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1、1 2 4断橙医科大学学很J OUR N A L OF X I N J I A N G ME D I C A L UN I V E R S I T Y 2 0 0 2 J u n . , 2 5 ( 2 ) 大 鼠颈部异位心脏移植术模型建立 邵英梅 , “ . , 赵晋明 ,温浩 ,陈实“ ( 新疆医科大学第一附属医院普外科, 新疆乌鲁木齐8 3 0 0 5 4 ; 2 华中科技大学医学部同济医院器官移植研究所, 湖北武汉4 3 0 0 0 0 ) 摘要:目的: 建立国外常用的啮齿类动物颈部异位心脏移植的标准术式, 用于移植免疫、 病理、 生化和器官保 存等方面的实验研究。 方法 : 供体的无
2、名动脉和肺动脉分别与受体的颈总动脉和颈外静脉端端吻合。结呆 : 手术 1 5 0 次, 手术成功率 9 0 % e 结击 : 颈部异位心脏移植术一定程度上克服了腹腔内异位心脏移植术的局限性, 并有其 自身特别的应用价值。该术式可在国内器官移植动物实验中推广应用。 关链词: 心脏移植; 大鼠; 模型 中图分类号 : R- 3 3 2 ; R6 1 7文献标识码 : A文童绵号 : 1 0 0 9 - 5 5 5 1 ( 2 0 0 2 ) 0 2 - 0 1 2 4 - 0 2 长期以来, 生物医学研究的进展常常依赖于使 用动物模型作为实验假说和临床假说的基础, 器官 移植的实验动物模型在研究器
3、官移植排斥反应发生 机理、 免疫抑制治疗、 免疫耐受、 器官保存、 缺血再灌 注损伤以及探索新的手术方式等方面具有临床器官 移植所难以替代的优越性。 自O n 。等 1 1 首次建立较为成熟的啮齿类动物 腹腔内异位心脏移植术以来, 由于其具有局限性, 该 术式经过多次改进。 近年来, 很多国家选用大鼠颈部 异位心脏移植的实验研究 2 1 , 国内陈忠华等 3 1 首次 报道应用心脏异位移植以心脏搏动作为脏器存活的 标志, 能敏锐、 准确地反映移植后器官的变化情况, 为器官移植研究提供了一种简单而又实用的新技术 实验模型。 本室自2 0 0 1 年 1 0 月 1 6日 共做实验 1 5 0 次
4、, 现将正式实验的术式报道如下。 1 材料与方法 1 . 1 材料供体为健康雄性 Wi s t a r 封闭群大鼠, 体重 2 0 0 - 3 0 0 g , 受体为健康雄性 S D封闭群大鼠, 体重 1 0 0 -v 1 2 0 g ( 新疆医科大学实验动物中心提 供) 。共进行 1 5 0次实验, 采用上海医疗器械厂双人 双 目手术显微镜及苏州医疗器械总厂显微手术器 械。1 0 %水合氯醛( 4 ml / k g ) 腹腔内注射( 新疆医科 大学一附院药剂科提供) 。 1 . 2 手术方法 1 . 2 . 1 供心切取术剃毛后正中线剪开腹腔, 自下 腹腔静脉注入肝素盐水( 2 5 K U/
5、 L ) 2 ml , 在全身肝 素化后, 横断腹主动脉与下腹腔静脉放血, 沿双侧腋 前线从肋骨至锁骨剪开胸腔, 以 。 C -4 平衡盐溶 液不断淋浇心脏表面。紧靠右心房结扎切断下腔静 脉和右上腔静脉, 结扎右上腔静脉的同时扎住一半 右心耳。 游离胸主动脉和肺动脉, 于靠近主动脉约1 mm处切断无名动脉, 再于肺动脉分叉处切断主肺 动脉。 提起心脏, 用 5 - 。 丝线将左上腔静脉及所有的 肺静脉集束结扎, 同时结扎一半左心耳, 于结扎的远 端切断, 取出的心脏浸于 。 C一 4 冷平衡盐溶液 中。 1 . 2 . 2 受体手术受体腹侧向上, 头对向术者淇 上门齿用一橡皮筋拉伸固定。剃毛后
6、 自下颇中至右 锁骨中心作一皮肤切口, 自锁骨处游离右颈外静脉 至其两分叉处 , 沿途各细小属支均用笔式电灼器离 断。 切断右胸锁乳突肌以暴露右颈总动脉, 游离右颈 总动脉后, 于其近端上一无创伤性显微血管夹, 远端 结扎切断。取出供心( 不断用 。 一4 平衡盐溶液 浇注) , 于 1 0 倍镜下用 1 0 - 0 无损伤血管线行供心无 名动脉与受体右颈总动脉的单线间断缝合。于右颈 外静脉靠近锁骨处上一无创伤显微血管夹, 后结扎 切断颈外静脉远心端两分叉处。用 8 - 0 无损伤血管 缝线行供心主肺动脉与受体右颈外静脉的单线连续 端端吻合。吻合完毕后, 依次开放静脉及动脉血流. 1 mi n
