抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化.pdf
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1、4 抑郁症模型大鼠学习记忆力及 海马形态结构的变化 肖爱娇4 ,施昱6 ,闵建新8 ,伍庆华 ( 江西中医学院a 生理学教研室;b 病理学教研室,南昌3 3 0 0 0 4 ) 摘要:目的观察抑郁症模型大鼠学习记忆力及海马形态结构的变化。方法雌性S D 大鼠2 0 只,随机分为正常 组和模型组,每组1 0 只。正常组不给予任何处理,模型组给予孤养加2 1d 慢性不可预见性的温和应激( C U M S ) 采用O p e n F i e l d 、糖水消耗量及M o r r i s 水迷宫测试大鼠的行为学表现;光镜以及透射电镜观察大鼠海马组织结构。 结果与正常组相比,模型组大鼠行为学测试显示其直
2、立活动得分及水平活动得分均减少、糖水摄入百分比减少 及学习记忆力下降;H E 染色显示模型组大鼠海马锥体细胞层变薄,细胞间隙增大,排列紊乱,疏松,细胞结构不完 整,甚至有大量细胞缺失;透射电镜下,模型组海马神经元较少,细胞核呈现皱缩改变,核膜凹凸不整模糊不清,并 有局部断裂;胞质内线粒体肿胀变性,嵴消失。结论孤养加2 1dC U M S 可造成大鼠抑郁症模型;模型组大鼠学 习记忆力下降可能与应激造成海马形态结构改变有关。 关键词:慢性不可预见性的温和应激;海马;透射电镜;动物,实验;大鼠 中图分类号:R - - 3 3 2文献标识码:A文章编号:1 0 0 0 一2 2 9 4 ( 2 0 0
3、 9 ) o l 0 0 0 4 一0 5 C h a n g e so fL e a r n i n ga n dM e m o r yA b i l i t i e sa n d t h eU I t r a s t r u c t u r eo fH i p p o c a m p u si nD e p r e s s i o nM o d e lR a t s ,X I A OA i - j i a o * ,S H IM i n 。,M I NJ i a n - x i n “ ,W UQ i n g - h u a “ ( a D e p a r t m e n to fP h
4、y s i o l o g y ;b D e p a r t m e n to fP a t h o l o g y ,Ji a n g x i U n i v e r s i t yo fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e ,N a n c h a n g3 3 0 0 0 4 ,C h i n a ) A B S T R A C T :0 b j e c t i v eT oo b s e r v ec h a n g e so fl e a r n i n ga n dm e m o r ya b i l i t i e s
5、a n dt h eu l t r a s t r u c t u r eo fh i p p o c a m p u si nd e p r e s s i o nm o d e lr a t s M e t h o d sT w e n t yf e m a l eS Dr a t sw e r er a n d o m l y d i v i d e di n t ot w og r o u p s ( 1 0i ne a c h ) :n o r m a lg r o u pa n dm o d e lg r o u p T h ef o r m e rw a sg i v e nn
6、o s t r e s sa n dt h el a t e rw a sg i v e ni s o l a t i o n - h o u s i n gi nc o m b i n a t i o nw i t h21d a y so fc h r o n i cu n e x p e c t e d m i l ds t r e s s ( C U M S ) O p e n - F i e l dt e s t ,s u g a rc o n s u m p t i o na n dM o r r i sw a t e rm a z et e s tw e r eu s e d t
7、ot e s tr a t s b e h a v i o r s L i g h tM i c r o s c o p ea n dt r a n s m i s s i o ne l e c t r o nm i c r o s c o p ew e r eu s e dt oo b s e r v et h et i s s u es t r u c t u r eo fh i p p o c a m p u s R e s u l t sC o m p a r i s o nw i t hr a t si nn o r m a lg r o u p , r a t si n m o d
8、 e lg r o u ps h o w e dc h a n g e si nb e h a v i o r a la s p e c t s :b o t hc r o s s i n ga n dr e a r i n gw e r el o w e rt h a n t h o s ei nn o r m a lg r o u pi nO p e n - F i e l dt e s t ,t h ep e r c e n t a g eo fs u g a rc o n s u m p t i o n ,a sw e l la sl e a r n i n g a n dm e m
9、o r ya b i l i t i e si st o o H Es t a i n i n gs h o w e dt h a th i p p o c a m p a lp y r a m i d a lc e l ll a y e rb e c a m e t h i n n e ri nr a to fm o d e lg r o u p ,t h eg a pb e t w e e nc e l l si n c r e a s e d ,a n dt h ec e l l sa r r a y e di nd i s o r d e r , l o o s e ,e v e na
