抗FASL抗体对小鼠病毒性心肌炎作用机制的研究.pdf
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1、书书书 论著 基金项目: 山东省卫生厅科研基金 (!“#$%“#) 作者单位: !=)检测心肌组织中 0*+:*+;2!;-6? -):-5 $(;4-65,A-)5) KO ME; K+M 0KKG *0PQFH;L JK0*HLF*I LF+;*+;+ FG 0EFILH;GB RKS;T;H,FM+ :*MEK4;G;+F+ F+ GKM 0I;*HB =;0;GM +MQLF;+ FGLF0*M; ME*M ME; 0JMKMKUF0FMJ ;LF*M;L VJ 0JMKMKUF0 6 IJ:EK0JM;(!6,):I*J+ *G F:KHM*GM HKI; FG ME; L;T;IK
2、:;GM KO JK0*HLF*I FGWQHJ FGTKIT;L FG ?NB “:K:MK+F+ ;LF*M;L VJ )*+/ )*+, :*MES*J F+ *G ;+;GMF*I ;0E*GF+ KO M*H4;M 0;II+ L*4; VJ !6,B 3G MEF+ +MQLJ,ME; *QMEKH+ FGT;+MF4*M;L ME; H;4QI*MKHJ ;OO;0M+ KO G;QMH*IFXFG4 *GMF!=) B ;LF*MH,$;0;V;H .,!“#$% #48%“)$+“(/,)$#*“($/) 株) , 在 K42$ 细胞上传代冻融 9 次, 并测得 半数细胞感染
3、率 (ELMJH) 为 DHNF R2 法检测, DFG 冻存于 XOHY冰箱供逆转录0聚合酶链反应 (:E0Z:) 检 测。 二、 病理学检查 常规 KR 染色, 光镜下观察心肌病理变化, 并计 算心肌病变积分。即每张切片随机取 J 个高倍视 野, 计算每个视野中炎性细胞浸润及坏死区域面积 与整个视野面积之比, 无病变计 H 分, 病变面积 GJV 计 D 分,P JHV 计 G 分,P JV 计 9 分, JV计 I 分。每张切片病变积分取 J 个高倍视野 的平均值。 三、EW;R2 法原位检测心肌细胞凋亡 利用寡核苷酸末端脱氧核糖核酸转移酶 (E*E) 介导的 *WEZ 缺口末端标记法检
4、测。EW;R2 细胞凋 亡检测试剂盒购自罗氏公司; M. 试剂盒购自北京 中杉生物技术公司。结果判定: 随机数 J 个高倍视 野 ( IHH) 的心肌细胞总数及阳性染色心肌细胞 数, 按公式: 阳性细胞数F 细胞总数 DHHV, 计算心 肌细胞凋亡百分率。 四、免疫组化检测 )$,8$,409 抗原 兔抗小鼠 )$,8$,409 多克隆抗体购自美国 U$/+$ #6_ 公司, U. 复合物购自北京中山生物工程有 限公司。按常规 U. 法进行免疫组化检测, M. 染色, 以 ZU 取代一抗和二抗作空白对照, 光镜下 观察结果, 随机取 J 个高倍视野 ( IHH) , 计算阳性 面积表达率的平均
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