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1、1 9 0 南京医科大学学报( 自然科学版) A C T A I IN I V E R S IT A T I S ME D I C IN A L I S N A N I I N G ( N a wr a l S c i e n c e ) 第 2 6卷第3期 2 0 0 6 年 3 月 呼吸道合胞病毒对致敏小鼠气道反应性的影响及机制探讨 蒋 雄斌. 朱 毅, 殷凯生 ( 南京医科大学第一附属医院呼吸科, 江苏 南京2 1 0 0 0 9 ) 摘 要 目的: 探讨呼吸道合胞病毒( R S V ) 对致敏小鼠 气道反应性的影响。方法: B a l b / C 小鼠3 0 只, 随机分成3 组, 分
2、别为 磷酸盐缓冲液( P B S ) 对照组, 鸡卵白 蛋白 ( O V A ) 组和O V A / R S V组。 应用O V A腹 腔注射致敏, O V A 气道雾化吸人结合R S V滴鼻 激发复制 哮喘模f, 支 气管肺泡 灌洗液( B A L E ) 作细胞分 类it 数, 酶 联免疫吸附试 验( E L I S A ) 测定B A L F 上清中白 细胞介素( I L ) -4 , I L- 5 、 干扰素( I F N ) - y 含量。 肺组织切片行苏木精一 伊红( H E ) 染色观察病理变化, 动物体描箱法测定气道反应性( 以 肺阻力R , 表 示) 。 结果: 与O V A
3、 组比 较I O V A / R S V组B A L F中细胞总数、 嗜酸性粒细胞、 淋巴 细胞、 中性粒细胞均明显增加( P 均 0 .0 1 ) , B A L F 上清中I F N - y , I L - 4 , I L , 5 含量均明显升高( P 0 .0 1 ) ; 与O V A组比 较,O V A / R S V 组支气管豁膜增厚, 管腔收缩、 狭窄, r. . 皮 破坏, 支气管 周围 炎症细胞浸润加重, 气道反 应性 亦明 显升 高( P 0 .0 1 ) 结论: O V A 致敏小鼠R S V感染后可导致气道反应性 明显增加, 并和OV A致敏哮喘气道反应性增高具有不同的病
4、理生理特征 关健 词I呼吸道合胞病毒; 支气管哮喘; 气道高反应性 中图分类号1 R 5 6 2 .2 5 文献标识码1 A 文章编号 1 0 0 7 - 4 3 6 8 ( 2 0 0 60 3 - 0 1 8 0 -0 4 E ff e c t s o f r e s p i r a t o ry s y n c y t ia l v i r u s ( R S V ) i n f e c t i o n o f o v a b u min ( O V A) - s e n s i t i z e d B a l b / C mic e .H A N G X i o n g - b i n
5、 , Z H U Y i , Y I N K a i - s h e n g ( D e p a r t m e n t o f R e s p i r a t o r y D i s e a s e , t h e F ir s t A ffil i a t e d H o s p i t al , o n t h e a i r w a y h y p e r r e s p o n e s i v e n e s s s N J MU, N a n j i n g 2 1 0 0 0 9 , C h i n a ) A b s t r a c t O b j e c ti v e : T
6、 o s tu d y t h e e ff e c t o f R S V i n f e c t io n o n th e a i r w a y h y p e r r ea p o n e s iv e n e s s o f O V A - s e n s i t iz e d B a lb / C m i c e Me th o d s : T h i r ty m i c e w e re ran d o m l y d i v i d e d in t o th r e e g rou p s : P B S c o n t rol g rou p , O V A g rou
