慢性压力超负荷兔左心室肌中层细胞动作电位的变化.pdf
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1、2 4 慢性压力超负荷兔左心室肌中层细胞动 作电位的变化 王康君,赵永辉1 河南省直机关第二医院郑州市4 5 0 0 0 3 摘要目的探讨慢性压力超负荷兔左心室肌中层细胞动作电位的变化。方法新西兰兔3 2 只,随机 分为缩窄组和假手术组,采用肾上腹主动脉缩窄术制备兔左心室压力超负荷模型。术后8 周胶原酶两步消化法 分离获取左心室中层单个心肌细胞,全细胞膜片钳技术记录中层细胞膜电容、动作电位( A P ) 。、结果术后8 周,与假手术组比较,缩窄组中屠细胞膜电容增加3 4 O ( P 0 0 5 ) ,A P D 9 0 延长3 0 6 ( B C L = 2 s ,P 0 0 5 ) ,A P
2、 D 呈现更明显的I 频率依赖性,且更易发生早期后除极( E A D ,B C L = 2 s ) 。结论慢性压力超负荷兔左 心室肌中层细胞电生理特性发生改变,可能与恶性心律失常发生有关。 关键词电重构;结构重构;慢性压力超负荷 中图分类号:R 一3 3 2文献标识码:A文章编号:1 6 7 2 3 4 2 2 ( 2 0 0 8 ) 2 3 - 0 0 2 4 - 0 3 C h a n g e so fE l e c t r i c a lR e m o d e l i n gi nM i d m y o c a r d i u mo fR a b b i t L e f tV e n t
3、 r i c l ew i t hC h r o n i cP r e s s u r e o v e r l o a d W A N GK a n g j u n ,Z H A OY o n g h u i T h eS e c o n dH o s p i t a lo fH e n a nP r o v i n c i a lG o v e r n m e n t ,Z h e n g z h o u4 5 0 0 0 3 ,C h i n a A B S T R A C T O b j e c t i v e T oi n v e s t i g a t et h ec h a n g
4、 e sa n ds i g n i f i c a n c eo fe l e c t r i c a lr e m o d e l i n gi n m i d m y o c a r d i a l ( M ) c e l l so fr a b b i tl e f t v e n t r i c l ew i t hc h r o n i cp r e s s u r e o v e r l o a d M o t h o d s T h i r t y t w on e wZ e a l a n dr a b b i t sw e r er a n d o m l yd i v i
5、 d e di n t oc o n s t r i c t i o ng r o u pa n ds h a mg r o u p T h er a b b i t v e n t r i c l em o d e l sw i t hc h r o n i cp r e s s u r e o v e r l o a dw e r ep r e p a r e db yp a r t i a lc o n s t r i c t i o no fs u p e r r e n a la b - - d o m i n a la o r t a A t8w e e k sa f t e ro
6、 p e r a t i o n ,t h es i n g l em y o c y t e sw e r ee n z y m a t i c a l l yi s o l a t e df r o mt h e m i d m y o c a r d i u mi nt h ea n t e l a t e r a lf r e ew a l lo fl e f tv e n t r i c l e W h o l ec e l lp a t c hc l a m pt e c h n i q u ew a su s e d t or e c o r dt h em e m b r a
7、n ec a p a c i t a n c e ,a c t i o np o t e n t i a l ( A P ) o fMc e l l s R e s u l t s A t8w e e k sa f t e r 叩一 e r a t i o n ,c o m p a r e dw i t hs h a mg r o u p ,t h em e m b r a n ec a p a c i t a n c eo fMc e l l st o mc o n s t r i c t i o ng r o u ps i g n i f i e a n t l yi n c r e a
