半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 MRNA在淋巴滞留性脑病大鼠脑皮质及海马的表达.pdf
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1、6 6 中国临 床康复 第 )0 春 男2 6 朋 2 0 0 6 - 0 7 - 1 5 出 版 C h i n e s e J o u r n a l o f C l i n ic a l R e h a b i l i t a t i o n , 五 行1 5 2 0 0 6 V o l . 1 0 N o . 2 6 蔽础研 究 半 胧 氨 酸 天 冬 氨 酸 蛋白 酶3 m R N A 在 淋 巴 滞 留 性 脑 病 大 鼠 脑 皮 质 及 海 马 的 表 达* 夏作理 , 李修彬 , 叶文静 , 翟西菊 2 , 泰山医学院脑微循环研究所,山东省泰安市2 7 1 0 0 0 ;a 泰
2、安市肿瘤防 治院, 山东省泰安市2 7 1 0 0 0 夏作理, 男, 1 9 4 4年生, 山东省泰安市人, 汉族, 1 9 6 6年山东医学院毕 业, 教授, 主要从事脑淋巴及脑微循环研究。 通讯作者: 李修彬, 泰山医学院脑循环研究所, 山东省泰安市 2 7 1 0 0 0 山东省自然科学基金项目( Z 2 0 0 2 C 4 0 ) * 中图分类号: R 7 4 2 文献标识码: A 文章编号: 1 6 7 1 - 5 9 2 6 (2 0 0 6 ) 2 6 - 0 0 6 6 - 0 3 收稿日 期: 2 0 0 5 - 1 2 - 2 3 修回日 期: 2 0 0 6 - 0 4
3、 - 3 0 ( 0 5 - 5 0 - 9 - 6 7 1 1 / G W“ Q 性脑病大鼠 脑皮质及海马的表达比中国临 床康复, 2 0 0 6 , 1 0 ( 2 6 ):6 6 - 8 IW w w .z g 1C k f .C o tn l C a s p a s e - 3 m R N A e x p r e s s io n in c e r e b r a l c o r t e x a n d h ip - p o c a m p u s o f r a t s w i t h l y m p h o s t a t i c e n c e p h a l 叩a t h y
4、X i a Z u o - li, L i X i u - b in , Y e W e n - j in g , Z h a i X i- ju t C e r e b r a l M i c r o c i r c u l a t i o n I n s t i t u t e , T a i s h a n M e d i c a l C o l l e g e , T a i a n 2 7 1 0 0 0 , S h a n d o n g P r o v i n c e , C h i n a ; T a i a n T r e a t m e n t a n d P r e v
5、e n t i o n o f T u m o r H o s p i t a l , T a i a n 2 7 1 0 0 0 , S h a n d o n g P ro v i n c e , C h i n a X ia Z U O - II, P ro f e s s o r , C e r e b r a l M i c ro c i r c u l a t i o n I n s t i t u t e , T a i s h a n M e d i c a l C o l l e g e , T a i a n 2 7 1 0 0 0 , S h a n d o n g P
6、ro v i n c e , C h i n a C o r r e s p o n d e n c e t o : L i X lu - b in , S t u d y i n g f o r d o c t o r a t e , C e r e b r a l M i c ro c i r - c u l a t i o n I n s t i t u t e , T a i s h a n M e d i c a l C o l l e g e , T a i a n 2 7 1 0 0 0 , S h a n d o n g P ro v i n c e , C h i n a S
7、 u p p o r t e d b y : t h e N a t u r a l S c i e n c e F o u n d a t i o n o f S h a n d o n g P r o v i n c e , N o . Z 2 0 0 2 C 4 0 * R e c e i v e d : 2 0 0 5 - 1 2 - 2 3 A c c e p t e d : 2 0 0 6 - 0 4 - 3 0 Ab s t r a c t A I M: T o i n v e s t i g a t e e x p r e s s i o n o f c a s p a s e
8、 3 m R N A i n t h e c e re b r a l c o rt e x a n d h i p p o c a m p u s o f r a t m o d e l s w i t h l y m p h o s t a t i c e n c e p h a l o p a th y a n d t h e re l a t i o n s h i p b e t w e e n n e u r o n a l a p o p t o s i s a n d l y m p h o s t a t i c e n c e p h a l o p a t h y . M