7、 p a n d O V A / R S V g r o u p ; C e ll s i t b ron e h o a l v o e l m l a v a g e fl u id ( B A L E ) w e re c o u n te d a n d t h e s u p e rna ta n ts o f th e B A L F w e re u s e d fo r d e t e c t i o n o f R A, 1 G5 a n d I F N -y; L u n g h is t o p a t h o lo g y w e r e e v a l u a t e
8、 d b y H E s t a in ; A ir w a y re s p o n s e n i v e n e s s w e re a s s e s s e d u s i n g 。 w h o le b o d y p l e t h y s m g m p h y a m , lu n g r e s is t a n c e ( R r ) c a l c u l a te d u s in g a p r o p r ie t a ry s o f tw a re p ro g r a m. R e s u l ts : T o ta l H A L F c e l l
9、s , e o s i n o p h i ls , l y m p h o c y t e s a n c n e u t ro p h i ls f ro m O V A / R S V g ro u p w e re s ig n i fi c a n t l y h i g h e r t h a n t h o s e in O V A g r o u p ( r e s p e c t iv e l y P 0 . 0 1 ) ; I F N - y , 1 1 , 4 , H , 5 l e v e l in B A L F fr o m O V A / R S V g ro u
10、 p i n c re a s e d g r e a t l y c o m p a r e d w i t h th o s e , i n O V A g ro u p ( r e s p e c t iv e ly P 0 .0 1 ) ; A ir w a y i n fl a m m a to r y c e ll i n f i lt rati o n in a i rw a y lu m e n i n O VA / R S V g ro u p w e r e m o r e s i g n i fi c a n t a n d e x t e n s iv e t h a
11、n t h o s e i n a ll t h e o t h e r g et u p s . O V A / R S V g ro u p h a d s i g n if ic a n tl y g r ea te r a i r w a y re s p o n s i v e n e s s to A c h t h a n O V A g ro u p . C o n s lu s io n : R S V in f e c t io n in O V A -s e n s it iz e d B a lh / C m ic e c a n i n d u c e g r e a
12、 te r a i r w a y h 舜e r r e s p o n s iv e n e s s a n d t h e r e is g r e a t d i ff e re n c e i n p a t h y p h y s io lo g y c o m p a re d w i th t h a t in O V A - s e n s i t iz e d a s t h m i c mic e . K e y w o r d s r e s p ir a t o ry s y n c y t ih l v i r u s ; a s th ma ; a ir w a y
