大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成中脂质代谢的变化.pdf
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1、第2 6 豢第9 期 2 0 08 年9 月 中华 C H I N E S EA R C H I V E S 中医药 O FT R A D I T I O N A L 学刊 C H I N E S EM E D I C l N E V 0 1 2 6N o 9 S e p 200 8 大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成中脂质代谢的变化 温秀梅1 ,陈芝芸2 ,严茂祥2 ,何蓓晖2 ( 1 浙江中医药大学,浙江杭州3 1 0 0 5 3 ;2 浙江中医药大学附属第一医院消化病研究室,浙江杭州3 1 0 0 0 6 ) 摘要:目的:观察高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎形成中脂质代谢的变化情况。方法:S D
2、 大鼠随机分 为正常组和模型组各4 0 只,正常组喂以普通饲料,模型组喂以高脂饲料,分别在实验第2 、4 、8 周和第1 2 周末每 组各随机处理1 0 只,检测血清T G 、C H O L 、H D L C 、L D L C 、F F A 、A I T 、A 汀和肝组织匀浆T G 、C H O L 含量变化, 肝组织常规H E 染色观察肝组织脂肪变和炎症程度。结果:模型组大鼠在喂养高脂饲料2 周后即出现血清 C H O L 、L D L C 、F F A 增高、H D L C 降低等明显的血脂紊乱和肝组织T G 、C H O L 含量增加、肝细胞的脂肪变;在连 续喂养4 周至1 2 周血脂异
3、常持续存在但不明显加重,而肝脏T G 、C H O L 含量进一步增加、肝细胞脂肪变程度也逐 渐加重,至1 2 周出现明显肝组织炎细胞浸润和血清A L T 、A S T 水平增高;血清T G 水平在4 周较同期正常组明显 增高而1 2 周则较同期正常组显著降低。结论:高脂饮食可诱导大鼠N A S H 形成,同时存在明显的脂质代谢的紊 乱。且血脂的变化与脂肪肝的程度存在着不平行现象。 关键词:非酒精性脂肪性肝炎;脂质代谢;大鼠 中图分类号:R 一3 3 文献标识码:A文章编号:1 6 7 3 - 7 7 1 7 ( 2 0 0 8 ) 0 9 一1 9 8 7 一0 3 A l t e r a
4、t i o no fU p i di nP r o g r e s s i o no fN o n a l c o h o l i cS t e a t o h e p a t i t i si nR a t s W E NX i u m e i 。,C H E NZ h i n 2 1 1 2 ,Y A NM a o - x i a n 9 2 ,H EP e i h u i 2 ( 1 Z h e j i a n gC h i n e s eM e d i c a lU n i v e a i t y ,H g z h 伽3 1 0 0 5 3 ,历e j 咄,C h i n a ;2 I
5、 n s t i t u t eo f D i g e s t i v eR e s e a m h , T h eF i r s tA f f d i a t e dH o s p i t a lo fZ h e j i a n $ C h i n e s eM e d i c a lU n i v e r s i t y ,H l I I I I 曲3 1 0 0 0 6 ,Z h e j i a n $ ,C h i n a ) A b s t r a c t :D 蜘c t i v e :T os t u d yt h ea l t e m t i o no fl i p i di n
6、 胁d u r i n gt h ep r o g r e s s i o no fn o n a l c o h o l i cs t e a t o h e p a t i t i s ( N A S H ) ,w l d e hW a Se s t a b l i s h e db yg a v a g eo fh i g hf a td i e t M e t h o d s :E i g h t yh e a l t h yS Dr a t sw e 陀r a n d o m yd i v i d e di n t o n o r m a lg r o u pa n dm o d l
7、 eg r o u p ,s t a n d a r d ,h i s hf a td i e t sw e l ea d m i n i s t r a t e d 1 0r a t sw e r er a n d o m l yk i l l e da tt h ee n do f2 ,4 , 8 ,a n d1 2w e e k sr e s p e c t i v e l y T h el e v e l so f m mT C ,C H O L ,H D L C ,L D L C ,F F A ,A L T ,A S Ta n dt h ec o n t e n t0 f l i v
8、 e r T G 。C H O Lw e r em e a s u r e d L i v e rf i 鹪u ew e r es t a i n e dw i s hH Ea n dl i v e rs t c a t o s i sa n di n f l a m m a t i o no b s e r v e d R e s t d t s :A f - t e r2w e e k so ff a t t y r i c hd i e t t h e r ee x i s t e ds i g n i f i c a n td i s o r d e ro fl i p i dm e
9、t a b o l i s mi nm o d e lr a t si n c l u d i n gs e r u l nC H O L , L D L Ca n dF F A i n c r e a s e d ,H D L Cd e c r e a s e d ,T 6a n d C H O L i n l i v e r i n c r e a s e da n dp a t h d o 彭o f h e p a t o c y t es t e a t o s i s i n l i v e r sw e r eo b s e r v e d ;D u r i n gt h ep e
