安体舒通对大鼠慢性环孢素A肾毒性的保护作用.pdf
《安体舒通对大鼠慢性环孢素A肾毒性的保护作用.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《安体舒通对大鼠慢性环孢素A肾毒性的保护作用.pdf(3页珍藏版)》请在三一文库上搜索。
1、论著 2 0 0 9 年9 月第6 卷第2 7 期 安体舒通对大鼠慢性环孢素A 肾毒性的保护作用 王春燕,程根阳,刘章锁,喻青,梁献慧,董吉 ( 郑州大学第附属医院肾内科,河南郑州4 5 0 0 5 2 ) 【摘要】目的:观察醛固酮拮抗剂安体舒通对慢性环孢素A ( C s A ) 肾毒性发生及发展的影响。方法:健康雄性S D 大鼠,低盐饮食1 周后随机分为对照组( n = 1 2 ) 、模型组( C s A 皮下注射,n = 1 2 ) 和治疗组( C s A 皮下注射+ 安体舒通灌 胃,n = 1 2 ) 。于实验3 5d 时处死大鼠,检测大鼠肌酐清除率( C e r ) 、血醛固酮水平,M
2、 a s s o n 染色观察肾脏病理,免疫组 化检测肾组织转化生长因子一B l ( T G F B 。) 的表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠体重明显下降( P O 0 1 ) ,给予安 体舒通后大鼠体重下降减慢( P 0 0 5 ) ;与对照组比较,模型组、治疗组大鼠C c r 均下降( P 0 0 5 ) ,但治疗组较模型组 下降缓慢( P O 0 5 ) ;与对照组比较,模型组、治疗组大鼠血醛崮酮水平均明显升高( P 0 0 5 ) ,但治疗组与模型组相 比无显著性差异;与对照组相比,模型组大鼠肾脏出现明显间质纤维化( P 0 0 5 ) ,治疗组较模型组明显减轻( P 0 0 5
3、) ;与对照组相比,模型组肾组织T G F B 表达增强( P O 0 5 ) ,治疗组较模型组明显减弱( P 0 0 5 ) 。结论:醛崮酮参 与慢性C s A 肾毒性的发生及发展,安体舒通叮抑制慢性C s A 肾毒性肾组织中T G F 一1 3 的表达,进而抑制C s A 诱导的 肾问质纤维化。 【关键词】醛固酮;安体舒通;肾小管间质纤维化;转化生长因子一B , 中图分类号】R 一3 3 2【文献标识码】A 文章编号】1 6 7 3 7 2 1 0 ( 2 0 0 9 ) 0 9 ( c ) 一0 2 6 0 3 P r o t e c t i v ee f f e c t so fS p
4、 i r o n o l a c t o n eo nc h r o n i cc y c l o s p o r i n eA n e p h r o t o x i c i t y i nr a tm o d e l s W A N GC h u n y a n , C H E N GG e n y a n g , L I UZ h a n g s u o , Y UQ i n g , L I AN GX i a n h u i , D o n gJ i ( D e p a r t m e n to fN e p h r o l o g y ,t h eF i r s tA f f i l
5、 i a t e dH o s p i t a lo fZ h e n g z h o uU n i v e r s i t y ,Z h e n g z h o u4 5 0 0 5 2 ,C h i n a ) 【A b s t r a c t o b j e c t i v e :T oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to fS p i r o n o l a c t o n eo nc h r o n i cc y c l o s p o r i n eAn e p h r o t o x i c i t yi n r a tm o d e l
6、s M e t h o d s :N o r m a lm a l eS Dr a t sw i t hl o w - s a hd i e tw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t ot h r e eg r o u p s ,c o n t r o lg r o u p = l2 ) ,m o d e lg r o u p ( C s As u b c u t a n e o u sd a i l yi n j e c t i o n , ,# l2 ) a n dt r e a t m e n tg r o u p ( C s As u b c
7、u t a n e o u si n j e c t i o na n dS p i r o n o l a c t o n eg i v e nb yg a s t r i c g a v a g e ,n = 12 ) A tt h e3 5 t hd a yo ft h ee x p e r i m e n t ,c r e a t i n i n ec l e a r a n c er a t e ( C c r ) a n dt 靶r n ma l d o s t e r o n ew e r ed e t e r m i n e d M a s s o ns t a i n i n