13、 h y p e r res p o n s i v e n e s s A c ta U n i v Me d N a n j in g , 2 0 0 6 , 2 6 ( 3 ) : 1 8 0 - 1 8 3 临床及流行病学研究表明呼吸道病毒感染是哮 喘急性加重 、 致死的重要原因t - 2 1 。然而呼吸道合胞 病 毒 ( R S V ) 导致哮喘 气道反应性增高的机制不清 楚, 1 9 9 7年R o b i n s o n 等 3用致敏的豚鼠感染R S V 基金项目l 江苏省卫生厅科技资助项目( H 2 0 0 3 1 6 ) 通讯作者, E - m a il : y i n k
14、s 1 2 6 .c o m 发现气道反应性显著增高、 气道壁水肿、 上皮破坏、 炎症细胞浸润加重。1 9 9 9年 P e e b l e等a 7 以卵蛋白 ( O V A ) 致敏B a l b / C小鼠, 再用O V A 雾化, 发现气道 高反应性仅持续数天, 而在雾化期间 感染R S V则气 道反应性增高持续约2 周余, 2 周后气道炎症也较 前者明 显。 上述实验主 要从大体组织或离体实验来 研究, 没有进一步从免 疫病理学角度探讨两者的 关 第 2 6 卷 第 3 期 2 0 0 6年 3月蒋雄斌等 呼吸道合胞病毒对致敏小鼠气道反应性的影响及机制探讨1 8 1 系。 本研究应用R
15、 S V 诱导的致敏小鼠哮喘 模型, 观 察小鼠气道反应性及气道炎症变化并探讨气道反应 性增高的可能机制。 材料和方法 1 . 1 材料 1 . 1 . 1 动物、 试剂和仪器 B a l b / C小鼠3 0只购自中国科学院上海动物中 心、 动物 证号S C X K L ( 沪) 2 0 0 3 - 0 0 0 3 , 清洁级 , 6 - 8 周 龄, 体 重1 7 - 2 0 g , 雌 性。 O V A 、 乙 酞 胆 碱( A c h ) 购 白 美国S i g m a 公司。 S - 8 8 8 E型超声 雾化器由南 京道 芬电子有限公司 生产, 最大雾滴不超过1 Ji m , 配套
16、 装置为一个体积为2 2 c m x 2 3 c m x1 4 c m的有机 玻璃盒。动物肺功能体描箱、 呼吸 机及软件分析系 统( A n i R e s 2 0 0 3 f o r W i n d o w s 9 8 / 2 0 0 0 / X P ) 由北京鑫 奥成科技有限公司提供, 荧光倒置显微镜( C a r l Z e i s s 公司, 德国) , 真空冻十机( L A B C O N C O公司, 美国) 。 1 . 1 . 2 病毒和细胞 R S V l u n g 株A型由 南京医科大学微生物免疫 系提 供、 人喉癌上皮细胞( H e p - 2 ) 由中国预防医 学科 学
17、院 病毒研究所惠赠。H e p - 2 细胞在含1 0 % 灭活 胎 牛血清的D M E M中3 7 9 0 , 5 % C O : 条件下培养, 细 胞 长满 单层后, 将R S V 接种H e p - 2 细胞, 继续在含2 % 灭活 胎牛血清的D M E M的维持液中培养, 3 - -5 天出 现细 胞病变, 待病变达 1 0 0 % 时收获病毒, 将病毒冻 存于 一 8 0 冰箱中, 反复冻融2 次( 1 8 0 ) , 5 0 0 0 r / m i n 离心( 1 0 9 0 , 3 0 m i n ) , 取上清备用。 参照皱毅等5 的方 法, 采用空斑形成试验测 定病毒滴度,
18、以空斑形成单 位( P f u ) 表示, 取1 x 1 0 6 P f u R S V备用。 1 . 2方法 1 . 2 . 1实验分组和动物模型制备 B a l b / c 小鼠 随机分成3 组, 每组1 0 只。磷酸盐 缓冲液 P B S ) 对照组: 以P B S 代替O V A致敏、 激发; O V A组:以O V A腹腔致敏, O V A气道雾化激发; O V A / R S V组: O V A致敏、激发的基础上气道滴人 R S V 。参照B a r e n d s 等f6 的方法并改良建立哮喘模 型 , 于 第1 , 1 4 天 小 鼠 腹腔 注 射 致 敏 液0 .2 m 1
19、( 0 . 0 8 % O V A 0 . 1 m l 和 等体积液态铝混合) , 第1 5 天起将小 鼠置于透明密闭容器中以1 % O V A溶液1 0 m l 雾 化吸人, 每次2 0 m i n , 隔日1 次, 连续5 周, 并分别 于第2 1 , 3 5 , 4 9 天以R S V按浓度 1 x 1 0 6P f u 、 体积 5 0 衅 次 鼻 腔 滴 人,每日 观 察 小 鼠 症 状 , 于 最 后1 次 R S V滴人 4天后用A c h激发测定气道反应性, 处死 小鼠 取标本观察肺病理变化。 1 .2 . 2 动物肺功 能检测 小鼠 按3 0 m 岁 k g 戊巴比 妥钠腹腔