7、内即可看见到供心由纤颤转为规律复跳, 1 - 0 丝线单层关闭切口。 整个手术由单人操作, 熟练者可 在 6 0 mi n内完成, 供心总缺血时间约 4 0 mi n , 术后 一般能即时苏醒站立, 心跳有力 ( 1 2 0 -2 0 0次 / mi n) 。 1 . 3 观察指标每 日观察大鼠心跳、 毛色、 体重、 精 神状态。移植心存活时间以移植心停跳来判定。 2 结果 正式实验 1 5 0次 , 术后复跳率 1 0 0 %, 以移植心 。 作者简介: 邵英梅( 1 9 6 5 -) , 女, 山东招远县人, 主治医师, 在读博士, 研究方向: 器官移植. 万方数据 新检 医科 大 学学报
8、J OUR NAL OF XI NJ I ANG ME D I CAL UNI VE R S I TY 2 0 0 2 J u n . , 2 5 ( 2 ) 1 2 5 心跳持续 7d以上为评判成功标准, 本次手术成功 率为9 0 %。 3 讨论 随着移植手术 的不断拓展和完善 , 器官移植研 究有了突飞猛进的发展。有关移植排斥反应机理的 探讨、 新的免疫抑制剂的开发与应用以及免疫耐受 的研究, 均需要建立一种简单而实用的移植动物模 型, 单一以腹腔作为移植心的部位已越来越无法满 足研究的需要 , 例如在进行诱导供体特异性移植耐 受等移植免疫学研究时, 可能在首次腹腔心脏移植 之后需再次植入
9、一个心脏。颈部心脏移植为首选的 方法。本术式中, 供心循环途径为: 受体颈总动脉” 供心胸主动脉一冠状动脉心肌一冠状静脉右心 房右心室一肺动脉1 0 . 受体颈外静脉, 循环途径同 O n o 术式一样( 左右心耳并不参与循环途径) 。左心 不参与血液循环, 无射血功能。从实验角度看, 可把 移植心看作是一块会搏动的异体组织, 或者是一个 处于半休息状态的无负荷异位心, 专供实验研究。 在 供心切取时应注意以下几点: ( 1 ) 供心切取过程中, 剔除胸腺, 以便更好显露主动脉弓及分支。( 2 ) 切取 的供心置于 。 C-4 冷平衡盐溶液, 作短期保存。 时间越短越好, 因为冷缺血时间会影响
10、移植物的长 期存活时间。 ( 3 ) 在推注肝素盐水过程中应避免空气 推入。 配置好的肝素盐水应置于零度冰箱保存, 这样 既可起到抗凝作用, 又可降低供心的温度。( 4 ) 供心 的降温对血流恢复后的心脏复跳及移植心脏长期存 活有着非常重要的意义。因此, 在供心切取过程中, 间断地用平衡液浇注心脏及在血管吻合过程中均需 间断降温。 另外, 颈部心脏移植模型与其他方法心脏移植 相比, 有其明显优越性 4 , 5 1 , 如: ( 1 ) 手术较肝、 肾移植 简单; ( 2 ) 手术成败观察标志明显, 开钳后移植心复 跳为成功, 不复跳为失败; ( 3 ) 观察心跳简单明确。 移 植心位于颈部皮下
11、, 非常易于触摸, 以观察术后心跳 情况; ( 4 ) 对受体干扰小, 使实验结果更真实可靠。 所 以, 该术式适用于对实验结果要求更为精确的科研 领域 。 总之, 颈部异位心脏移植作为一个稳定而可靠 的模型, 已在国外广泛应用, 随着国内器官移植的发 展, 该术式动物模型必将会有更加广泛的应用前景。 参考 文献 : O n o J J , L i n d s e y E S . I m p r o v e l t e c h n i q u e o f h e a r t t r a n s p l a n t s - t i o n i n r a t s J 1 . J T h o r
12、a c C a r d i o v a s c S u r g , 1 9 6 9 , 5 7 : 2 2 5 - 2 2 5 . L e e S , Ma c e d o AR, C u r t i s GP, e t a l . A S i n p l i f i e c l mo d e l f o r h e t e r o t o p i c r a t h e a r t t r a n s p l a n t a t io n J .T r a n s p l a n t a t i o n , 1 9 8 2 , 3 2: 4 3 8 - 4 4 2 . 陈忠华, 向藕聪, 钟
13、妙英. 改进的大白鼠同种异位心脏移植术 J 中华器官移植杂志, 1 9 8 2 , 3 1 3 8 - 4 1 . M a n n F C . T r a n s p l a n t a t i o n o f t h e i n t a c t m a m m a l ia n h e a r t J 1 . A r c h S u r g , 1 9 9 3 , 2 6 : 2 1 9 . Z h o n g H u a C h e n g . A t e c h n i q u e o f c e r v ic a l h e t e r o t o p i c h e a r t t