8、s e db y3 4 。0 ( P 0 0 5 ) A tB C Lo f2 s ,A P D 9 0o fMc e l l si nc o n s t r i c t i o ng r o u pw a s 3 0 6 l o n g e rt h a nt h a ti ns h a mg r o u p ( P 0 0 5 ) F u r t h e r m o r e ,A P Do fMc e l l s i nc o n s t r i c t i o n g r o u pp r e s e n t e dm o r ep r o n o u n c e ds l o wf r
9、 e q u e n e y d e p e n d e n c ea n dw e r ee a s i e rt op r o d u c ee a r l ya f t e r - d e p o l a r i z t i o n ( E A D ) C o n c l u s i o nD u r i n gt h ee a r l yp h a s eo fc h r o n i cp r e s s u r e o v e r l o a d ,e l e c t r i c a l r e m o d e l i n go fMc e l l sf r o mr a b b i
10、 tl e f tv e n t r i c l ed e v e l o p e d ,w h i c hc o u l db ear i s kf a c t o rf o rt h eo c c u r - r e n c eo fa r r h y t h m i a K E KW O R D SE l e c t r i c a lr e m o d e l i n g ;S t r u c t u r a lr e m o d e l i n g ;C h r o n i cp r e s s u r e o v e r l o a d 肥厚心室的结构、功能和代谢经历了一个模 式改
11、建过程,称为心搴重构,其中包括结构重构 ( 心肌肥厚表型) 和电重构。电最构与左心窒肥厚 时恶性心律失常及心源性猝死的发生密切相 l 河南省人民医院心内科郑州市4 5 0 0 0 3 关。既往各种动物模型关于肥厚心肌电重构的 研究通常在心室发生显著肥厚时进行,在心室肥 厚发生早期电重构的特征罕见报道。近年来人及 多种哺乳动物的研究表明,跨室壁不同层次心肌 细胞存在电生理异质性,中层心肌细胞为其主 体心。3J 。基于此,本研究建立兔左心室慢性压力超 万方数据 J o u r n a lo fM e d i c a lF o r u mV 0 1 2 9 N o 2 3D e c e m b e
12、r2 0 0 8 负荷模型,观察了中层细胞动作电位( a c i o np o t e n t i a l ,A P ) 变化,旨在探讨心室肥厚电重构特征及其 意义。 1 材料与方法 1 1 实验动物新西兰兔3 2 只,体重1 6 2 0 k g ,雌雄各半,购于西安交通大学医学院实验动 物中心。 1 2 实验动物分组及模型复制将新西兰兔按 体重随机分为2 组,每组1 6 只:缩窄组;假手 术组。缩窄组按G i l l i s 等的方法采用肾上腹主动 脉缩窄( 部分结扎腹主动脉使其内径减少约5 0 左右) 的方法制备兔左心窒慢性压力超负荷( 高血 压) 模型。假手术组仅游离腹主动脉而不缩窄。
13、1 3 细胞分离观察期满,取各组1 6 只兔,静脉 注射5 0 0 U 肝素,3 戊巴比妥钠麻醉后快速开胸 取出心脏,置于冰冷无C a 2 + 台氏液冲洗,剪开心包 并修饰心脏,以主动脉根部连接L a n g e n d o r f 心脏灌 流装置,参照M c I n t o s h 等的方法,胶原酶两步消化 法获取左室前侧壁叶,层单个心肌细胞。 1 4 溶液配制正常台氏液:N a C I1 4 3 m m o l L , K C l5 4 m m o l :C a C l 21 8 m m o l L ,M g C l 20 5m m o l I , N a H ,P 0 4o 2 5 m
14、m o l L ,H E P E S5 O m m o l L ,葡萄糖 5 6 m m o l L ,N a O H 调p H 值至7 3 5 。无c a 2 + 台 氏液:除不含C a C l :外,其余同正常台氏液。A P 记录细胞外液:N a C l1 4 3 m m o l I ,K C I5 4m m o l L , C a C l 21 8 m m o l L ,M g C l 20 5 m m o l L ,N a H 2 P 0 4 0 2 5 m m o l L ,H E P E S5 m m o l L ,葡萄糖5 6 m m o l L , N a O H 调P H 至
15、7 3 5 m m o i L ;A P 记录电极内液: N a C l 1 0 m m o l L , E G T A1 0 m m o l L ,H E P E S1 0 m m o l L ,M g A T P 5m m o l L ,C a C l 21 O m m o l L ,K C I 1 2 0 m m o l I ,K O H 调p H 至7 3 5 m m o l L 。 1 5 膜片钳全细胞记录将细胞悬液滴于倒置显 微镜- T 作台I :的细胞池中,待细胞贴壁后,用相应细 胞外液以1 2 m l m i n 的速度阻速灌流,冲去死亡的 细胞碎片,选取表面光洁、横纹清晰、柱
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