20、麻醉, 气管切 开 后, 套管针置人, 固定。用4 号半婴儿头皮针行尾 静脉 穿刺, 含A c h 溶液的 注射器连接备用。 将小鼠 放人密闭的 体描箱中, 吸气管、 呼气管、 测压管等按 指示连接。 小鼠按频率9 0 次/ m i n 、 潮气量5 - 6 m l / k g 机械通 气, 吸 气末压 用水封 瓶调节负 压为 一 8 C M H 2 0 , 记录 经肺压、 流速、 潮气容积变化, 通过计 算机软件 ( A n i R e s 2 0 0 3 f o r W i n d o w s 9 8 / 2 0 0 0 / X P ) 测 定气道反应性变化,以A c h 激发后肺阻力 (
21、 R , ) 表 示。 将A c h 溶解到生理盐水中, 分别按浓度( 0 . 5 , 1 .5 , 5 .0 , 1 5 .0 , 4 5 . 0 m g / m l ) 、 容 积( 3 5 R I / 次 ) 尾 静 脉 激 发应用, 经肺压和潮气容积曲线回到基线 后, 浓度增 加3 倍,每次应用A c h 后约3 0 s 记录至 少 1 0 次峰 反应的肺变量 1 .2 . 3 支气管 肺泡 灌洗 液( B A L F ) 中 细胞分类计数 小鼠 按3 0 m g / k g 戊巴 比 妥 钠 腹 腔麻 醉, 气 管 切开后, 套管针置人, 固定, 以0 . 5 m l P B S 灌
22、洗, 反复2 次,回 收率在9 0 %- 1 0 0 %, l 2 0 0 r / m i n 离心 5 m i n , 上清保存在一 8 0 冰箱中待测 定细 胞因子。 离 心沉淀细胞用 0 .5 m l H a n k s 液重悬, 取0 . 1 m l 在血 细 胞计数器下计算细胞总数, 其余沉渣细胞涂片经 瑞氏 一 吉姆萨染色, 按细胞形态进行分类计数( 至少 计数2 0 0 个细胞) 。 1 . 2 . 4 肺组织病理学观察及气道壁厚度比较 取右肺中叶 进行酒精脱水, 石蜡包埋连 续切片, 片厚5 W m , 常规苏木精一 伊红( H E ) 染色观察大体组 织病变和细胞浸润。 L
23、3 统计学方法 数据用均数士标准差表尔, 采用S P S S 1 1 . 0 统计 软件进行完全随机设计 资料的单 因素方差分析 ( O N E - W A Y A V O N A ) 和L S D法进行两两比 较, P 0 .0 5 有统计学意义 2 结果 2 . 1气道反应性 变化 气道反应性检测结果见表1 。与对照组比 较, O V A 组、 O V A / R S V组分别以A c h 0 .5 , 1 .5 m g / m l 浓度 激发时气道反应 性无明显变化。5 , 1 5 , 4 5 m g / m l 浓 度时, 与对照组比 较, O V A组、 O V A / R S V组
24、R , 明R 升高( P 均 0 .0 1 ) ; 与O V A组比 较, O V A / R S V组R , 亦显著升高沪均 0 . 0 1 ) o 2 . 2 BA L F中细胞分类计数 - 1 8 2 -南京医科大学学报 第2 6卷第3 期 2 0 0 6年3月 B A L F中细胞分类计数结果见表 2 。与P B S组 比较, O V A组嗜酸性粒细胞升高 ( P 0 . 0 1 ) , O V A / R S V组细胞总 数、 嗜 酸性粒细胞、 淋巴 细胞、 中性粒 细胞明显升高( P 均 0 .0 1 ) 。与O V A组比较, O V A R S V 组细胞总数、 嗜酸性粒细 胞
25、、 淋巴细胞 、 中性V 细胞均明显升高( P 均 0 .0 1 ) 0 表 1各 组小 眼气 道 反 应 性 变 化 ( 无土s ) 组 别 基线 ( .l “ 8 ) 5 刀m 创m l R-各-月月:I 1-乌-士士士 P B S组 O V A 组 O V A 用 S V组 1 . 1 2 t 0. 2 2 1 . 1 8 士 0 . 2 9 1 . 2 9 士 0 . 3 4 0 . 5 mg / m l 1 . 1 8士0 .2 5 1 . 2 5士0 .3 4 1 . 3 2 士 0 37 1 . 2 1 1 . 3 6 1 . 49 2 .2 5 土0 .4 8 3 .6 9 t