10、 r i o df r o m4 t hw e e kt o1 2 t hw e e k ,d y s l i p i d e m i ac o n t i n u e db u th a dn op r o g r e s s ,t h ec o n - t e n t So fT Ga n dC H O Li nl i v e r si n c r e a s e df u r t h e r ,h e p 出cs t c a t o s i si n e a 8 e d 删矗u yi nm o d e lr o t S ;U n t i lt 2 t hw e e k ,t h e i
11、n f l a m m a t i o nc e l li n f i l t r a t i o nc a m ei n t ob e i n ga n dt h el e v e l so fs e r u mA L Ta n dA S Ti n c r e a s e d :C o m p a r e dw i t hm o d l e g r o u p ,t h cc o n t e n to fs e r u mT Gi n c r e a s e ds i g n i f i c a n t l ya tt h ee n d0 f2 n dw e e k ,b u td e c
12、r e a s e da tt h ee n do f1 2 t hw e e k C o n c l u s i o n :N A S Hm o d l e 啪b ee s t a b l i s h e db yf e e d i n gh i s h f a td i e t ,a n ds i g n i f i c a n td i s o r d e r0 fl i p i dm e t a b o l i s me x i s - t e d T h es e v e r i t y0 ff a t t yl i v e rc a nn o tb er e p r e s e n
13、 t e db yt h el e v e lo fb l o o dl i p i d K e yw o r d s :n o n a l c o h o l i cs t e a t o h e p a t i f i s ;l i p i dm e t a b o l i s m ;S Dr a t 非酒精性脂肪性肝炎( n o n a l c o h o l i cs t c a t o h e p a t i t i s , N A S H ) 发病率逐年升高,它可以发展成为肝纤维化、肝硬 化等肝脏的终末期病变- z j ,其发病机制尚不十分清楚,缺 乏有效的治疗手段。目前研究认为其
14、发病可能与脂质代谢 紊乱,氧应激,脂质过氧化,免疫反应等多种因素有关【”“。 本研究动态观察高脂饮食诱导的大鼠N A S H 形成过程中血 收稿日期:2 0 0 8 一0 4 一1 1 基金项目:浙江省自然基金资助项目( Y 2 0 0 4 3 1 0 ) 作者简介:温秀梅( 1 9 8 0 一) ,女,2 0 0 5 级硕士研究生,研究方向:中 西医结合消化系疾病研究。 通讯作者:陈芝芸( 1 9 6 3 一) ,女,浙江海盐人,研究员,博士研究生 导师,研究方向:中西医结合消化系统疾病。 脂、肝脏脂质的变化情况,旨在进一步探讨脂代谢紊乱在 N A S H 发病中作用。 1 材料与方法常 I
15、 1 实验动物S D 大鼠8 0 只,雄性,清洁级,体重1 9 0 一中 2 1 0 9 ,由上海西普尔一必凯实验动物中心提供。1 1 2 主要药品与试剂胆固醇由上海博奥生物科技有限 蠹 公司提供,3 号胆盐由杭州微生物试剂有限公司提供,血清 药 丙氨酸氨基转移酶( A L T ) 、天门冬酸氨基转移酶( A S T ) 、总 1 9 8 7 胆固醇( C H O L ) 、三酰甘油( T c ) 、高密度脂蛋白胆固醇_ ( H D L C ) 等试剂盒均由上海申能一德赛诊断技术有限公 高 司提供,血清低密度脂蛋白胆固醇( L D L C ) 试剂盒由上海 复星长征医学科学有限公司提供,血清游
16、离脂肪酸( F F A ) 万方数据 第2 6 卷第9 期 2 008 年9 月 中华中医药学刊 C H I N E S EA R C H I V E SO FT R A D l T l 0 N A LC H I N E S EM E D I C I N E V 0 1 2 6N o 9 S e p 2008 由日本第一化学试剂公司提供。 1 3 分组及造模8 0 只大鼠普通饲料适应性喂养I 周后 随机分为正常组和模型组,每组4 0 只,每组又分2 、4 、8 周 和1 2 周4 个时间点。正常组每天予以普通标准饲料喂养, 模型组每天均予以高脂饲料喂养( 8 2 普通标准饲料+ 1 0 猪油+
17、 2 胆固醇+ 1 胆盐+ 5 蛋黄粉) ,自由进食 和饮水。实验开始后第2 、4 、8 周和第1 2 周末正常组及模 型组分别随机处理大鼠1 0 只。各大鼠禁食1 8 h 后麻醉,腹 腔静脉取血分离血清,取肝组织,部分以生理盐水制成匀 浆,部分肝右叶以4 多聚甲醛固定后制备石蜡切片。 1 4 检测指标血清A L T 、A S I “ 、T G 、C H O L 、H D L C 、L D L C 、F F A 采用全自动生化仪检测;肝组织匀浆T G 采用异 丙醇提取、氧化铝吸附磷脂和乙酰丙酮显色法测定,C H O L 采用异丙醇提取,高铁、硫酸显色法测定。肝组织病理学检 查:常规H E 染色
18、,光镜下观察肝组织脂肪变性及炎症浸润 程度,非酒精性脂肪性肝病的病理组织学诊断参考2 0 0 6 年 2 月中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组修 订的“非酒精性脂肪性肝病诊疗指南”HJ 。 1 5 统计学方法采用S P S S l 2 0f o rw i n d o w s 软件包统 计,计量资料采用t 检验。 2 结果 2 1 大鼠N A S H 形成中肝脏病理学变化H E 染色光镜观 察显示各正常组大鼠肝组织未见明显异常。模型大鼠2 周 时肝组织可见中度肝脂肪变( 砣乃) ,以小泡性为主;4 周 时可见中到重度脂肪变( F 3 1 7 4 ) ,以小泡性为主的混合 性,部分大泡性
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- 大鼠 酒精性 脂肪 性肝炎 形成 中脂质 代谢 变化
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