14、r a s p i a n t a t i u n i n二 , i c e J . T r a n s p l a n t a t i o n , 1 9 9 1 , 5 2 : 1 0 9 9 - 1 1 0 1 . 收稿 日期. 2 0 0 2 - 0 1 - 1 0 1 -1 1人2 尸1rL 飞J门 ,J4 厂LrL E s t a b l i s h me n t o f mo d e l o f c e r v i c a l h e a r t t r a n s p l a n t a t i o n i n r a t S HA O Y i n g - me i , Z H
15、A O J i n - mi n g , WE N Ha o , e t ( D e p a r t m e n t o f G e n e r a l S u r g e r y , F i r s t A f f i l i a t e d Ho s p i t a l , Xi n j i a n g a l Me d i c a l Un i v e r s i t y, Ur u mq i 8 3 0 0 5 4 , C h i n a ) A b s t r a c t : O b j e c t i v e : E s t a b l i s h me n t o f s t a
16、 n d a r d c e r v i c a l h e a r t t r a n s p l a n t a t i o n i n r o d e n t s w a s w i d e l y u s e d a b r o a d , w h i c h c o mmo n l y a p p l i e d f o r i mmu n e t r a n s p l a n t , p a t h o l o g y , b i o c h e mi s t r y a n d o r g a n r e s e r v e s t u d y . M e t h o d s
17、; D o n o r c a r d i a c a r t e r i e s o f i n n o m in a t e a n d p u l m o n a r y a r t e r y w e r e a n a s t o m o s e d w i t h t h e r i g h t c o m - m o n c a r o t i d a r t e r y a n d t h e e x t e r n a l j u g u l a r v e i n o f t h e r e c i p i e n t r e s p e c t i v e l y b y
18、 u s i n g e n d - t o - e n d a n a s t o m o - s i s u n d e r t h e mi c r o s c o p y . R e s u l t : F o r ma l mi c r o s u r g i c a l e x p e r i me n t w a s p e r f o r me d i n r a t s f o r 1 5 0 t i me s w i t h t h e s u r v i v a l r a t e o f 9 0 %. C o n c l u s i o n s : S o me l i
19、 mi t a t i o n s i n a b d o mi n a l h e a r t t r a n s p l a n t a t i o n h a v e b e e n o v e r c o m e b y u s i n g t h e c e r v i c a l m o d e l , e s p e c i a l l y f o r s o me s p e c i f i c a p p l i c a t i o n . I t c o u l d b e w i d e l y a p p l i e d f o r e x p e r i me n t a l o r g a n t r a n s p l a t a t i o n i n C h i n a . K e y w o r d s : h e a r t t r a n s p l a n t a t i o n ; r a t ; e x p e r i me n t a l mo d e l 万方数据
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