26、 0 .3 2 5 . 1 2 士 0. 5 4 巧刀m 创 ml 3 . 2 4士0 .4 1 5 . 8 7 土 0 .5 4 9 .2 8 士0 .8 6 0 4 5 . 0 m g l . l 5 . 1 5 士 0 . 5 4 1 2 .5 9士 1 . 8 4 1 8 . 9 4 1 2 .6 7 101010 与P B S组比 较, P 0 .0 1 ; 与O V A组比较, P 0 .0 1 衷2 各组川.AF中细胞分类计数( x士: ) 组 别n细胞总数( x 1 0 / m l )嗜酸性粒细胞淋巴细胞中性粒细胞 P B S组1 0 4 . 9 8 1 1 .4 2 0 .0
27、 410 . 0 1 0 .9 610 . 2 4 0 .5 410 . 1 8 O V A 组1 0 7 .5 9 士3 . 1 5 0 0 .5 8士0 . 1 1 0 1 . 1 3士0 . 3 9 0 .6 2士0 . 1 5 O V A / R S V组1 0 1 4 .9 1 士4 . 1 4 1 .3 5士0 . 3 9 4 .5 4士1 . 3 2 0 4 .6 8土0 .9 5 0 与P B S 组比较, 4, P 0 .0 1 ; 与O V A组比较, *P 0 .0 1 0 2 . 3 B A L F 上清中I F N - y , I L - 4 , 1 1 - 5 含量
28、I L - 4 , I L - 5 均明显增加 ( P 均 0 . 0 1 ) 。与O V A组 细胞因子含量结果见表3 。 与P B S 组比 较, O V A比较, O V A / R S V组I F N - y , I L - 4 , I L - 5 也均明显升寝 组I L , 4 , 1 1 , 5 增加伊均 0 .0 1 ) , O V A / R S V 组I F N - y , ( P 均 0 .0 1 ) o 表3 各组B A L F上清中U N - y , I L - 4 , I L - 5 含 f ( x 士 , ) 组别n I F N - ti ( P S / m q I
29、 L - 4 ( P gl m 1) I L - 5 ( P P,t m q P B S组1 0 3 . 8 6 t 0 . 4 3 2 .5 5 t 0 .3 2 3 .4 5 t 0 .2 8 O V A组1 0 4 .5 8 士0 . 5 4 5 .3 8士0 .7 1 1 2 .5 9上 0 .9 6 0 O V A / R S V组1 0 2 7 .6 7士2 . 1 8 3 2 .8 8士2 .8 3 一4 5 .6 7士2 .9 4 与P B S 组比较, 0 P 0 .0 1 ; 与O V A组比较,*P 0 .0 1 2 .4 肺病理变化 H E 染色, O V A / R
30、S V组可见气道壁明 显增厚, 气 道猫膜皱襄增多, 管腔狭窄及支气管痉挛征象, 气道 平 滑 肌 层 增 厚, 薪 膜 下 及 管 壁 周围 炎 症 细 胞 浸 租, 除 嗜酸性粒细胞和淋巴细胞外, 还有大量中 性粒细胞 浸润( 图1 , 见封三) ; O V A组气道壁增厚、 管腔狭窄 的程 度均较O V A / R S V 组明显 减轻, 管壁及其周围少 量炎细胞浸润且以淋巴细胞和嗜酸性粒细胞为主 ( 图2 , 见封三) ; P B S 对照组基本正常( 图3 , 见封三) 。 3 讨论 本实验观察到A c h 激发达一定浓度后, 随 着浓 度的增加, 与O V A 组比 较, O V
31、A / R S V 组R L 增加, 提 示O V A致敏后 R S V感染可增加气道反应性、 加重 哮喘。这除与气道炎症加重有关外还可能与R S V 感染导致肺组织M受体数量增加, 亲和力上升有 关17 1 。 对B A L F 中细胞进行分类计数发现, 与P B S 组 比较, O V A组嗜酸性粒细胞升高 ( P 0 .0 1 ) 。与 O V A组比较, O V A / R S V组细胞总数、嗜酸性粒维 胞、 淋巴 细胞 、 中 性粒细 胞均明 显升高, 且中 性粒细 胞、 淋巴 细胞升高更为明 显( P 均 0 .0 1 ) 。有研究LB 表明在一些小鼠哮喘模m中气道高反应 ( A