10、l a r g en u m b e ro fc e l l sw e r el o s t T r a n s m i s s i o ne l e c t r o nm i c r o s c o p es h o w e dl e s sh i p p o c a m p a ln e u r o n si nr a t so fm o d e lg r o u p ,t h e i rn u c l e a rc o l l a p s e d ,t h ew h o l en u c l e a rm e m b r a n e w a sf u z z y a n dt h e r
11、 ew e r es o m el o c a lf r a c t u r e si nt h en u c l e a rm e m b r a n e M i t o c h o n d r i aw i t h i nt h e c y t o p l a s mw e r es w e l l i n ga n dt h e i rr i d g e sd i s a p p e a r e d C o n c l u s i o nD e p r e s s i o nm o d e lc o u l db ei n 收稿日期:2 0 0 8 1 0 0 6 基金项目:江西省自然科
12、学基金( 2 0 0 7 G Q Y 0 9 4 4 ) 作者简介:肖爱娇( 1 9 7 3 一) 。女,博士,讲师,主要从事中医药防治抑郁症的研究。 万方数据 5 d u c e db yi s o l a t i o n - h o u s i n gi nc o m b i n a t i o nw i t h21d a y so fC U M S T h ed e c l i n eo fl e a r n i n ga n d m e m o r ya b i l i t i e si nr a t so fm o d e lg r o u pm a yb ec a u s e db
13、 yp a t h o l o g i c a lc h a n g e si nh i p p o c a m p u s K E YW O R D S :c h r o n i cu n e x p e c t e dm i l ds t r e s s ;h i p p o c a m p u s ;t r a n s m i s s i o ne l e c t r o nm i c r o s c o p e ; a n i m a l s ,l a b o r a t o r y ;r a t s 抑郁症是以焦虑不安和情绪低落为主要症状的 疾病,属于情感性精神障碍,同时伴有思维迟缓
14、、意 志活动减退等症状,即存在认知功能障碍。有研 究发现抑郁症患者海马、胼胝体膝下区等部位的皮 质容量、神经元、胶质细胞数量减少2 。而关于抑郁 症模型动物海马形态学及超微结构变化的文献报道 还不多见,因此,本研究在给予大鼠孤养和2 1d 的 慢性不可预见的温和应激( c h r o n i cu n p r e d i c t a b l e m i l ds t r e s s ,C U M S ) 制备抑郁症模型后,主要测试 大鼠的学习记忆力并观察大鼠海马的形态学变化。 l 材料与方法 1 1 实验动物 S D 大鼠2 0 只,雌性,体质量2 3 0g 左右。采用 颗粒型饲料喂养,适应性
15、喂养1 周,光照黑暗周期 1 2h 1 2h ,以模拟正常昼夜生理节奏( 7 :o o 一1 9 :o o 光照,1 9 :o o 一7 :0 0 黑暗) ,饮用仪器过滤水,室温 ( 2 2 土2 ) 。 1 2 动物分组 动物适应1 周后,采用随机数字表将大鼠分为 2 组,每组1 0 只。正常组:5 只笼,正常饮食进水, 不给予任何刺激;模型组:分笼饲养,1 只笼,接受 2 1dC U M S 。 1 3 实验仪器 M o r r i s 水迷宫视频分析跟踪系统( 成都泰萌科 技有限公司) ,8 2 0 型旋转切片机( 美国) ,T H P 一1 病 理摊片烘干机( 上海医疗仪器厂) ,隔水
16、式电热恒温 培养箱( 上海跃进医疗器械一厂) ,透射电镜( 荷兰) , R e i c h e r t J u n gu l t r a c u tE 超薄切片机( 德国) 。 2方法 2 1 抑郁症模型制备 C U M S :按W i l l n e rP 等3 3 的方法稍行改进,将 动物每周随机给予夹尾、禁水、禁食、昼夜颠倒、水平 振荡、电击、4 水游泳等方法刺激,每日采取1 种 方法进行刺激,连续2 1d 。 2 2 检测指标 2 2 1 体质量 在适应1d 、应激第1 天、应激第7 天、第1 4 天 及第2 1 天,进行称量。 2 2 2 行为学测试 1 )O p e n - F i
17、 e l d 测试 4 。适应1d 、应激第1 天、应激第7 天及第2 1 天进行测试。用自制的圆形 体O p e n - F i e l d 敞箱进行测定,敞箱高为4 0c m 、直经 为8 0c m ,四周箱壁为黑色,底面用黑线均匀划分为 面积相等的2 5 块方格。以动物穿越方格数作为水 平活动得分( c r o s s i n g ) ,动物穿越1 格为1 次,如动 物沿线行走,每1 0c m 为1 次。以直立次数为垂直 活动得分( r e a r i n g ) ,以两前肢离地为1 次。每只动 物测试1 次,3m i n 次。保持环境安静,每次测试前 保持敞箱内干净。 2 ) 糖水摄入
18、量测试。于应激1d 、1 周及3 周 时( 即应激结束后1d ) 进行测试。各组动物同时放 入饮用水和1 蔗糖水,1h 后称量各只大鼠的饮用 水量及蔗糖水消耗量 4 ,计算糖水消耗百分比。 3 ) 学习记忆力测试。应激结束后1 5d 采 用M o r r i s 水迷宫进行测试,参照文献 5 7 的方法 并稍微进行了修改,每天2 次,上午9 :0 0 1 1 :o o 进 行大鼠定位航行实验( p l a c en a v i g a t i o n ) 。将测试时 间设置为7 0S ,操作者随机将大鼠从非平台所在象 限的其他2 个人水点将大鼠面向池壁放入水中,观 察并实时记录大鼠在7 0S
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