消斑通脉合剂对PDGF-BB诱导血管平滑肌细胞增殖的影响.pdf
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1、2010 生 第2 4 卷第2 期 实用中医内科杂志 J O U R N A LO FP R A C T I C A LT R A D I T l O N A LC H I N E S EI N T E R N A LM E D I C I N E 9 消斑通脉合剂对P D G F B B 诱导血管平滑肌细胞增殖的影响 武跃华1 ,杨积武2 ( 1 辽宁中医药大学,辽宁沈阳1 1 0 0 3 2 ;2 辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳1 1 0 0 3 2 ) 摘 要: 目的 观察中药复方消斑通脉舍剂药物血清对体外培养的V S M C s 细胞周期的作用。 方法 体外培养 V s M c s
2、,取对数生长期细胞用作实验,M T r 法检测不同浓度药物血清对体外培养的V S M C s 增殖活力;应用流式细胞仪分 析各组细胞周期分布。 结果 M I T 法显示药物血清呈剂量依赖性抑制V S M C s 增值,高剂量与低剂量比较有统计学差异 ( P 0 0 5 ) ,流式细胞仪显示药物血清可明显阻滞V S M C s 细胞进程,高剂量与低剂量比较有统计学差异( P 0 0 1 ) 。 结论 中药复方消斑通脉合剂药物血清可以阻滞V S M C s 的细胞周期进程,达到抑制V S M C s 增殖的作用。 关键词:血管平滑肌细胞;药物血清;细胞周期 中图分类号:R 一3 3 文献标识码:A
3、d o i :1 0 3 9 6 9 j i s s n 1 6 7 1 7 8 1 3 2 0 1 0 0 2 0 4 E f f e c to fX i a o B a n T o n g M a i H e J io nR a tV a s c u l a rS m o o t hM u s c l eC e l l sC y c l ei nV i t r o W UY u e h u a l Y A N GJ i W U 2 ( 1 L i a o n i n gU n i v e r s i t yo fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d
4、 i c i n e ,S h e n y a n g11 0 0 3 2 ,L i a o n i n g ,C h i n a ; 2 T h eA f f i l i a t e dH o s p i t a lo fL i a o n i n gU n i v e r s i t yo fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e , S h e n y a n g11 0 0 3 2 ,L i a o n i n g ,C h i n a ) A b s t r a c t : O b j e c t i v e T os t
5、u d yt h ea n t i p r o l i f e r a t i o na n dc e l lc y c l eb l o c k i n ge f f e c t so ft h ex i a ob a nt o n g m a ih ej io nr a tv a s c u l a rs m o o t hm a p l ec e l l s ( V S M C s ) i nv i t r o M e t h o d s V S M C sw e r et r e a t e dw i t hv a r i o u s c o n c e n t r a t i o n
6、o ft h em e d i c a ls e r u mo fx i a ob a nt o n gm a ih ej if o r2 4h o u r s T h ec e l lv i a b i l i t yw a sd e t e c t e db y M T rm e t h o d F l o wc y t o m e t r yw a su s e dt od e t e c tt h ec e l lc y c l e R e s u l t s C o m p a r e dw i t It h ec o n t r o lg r o u p , t h em e d
7、i c a ls e r u mi n h i b i t e dt h ep r o l i f e r a t i o no fV S M C s t h ec e l l sn u m b e r so fG 0 G 1 p h a s ei n c r e a s e d ,a n dt h e c e l l sn u m b e r so fS p h a s ed e c r e a s e ds i g n i f i c a n t l y C o n c l u s i o n T h em e d i c a ls e n l mo fx i a ob a nt o n
8、gm a ih ej i i n h i b i to ft h ep r o l i f e :r a t i o na n db l o c k sc e l lc y c l ep r o g r e s s i o no fV S M C s K e yW o r d s :v a s c u l a rs m o o t hm u s c l ec e l l ;d r u gs e l 3 1 m ;c e l l ;c y c l e 冠状动脉支架术虽然是预防经皮冠状动脉腔内 成形术( p e r c u t a n e o u st r a n s l u m i n a lc
9、 o r o n a r ya r l g i o p l a s - t y ,P T C A ) 后再狭窄的有效手段,而术后2 0 3 0 仍然发生再狭窄。血管平滑肌细胞( v a s c u l a rs m o o t h m u s c l ee e l l S ,V S M C s ) 的增殖、转型、迁移是其始动因 素和中心环节,因此抑制V S M C s 增殖成为预防再 狭窄的重要途径。本次实验通过观察中药复方消斑 通脉合剂药物血清对P D G F B B 诱导的V S M C s 增殖 的影响,为中医药治疗此类疾病提供实验依据。 1实验材料 1 1 试剂血管平滑肌细胞系( A
10、1 0 ) 购自湘雅 医学院细胞中心( 来源美国A T C C ) ,D M E M 高糖培养 基为T h e r m o 公司产品,胎牛血清( f b t a lb o v i n es e r u m , F B S ) 购于杭州四季青公司,9 6 孔培养板为C o m i n g 公 司产品,0 2 5 ( 含E D T A ) 消化胰酶为B i o i n d 公司产 品,P D G F B B 为P e p r o t e c h 公司产品,噻唑蓝 ( M T r ) 、碘化丙锭( P I ) 、R N A 酶、购自美国S i g m a 公 司,流式细胞仪为B D 公司。 1 2药
11、物消斑通脉合剂为自拟中药复方,方中 含有黄芪、太子参、丹参、川芎、红花、淫羊藿、巴戟肉 等,具有益气助阳、活血通脉之功效,所有药物均购 自辽宁中医药大学附属医院门诊药房。药物按常 规方法煎煮、过滤、浓缩成含生药2 9 m L 煎剂用于 实验。 2 实验方法 2 1 血管平滑肌细胞培养血管平滑肌细胞用含 1 0 F B S ,1 0 5U L 青霉素和1 0 5U L 链霉素的 D M E M 高糖培养基,于5 C O :、3 7 饱和湿度下培 养,以0 2 5 的胰酶进行消化传代,当细胞处于对数 生长期时用于实验。 2 2 中药血清制备S D 大鼠1 2 只,雄性,清洁级, 体重2 0 0 9
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