32、H R ) 和 嗜酸性粒细胞无关,而可能与淋巴细胞浸润有关 更令人 感兴 趣的是中 性粒细胞也明 显升高, 本实验 中中 性粒细 胞数 量增加了 约7 倍, 提示中 性粒细胞 可能是病毒相关性哮喘发病中的重要效应细胞。在 当今的 许多哮喘 研究中,中 性粒细胞与嗜酸性粒细 胞、 T 淋巴细胞、 肥大细 胞等同样具有不可忽视的作 用, 尤其在重度哮喘和哮喘急 性发作时, 中性粒细胞 的作用甚至已超过传统意义上的嗜酸性粒细胞19 1 因 此, O V A 致敏后R S V 感染A H R可能与多种细胞 成份有关, 其中 中性粒细胞可能起着重 要作用。由 于呼吸道病毒感染在重度哮喘和哮喘急性发作中起
33、 重要作用,由此推测以中性粒细胞浸润为主的部分 重度哮喘可能与呼吸道 病毒感染有关, 这也可能是 部分激素难以控制的难治性哮喘的原因p o t 第2 6卷第3期 2 0 0 5年 3月 蒋雄斌等 呼吸道合胞病毒对致敏小鼠气道反应性的影响及机制探讨1 8 3 测定肺泡灌洗液上清中T h l ( I F N - y ) 细胞因子 和T h 2 ( I L - 4 , I L - 5 ) 细胞因子结果显示, 与P B S 组比 较, O V A 组T h 2 ( I L - 4 , 1 1 - 5 ) 细胞因子明显升高, 与大 部分研究结果相同。与O V A组比 较, O V A / R S V组
34、T h I ( I F N - ,y ) 细 胞 因 子 和T h 2 ( I L - 4 , I L r 5 ) 细 胞因 子均 明显升高 ( p均 0 . 0 1 ) 。一般认为T h 2 型炎症与 A H R相关, 但P e e b l e 等研究14 1 表明, 致敏条件下呼 吸道病毒感染导致的 A H R与T h 2炎症并无相关 性。而且哮喘中T h 1 , T h 2 炎症并非相互排斥、 相互 抑制, 而是总体起加强作用, 提示O V A致敏条件下 R S V 感染对T h 1 , T h 2 炎症均有促进作用, 共同增加 AHRa 本研究中, 与O V A 组比 较, O V A
35、 / R S V组小鼠 气 道壁明显增厚, 气道砧膜皱璧增多, 管腔明显狭窄, 上皮破坏、 气道平滑肌层增厚, 豁膜下及管壁周围 炎症细胞浸润, 除嗜 酸性粒细胞及淋巴细胞外, 还 有大量中性粒细胞浸润,提示O V A / R S V组小鼠 气 道既表现为感染性炎症的特征也有变态反应炎症 的特征, 由此推测, 呼吸道病毒感染可能是加重哮 喘气道炎症, 导致 气道炎 症慢性化甚至气道重塑的 重要原因。 综上所述, O V A致敏小鼠R S V感染后气道反 应性明显增加, 并和O V A 致敏哮喘 有不同的 病理生 理特征。由于临床 上呼吸 道病毒诱 发的 哮喘 发作十 分频繁P p , 并和重度
36、、 难治性哮喘密切相关, 对此类 哮喘进行深人研究, 可能会为减 轻哮喘病情, 降低病 死率找到更为有效防 治方法。 I 参考文献 1 2 J o h n s to n S L , P a tt e m o r e P K, S a n d e r s o n G, e t a l . T h e r e la t io n s h ip b e t w e e n u p p e r re s p ir a to ry i n f e c t io n s a n d h o s p it a l a d mis s io n s f o r a s t h m a J . A m J R
37、e s p i r C r i t. C a re M e d , 1 9 9 6 , 1 5 4 ( 3 p t 1 ) : 6 5 4 -66 0 T e ic h t a h l H, B u c k m a s t e r N, P e r tn i k o v s E . T h e i n c i d e n c e o f re s p i r a to ry tr a c t i n f e c t io n i n a d u l t s r e q u ir i n g h o s p i ta l iz a ti o n fo r a s th ma J . C h e
38、s t , 1 9 9 7 , 1 1 2 ( 3 ) : 5 9 1 - 5 9 6 3 R o b i n s o n P J , H e g e l e R G, S c h e ll e n b e r g R R . A ll e r g i c s e n s it iz a t io n i n c re a s e s a ir w a y r e a c t iv i ty in g u i n e a p i g s w it h re s p ir a t o ry s y n c y t ia l v h u s b eon c h i o b ti s ( J . J
