四肢浅静脉标本局部分段注射乳胶制作法.pdf
《四肢浅静脉标本局部分段注射乳胶制作法.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《四肢浅静脉标本局部分段注射乳胶制作法.pdf(2页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、程序导人B MS C后, 对B MS C 本身的干细胞特征 ( 如自 我更新能力和分化潜能) 会产生何影响, 目 前报道极少。张海宁等 9 发现, 外源性 I G F - I 经 F u G e n e 6 转染山 羊B M S C 后, 可促进其增殖; 但该 研究并未对转染后的细胞进行筛选, 且转染率仅 为2 2 0 0 。本研究采用逆转录病毒将 h I G F - 1 导人 大鼠B M S C , 经嗓吟霉素筛选得到稳定的感染细 胞, 通过R T - P C R及E L I S A检测表明转染h I G F - 1 的B MS C内目的蛋白表达量远高于对照组, 且 h I G F - 1
2、蛋白 可分泌到胞外。 然而, 本实验研究同 时又发现, B MS C在体外经过复杂程序导入外源 I G F - 1 基因 后, 其增殖能力和集落形成能力明显降 低。为了探讨这一现象的原因, 本实验对嗦吟霉素 筛选前后的B MS C进行了比较观察。发现未经筛 选的B MS C虽然在I G F 1 总体表达水平上低于筛选 后稳定转染的细胞, 但这些细胞保留了对 I G F l 的 正常反应, 即在高表达I G F 1 的同时, 通过自 分泌或 ( 和) 旁分泌机制获得较高的增殖能力。与此相反, 筛选后的B M S C则丧失了这种能力。其机制可能 是在长时间的筛选过程中, 高浓度的I G F - 1
3、 加速了 B MS C的天然分化。如本实验所示, 在经过筛选的 B MS C中, 转染 h I G F l 的细胞 A L P钙钻和和苏丹 II I 染色阳性率明显高于转染空质粒者。而且, I G F - I 可促进B MS C向骨细胞和脂肪细胞分化, 这一结论 也被大多数学者认可C 8 - 1 0 7 。 此外, 药物筛选本身也 可能是一个不可忽视的因素。本实验中, 经筛选的 空质粒感染细胞与同期培养但未经感染和筛选的细 胞比 较, 其增殖能力亦有所下降。 这提示尽管转染 后B MS C获得了抗药性, pi p , 吟霉素筛选对其增殖能 力仍有明显的负面作用。 综上所述, 本实验证实, 通过
4、导人外源基因可 成功构建高表达 I G F - I 的B MS C , 这种修饰可促 进B MS C的体外增殖和自 然分化, 但嘿吟霉素筛 选对 B MS C的增殖能力有明显的负面作用。因此, 基因 修饰后如何维持B MS C的自 我更新能力和分 化潜能, 仍是尚需解决的问题。 参 考 文 献 1 B i a n c o P , Ri mi n u c c i M, Gr o n t h o s S , e t a l . B o n e ma r r o w s t r o m a l s t e m c e l l s ; n a t u r e , b i o l o g y , a n
5、 d p o t e n t ia l a p p l i c a - t i o n s . S t e m C e l l s , 2 0 0 1 , 1 9 ( 3 ) : 1 $ 0 - 1 9 2 . 2 L i u Y , S o n g J , L i u W, e t a l . G r o w t h a n d d i f f e r e n t ia t i o n o f r a t b o n e m a r r o w s t r o m a l c e l l s ; d o e s 5 - a z a c y t i d i n e t r i g g e r
6、t h e ir c a r d io m y o g e n i c d i f f e r e n t i a t i o n ? C a r d i o v a s c R e s , 2 0 0 3 , 5 $ ( 2 ) : 4 6 0 - 4 6 8 . 3 O l ms t e d E A, B l u m J S , R i l l D , e t a l . A d e n o v i r u s - me d i a t e d B M P 2 e x p r e s s i o n i n h u m a n b o n e m a r r o w s t r o m a
7、 l c e l l s . J C e l l B i o c h e m, 2 0 0 1 , 8 2 ( 1 ) ; 1 1 - 2 1 . 4 Z h a o L X , Z h a n g J , C a o F , e t a l . Mo d i f i c a t io n o # t h e b r a i n - d e r i v e d n e u r o t r o p h ic f a c t o r g e n e : a p o r t a l t o t r a n s f o r m m e s - e n c h y m a l s t e m c e l
8、 l s i n t o a d v a n t a g e o u s e n g i n e e r in g c e l l s f o r n e u r o r e g e n e r a t i o n a n d n e u r o p r o t e c t i o n . E x p N e u ral , 2 0 0 4 , 1 9 0 ( 2 ) : 3 9 6 - 4 0 6 . 5 Wa n g D , P a r k J S , C h u J S , e t a l . P r o t e o m i c p r o f i l i n g o f b o n e
9、 m a r r o w m e s e n c h y m a l s t e m c e l l s u p o n t r a n s f o r m i n g g row t h f a c t o r b e t a l s t i m u l a t i o n . J B i o l C h e m, 2 0 0 4 , 2 7 9( 4 2 ) : 4 3 7 2 5 - 4 3 7 3 4 . 6 F a z i o S , P a l mi e r i E A, B i o n d i B , e t a l . T h e r o l e o f t h e GH- I
10、 G F - 1 a x i s i n t h e r e g u l a t i o n o f m y o c a r d i a l g r o w t h : f r o m e x - p e r im e n t a l m o d e l s t o h u m a n e v id e n c e . E u r J E n d o c r i n o l , 2 0 0 0 , 1 4 2 ( 3 ) : 2 1 1 - 2 1 6 7 Z h a n g J , L i Y , C h e n J , e t a l . E x p r e s s i o n o f i
11、 n s u l i n - l i k e g r o w t h f a c t o r 1 a n d r e c e p t o r i n i s c h e m i c r a t s t r e a t e d w i t h h u - ma n ma r r o w s t r o ma l c e l l s . B r a i n R e s , 2 0 0 4 , 1 0 3 0 ( 1 ) : 1 9 - 2 7 . 8 朱国强, 吴织芬, 王勤涛, 等 I G F - 1 基因转染骨髓基质细胞应 用于牙周组织工程的基础与动物实验研究.中国优秀博硕士 学位论文全文数据
12、库, 2 0 0 4 : 1 - 1 0 2 . 9 张海宁, 侯筱魁, 汤亭亭, 等. 人胰岛素样生长因子I 基因转染 骨髓基质细胞的实验研究.中华外科杂志, 2 0 0 5 , 4 3 ( 4 ) : 2 6 3 - 2 6 7 . 1 0 J i a D , He e r s c h e J N N I . I n s u l in - l i k e g r o w t h f a c t o r l a n d - 2 s t im u l a t e o s t e o p r o g e n i t o r p r o l i f e r a t io n a n d d i f
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 四肢 静脉 标本 局部 分段 注射 乳胶 制作
链接地址:https://www.31doc.com/p-3703941.html