8、 ga n di m m u n o h i s t o e h e m i s t r yw e r ep e r f o r m e dt oo b s e r v et h em o r p h o l o g i c a lc h a n g e sa n dT G F B Ie x p r e s s i o n R e s u l t s :I nc o m p a r i s o nw i t hc o n t r o lg r o u p ,t h er a tb o d yw e i g h to fm o d e lg r o u pw a ss i g n i f i c
9、 a n t l yd e c r e a s e d ( 砌0 1 ) ,t h e s ew e r e s i g n i f i c a n t l ya m e l i o r a t e db yS p i r o n o l a e t o n e 俨 0 0 5 ) ;t h eC c ro fm o d e lg r o u pa n dt r e a t m e n tg r o u pw a sd e c r e a s e dc o m p a r e d w i t ht h ec o n t r o lg r o u p ( 脚D 甄b u tt h a to ft
10、 r e a t m e n tg r o u pd e c r e a s e ds l o w l yt h a nt h a to fm o d e lg r o u p ( j 砑D 0 5 ) B l o o da l d o s t e r o n e l e v e lo fm o d e lg r o u pa n dt r e a t m e n tg r o u pW a si n c r e a s e dc o m p a r e dw i t ht h a to fc o n t r o lg r o u p ( P 0 0 5 ) ,b u tt h a to ft
11、 r e a t m e n t g r o u ps h o w e dn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c ec o m p a r e dw i t ht h a to fm o d e lg r o u p T h er a tk i d n e yo fm o d e lg r o u po c c u r r e do b v i o u s t u b u l o i n t e r s t i t i a lf i b r o s i sc o m p a r e dw i t hc o n t r o lg r o u p ( 尸
12、O 0 5 ) ,a n dt h a to ft r e a t m e n tg r o u pw 硇o b v i o u s l yr e l e a s e dt h a nt h a t o fm o d e lg r o u p ( P 0 0 5 ) T h eT G F - 1 3 lo fm o d e lg r o u pW a sh i g h e r ( P 0 0 5 ) a n dt h a to ft r e a t m e n tg r o u pW a sl o w e rt h a nt h a t o fc o n t r o lg r o u p (
13、P 0 0 5 ) C o n c l u s i o n :A l d o s t e r o n ep l a y sa l li m p o r t a n tr o l ei np r o d u c i n gf u n c t i o na n ds t r u c t u r a lc h a n g e s a s s o c i a t e dw i t hc h r o n i cC s An e p h r o t o x i c i t y S p i r o n o l a c t o n ei m p r o v e st h et u b u l o i n t
14、e r s t i t i a lf i b r o s i si n d u c e db yC s At h r o u g h i n h i b i t i n gt h ee x p r e s s i o no fT G F B 1 【K e yw o r d s 】A l d o s t e r o n e ;S p i r o n o l a c t o n e ;T u b u l o i n t e r s t i t i u mf i b r o s i s ;T G F p I 环孢素A ( C y c l o s p o r i n eA C s A ) 是器官移植后
15、一线药物, 但其肾毒性是限制其临床广泛、长期应用的重要原因之一I l I 。 由此慢性环孢素。肾病( c h r o n i ce y c l o s p o r i n en e p h r o p a t h y C C N ) 的防治成为长期关注的焦点。既往研究发现肾素一血管紧张 素一醛固酮系统( r e n i na n g i o t e n s i ns v s t e m 。R A S ) 成员血管紧张 素I I ( A n g i o t e n s i nI I ,A n g I I ) 在C C N 发病中发挥重要作用。 本实验建立慢性C s A 肾毒性大鼠模型探讨R A