39、 A ll e r g 7 I mm u n o l , 1 9 9 7 , 1 0 0 ( 4 ) : 4 9 2 -09 8 4 P e e b le R S , S h e l le r J R, J o h n s o n J E, e t a l. R e s p ir a to ry s y n c y t i a l v i r u s in f e c t io n p ro lo n g s m e t h a c h o li n e - in d u c e d a ir w a y h y p e r r e s p o n s iv e n e s s i n o v
40、 a l b u m i n - s e n s i ti z e d mic e J . J Me d V i r o l , 1 9 9 9 , 5 7 ( 2 ) : 1 8 6 - 1 9 2 5 邹 毅, 黄 海鹭, 徐 军, 等 . 小鼠的原发性呼吸道合胞 病毒感 染 J l . 中 华结核和呼吸杂志. 2 0 0 1 , 2 4 ( 8 ) : 4 8 4 - 4 8 6 6 B a r e n d s M, V a n O o s t e n M, D e R o a d C G H, e t a l . T i m i n g o f in f e c t io n a n
41、d p ri o r imm u n iz a t i o n w it h r es p i r a to ry s y n c y ti a l v i r u s ( R S V ) i n R S V -en h a n c e d a ll e r g i c in f la m ma t io n J . J I n f e c t io n D i s , 2 0 0 4 , 1 8 9 ( 1 5 ) : 1 8 6 6 - 1 8 7 2 口 赵德育, 葛传生, 田 曼, 等 呼吸道合胞病毒感染 对 豚鼠 肺组织M受 体变化的影响 J . 南京医科大 学学 报, 2 0 0
42、2 , 2 2 ( 5 ) , 3 7 9 - 3 8 1 8 M a k e la MJ , T r ip p R, D a k h a m a A, c t a l . P r io r a i r w a y e x p o s u r e t o a l le r g e n in c r e a s e v ir u s - i n d u c e d a ir w a y h y p e r r e s p o n s iv e n e s s J . J A l le r g y C l i n I m mu n o l , 2 0 0 3 , 1 1 2 ( 5 ) : 8 6
43、 1 - 8 6 9 ( 9 We n z e l S E , S z e f le r S J , ku n g D Y , e t a l . B r o n c h o s c o p i c e v a lu a t io n o f s e v e r e a s th ma . p e r s is t e n t i n fl a m m a t io n a s s o c i a t e d w it h h ig h d o s e g lu c o c o r t ic o id s J . A m J R e s p i r C r i t C a r e M e d , 1 9 9 7 , 1 5 6 ( 3 P t 1 ) : 7 3 7 - 7 4 3 红 1 0 周向 东, 黄 勇 一 糖 皮 质 激 素 对 肺 部 炎 性 效 应 细 胞 凋 亡 作用的异质性 T . 中华结核和呼吸杂志, 1 9 9 8 , 2 1 ( 4 ) : 2 2 4 - 2 2 6 1 1 1卢秋穗 张银美.婴幼儿喘息性疾病 2 1 0例与呼吸道合 胞病毒、巨细胞病毒及肺炎支原体感染的关系及随访 观察 J . 南京N 科大学学报, 2 0 0 4 , 2 4 ( 4 ) : 4 1 8 -4 2 0 收稿日期1 2 0 0 5 - 0 6 - 1 9
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