9、E T HOD S : A t o t a l o f 8 8 m a l e a d u l t Wi s t a r r a t s w e r e s e l e c t e d a n d r a n - d o m l y d i v i d e d i n t o 3 g r o u p s : o p e r a t i o n g r o u p ( n = 4 0 ) , s h a m o p e r a t i o n g ro u p ( n = 4 0 ) a n d n o rm a l c o n t ro l g ro u p ( n = 8 ) . T h e
10、 r a t s i n t h e o p e r a t i o n g r o u p a n d s h a m o p e r a t i o n g r o u p w e r e a s s i g n e d i n t o 1 , 3 , 5 , 7 a n d 1 4 d a y s t i m e p o i n t s a f t e r o p e r a t i o n w i t h 8 r a t s i n e a c h g r o u p . T h e r a t m o d e l s w i t h l y m p h o s t a t i c e
11、 n c e p h a l o p a t h y i n t h e o p e r a t i o n g r o u p w e r e e s t a b l i s h e d . T e m p o ro p a r i e t a l c o rt e x a n d h i p p o c a m p a l t i s s u e s w e r e i s o l a t e d a t e a c h t i m e p o i n t s a f t e r i n - j u ry . O n l y g l a n d u l a l y m p h a t i
12、c a i n t h e s h a m o p e r a t i o n g ro u p w a s r e m o v e d a n d e x p o s e d , b u t t h e l y m p h a t i c v e s s e l w a s n o t l i g a t e d , a n d t h e g l a n d u l a l y m p h a t i c s w a s n o t e x t r a c t e d . T h e e x p r e s s i o n o f c a s p a s e - 3 m R N A w a
13、 s o b - s e r v e d a f t e r i n j u ry i n r a t s w i t h l y m p h o s t a t i c e n c e p h a l o p a t h y w i t h s e m i - q u a n t i t a t i v e r e v e r s e t r a n s c ri p t i o n - p o l y m e r i s e c h a i n re a c t i o n . R E S U L T S : T o ta l ly 8 8 r a t s w e r e i n v o
14、l v e d i n t h e r e s u l t a n a l y s is . C a s - p a s e - 3 m R N A w a s u p - r e g u l a t e d i n t e m p o r o p a r i e t a l c o rt e x w i t h i n 3 d a y s a f - t e r l y m p h a b l o c k . T h e e x p re s s i o n w a s t h e h i g h e s t i n t h e 1 d a y . T h e e x - p r e s s
15、 i o n o f c a s p a s e - 3 m R N A w a s h i g h e r t h a n t h a t i n t h e s h a m o p e r a t i o n g r o u p a n d c o n t r o l g ro u p w i t h i n 3 d a y s , w h i c h h a d s t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e ( F = 2 9 . 8 9 2 , P = 0 .0 0 1 0 .0 1 ) .T h e e x p r e s s i o n
16、 a f t e r 3 d a y s b l o c k w a s n e a r 摘要 目的: 探讨半胧氨酸天冬氨酸蛋白酶3 m R N A在淋巴滞留性脑病大鼠 脑皮质及海马中的表达情况及其与神经元凋亡之间的关系。 方法: 选取成年雄性 Wi s t a r 大鼠8 8 只, 随机分为脑淋巴引流阻断组 4 0 只、 假手术组 4 0只及正常对照组 8只。脑淋巴引流阻断组和假手术组 分为术后 1 , 3 , 5 , 7 , 1 4 d 5 个时间点, 每个时间点8 只。 脑淋巴引流阻断 组建立淋巴滞留性脑病动物模型, 在损伤后各时间点取颖顶皮质、 海马 区脑组织。假手术组只分离和暴露淋巴
