 图 8 两系小鼠伤后 24, 72 h 内参 (GAPDH 基因) 表达结果 (注: 单数为 C57BL/6 小鼠样本; 双数为 BALB/ C 小鼠样本; 1 6 为伤后 24 h 小鼠样本; 7 12 为伤后 72 h 小鼠样本) 3 讨论 由于创伤具有明确的致伤因素和偶然性等特点 而很难让人将其与遗传因素相关联, 但发生创伤的 机体变化将会受到基因调控, 由遗传机制决定的一 些病理生理基础也易
7、导致在相同致伤因素的作用下 易于发生某种损伤或某些人易于发生损伤, 而且创 伤反应及转归中也存在明显的个体差异, 这些均可 能提示遗传机制在创伤发生、 演变、 转归中发挥重要 作用。笔者从众多与肺损伤差异性有关的候选基因 中选择 Cxcl15 基因为研究对象是基于如下考虑: 创 伤后肺是反应最早、 变化最明显的器官之一 5, 6; Cx- cl15 基因在肺组织中特异性表达 7; 在介导炎症中 发挥作用 8; 具有重要的生理功能, 已有研究还提示 该基因可能与血管的形成和功能有关 9, 10; 最重要 的是, 采用基因芯片技术观察两系小鼠创伤后基因 的表达时发现, 创伤后两系小鼠基因表达的确有
8、所 差异 2。 Mahajan 等 11认为, 单独应用一种方法不能够 满足全面的、 与生物学相关的实验要求。实际上, 许 多研究都采用了一种以上的方法从不同的角度、 对 比性的研究相同的实验目的 12, 13。因此, 本研究选 择荧光定量 PCR 和 Northern 两种技术对同一基因在 生理状态和创伤后的变化进行比较研究。 本研究结果表明, Cxcl15 基因在两系对创伤反 应有明显差异小鼠生理状态和创伤后的表达以及变 化规律都有所不同。笔者认为, 如果该基因在两系 小鼠生理状态及伤后的变化规律均显示出一致性 (如同时上升、 同时下降等) 的情况下, 这只是提示该 基因参与了创伤后机体的
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- 创伤 反应 差异 CXCL15 基因 关系 初步 探讨
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