16、S 另一成 员醛固酮在C C N 发病中的作用为临床防治C C N 提供 实验依据。 【通讯作者】刘章锁。郑州大学第一附属医院肾内科,博士生导师研究方 向:肾小球疾病。 2 6m 国医药导箍C H I N AM E D I C A LH E R A L D 1 材料与方法 1 1 实验材料 健康雄性S D 大鼠,体重2 0 0 - 2 5 0g ( 郑州大学医学院实验 动物中心) ,低盐饲料( 海军医学院研究所实验动物中心) ;C s A ( 诺华制药有限公司) ,安体舒通( 上海第四制药厂) :醛固酮放 免试剂盒( 北免东雅生物技术研究所) ;山羊抗大鼠T G F - 1 3 多 克隆抗体(
17、 S a n t a C r u z 公司) ;免疫组化试剂( 北京中杉公司) 。 1 2 实验方法 健康S D 雄性大鼠,低盐饮食,适应性喂养l 周后随机 分为三组,对照组( 胆1 2 ) :生理盐水1 5m l ( k g - d ) 皮下注射; ( 函模型组( n = 1 2 ) :C s A ( 1 5m g k g ) 皮下注射;( 爹治疗组( f t = 万方数据 2 0 0 9 年9 月第6 卷第2 7 期 1 2 ) :在模型组的基础上给予安体舒通f 2 0m g ( k g d ) l 灌胃。 对照组及模型组大鼠每天灌胃同比例蒸馏水。 1 3 检测指标及判定方法 实验第3 5
18、 天处死大鼠,采集血及2 4h 尿标本测定 血、尿肌酐水平。按C c r = 尿肌酐( I x m o l L ) x 尿量( m l m i n ) ,血肌 ( 1 上m o l L ) 计算C c r 。取下腔静脉【虹4r r I l ,放免法测定血醛 固酮水平。取肾组织经1 0 甲醛溶液固定后进行M a s s o n 及 免疫组化染色观察肾间质纤维化积分和T G F 一1 3 表达。肾问质 纤维化分析采用H P I A S 一1 0 0 0 病理图文分析系统根据病变的 百分数判定。T G F B 。免疫组化染色按试剂盒说明书进行,一 抗稀释比例为1 :2 0 0 。P B S 代替一抗
19、作为空白对照已知阳性 慢性间质。肾炎标本作阳性对照。用H P l A S 1 0 0 0 病理图文分 析系统按阳性染色面积所占视野百分比行半定量计分。 1 4 统计学处理 实验数据以均数标准差 虹) 表示,用S P S S1 0 0 软件 进行分析差异性分析采用单因素方差分析。组问比较采用 L S D t 检验。P 0 0 5 表示有显著性差异。 2 结果 2 1 三组大鼠一般情况比较 实验过程中无大鼠死亡。观察期三组大鼠体重变化见 表1 。 表1三组大鼠体重变化f 孑,) 组别大鼠体蕈( g ) 对照组 3 7 9 3 3 土7 8 2 模型组1 9 9 1 7 7 6 3 治疗组2 6 8
20、 2 9 6 8 4 0 与对照组比较,毋( o 0 1 ,b p o 0 5 ;与模型组比较,做O 0 5 2 2 三组大鼠C c r 及血醛固酮水平变化 见表2 。 表2 三组大鼠C c r 率及血醛固酮变化f 孑蜘) 塑型壁丑竺坚! 堂! :虹2 】查壁宴塑! ! g 鱼2 对照组1 6 0 5 o 1 2 521 2 2 6 7 :t - 6 4 1 6 模型组0 5 8 6 i - 0 0 9 4 “27 4 4 8 3 - 4 9 6 3 b 治疗组I 0 7 2 :t - 0 1 0 5 027 3 6 5 0 5 5 9 0 b 与对照组比较,欺O 0 1 ,b p o 0 5
21、 ;与模型组比较,c P 0 0 5 2 3M a s s o n 染色观察大鼠肾脏形态学变化 与对照组相比,模型组大鼠出现典型肾间质纤维化分别 为( 2 1 3 17 0 1 5 25 ) 和( 0 6 1 33 i - 0 1 1 67 ) P 0 0 5 1 ,表现为不规 则灶状或条索状分布的小管萎缩和问质纤维化萎缩的肾小 管基膜增厚,纤维化区域可见肾小球纤维化。治疗组较模型组 减轻【( 1 5 7 0O o 1 1 00 ) 和( 2 1 3 I7 0 1 5 25 ) ,P 0 0 5 。见图1 。 图1三组大鼠肾组织学改变 M a s s o n X 2 0 0 ) ( A 对照组
22、,肾间质纤维化不显著;B 模型组,显著条索状肾问质纤维 化;C 治疗组,条索状肾间质纤维化明显减轻) 论著 2 4T G F Bz 免疫组化检测结果 模型组大鼠肾小管间质T G F B l 蛋白表达较对照组明显 增强【分别为( 2 5 5 00 0 1 5 44 ) 和( 0 7 5 80 0 1 1 72 ) ,P 0 0 5 】, 治疗组较模型组T G F B ,蛋白表达显著减弱【分别为( 1 7 1 1l 0 1 0 64 ) 和( 2 5 5 0O 0 1 5 44 ) ,P 0 0 5 1 。见图2 。 圈2 三组大鼠肾小管间质T G F B ,蛋白表达情况( S P x 4 0 0
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 安体舒通 大鼠 慢性 环孢素 毒性 保护 作用
链接地址:https://www.31doc.com/p-3705477.html