17、结, 但不结扎淋巴管, 亦不摘除 淋巴结。 用半定量反转录一 聚合酶链反应方法观察淋巴滞留性脑病大鼠 损伤后半胧氨酸天冬氨酸蛋白酶3 m R N A的表达情况。 结果: 8 8 只 大鼠 均进 人结果分 析。 在颖顶皮质, C a s p a s e 3 m R N A在 淋巴阻塞后3d内表达上调, 以第 1 天表达最高, 淋巴阻塞后 3d内 C a s p a s e 3 m R N A表达比 假手术组及对照组高, 且有统计学意义( F = 2 9 . 8 9 2 , P = 0 . 0 0 1 0 .0 1 ) 。淋巴 阻塞3 d 后表达接近正常对照及假手 术组。 对照组与假手术组之间 差
18、异无统计学意义。 在海马, C a s p a s e 3 m R N A较颖顶皮质表达上调更明显, 以第1 天表达最高, 淋巴阻塞后 5 d 内C a s p a s e - 3 m R N A 表 达比 假 手术 组 及对照 组高, 差异有 统 计学意 义 ( P 0 .0 5 ) , 5 d 后表达接近正常对照及假手术组。 结论:在淋巴滞留性脑病大鼠模型中神经元凋亡的发生可能与半胧氨 酸天冬氨酸蛋白酶- 3 m R N A的激活有关。 主题词: 脑水肿/ 病理学; 半肌氨酸天冬氨酸蛋白酶/ 代谢; 细胞凋亡; 大 鼠 w a s t h e h i g h e s t i n t h e
19、 1 d a y . T h e e x p r e s s i o n o f c a s p a s e - 3 m R N A w a s h ig h e r t h a n t h a t i n t h e s h a m o p e r a t i o n g r o u p a n d c o n t r o l g ro u p w it h i n 5 d a y s , w h i c h h a d s t a t i s t i c a l s i g n i fi c a n c e ( P0 .0 5 ) . T h e e x p r e s s i o n a
20、 f t e r 5 d a y s b l o c k w a s n e a r t o t h a t i n t h e n o r m a l c o n t r o l g r o u p a n d s h a m o p e r a t i o n g r o u p - C O N C L U S I O N : I n r a t m o d e l s w i t h l y m p h o s t a t i c e n c e p h a l o p a t h y , n e u r o n a p o p t o s i s i s p r o b a b l y
21、 r e l a t e d t o t h e a c t i v a t i o n o f c a s p a s e - 3 . X ia Z L , L i X B , Y e W J , Z h a i X J .C a s p a s e - 3 m R N A e x p r e s s io n in c e r e b r a l c o rt e x a n d h ip p o c a m p u s o f r a t s w it h ly m p h o s t a t ic e n c e p h a to p a th y .Z h o n g g u o L
22、 i n c h a a n g K m t妒止 2 0 0 6 ;1 0 12 6 1:6 6 - 8 1C h in a l 夏作理, 李修彬, 叶文静, 翟西菊. 半眺氨酸天冬氨酸蛋白酶3 rn R N A在淋巴滞留 0 引言 脑内没有淋巴管, 却存在淋巴引流。 近年来脑淋巴 引流的生理及病理生理意义, 已引起众多学者的关注。 任何原因引起的脑淋巴液产生过多或引流障碍,均可 导致淋巴滞留性脑水肿, 临床上称“ 淋巴滞留性脑病” 。 半胧氨酸天冬氨酸蛋白酶, 是细胞凋亡程序一类关键 同源半胧氨酸蛋白酶,特异性在夭冬氨酸残基后裂解 靶蛋白, 半胧氨酸天冬氨酸蛋白酶3 与脑缺氧缺血后 早期损伤
23、密切相关, 在神经元凋亡中起关键作用。 本文 主要从基因水平阐述淋巴 滞留 性脑水肿大鼠 模型中 半 胧氨酸天冬氨酸蛋白酶3 m R N A表达的时空变化及 其与神经元凋亡之间的关系。 1 材料和方法 设计: 随机对照动物实验。 单位: 泰山医学院脑微循环研究所。 材料: 实验动物与分组: 健康雄性Wi s t a r 大鼠( 由 山东大学实验动物中心提供, 检疫号: 鲁动2 0 0 2 1 0 2 4 ) 8 8 只, 体质量1 8 02 5 0 g , 随 机分为 脑淋巴 引流阻 断组 4 0 只、 假手术组4 0 只及正常对照组8 只。 脑淋巴引流 阻断组和假手术组又分为术后 1 , 3
24、 , 5 , 7 , 1 4 d 5 个时 间点, 每个时间点8 只。各组到达规定时间后, 动物快 速断头取脑,经 D E P C水处理液氮速冻后置一 8 0冰 I S S N 1 6 7 1 - 5 9 2 6 w w w a g lc 尽c o m C N 2 1 - 1 4 7 0 / R k j 2 3 3 8 5 0 8 3 s i n a c o m 夏作理, 等 半恍氨酸天冬氨酸蛋白酶 3 m R N A在淋巴滞留性脑病 大鼠脑皮质及海马的表达 箱保存备用。 设计、 实施、 评估者: 实验设计、 资料收集、 实施及 评估由本文全体作者完成, 均经过相关培训。 方法: 淋巴滞留性脑
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