灯盏花素对UL补硒大鼠谷胱甘肽过氧化物酶和硫氧还蛋白还原酶基因表达和活性的影响.pdf
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1、灯盏花素对1 4补硒大鼠谷胱甘肽过氧化物酶和 硫氧还蛋白还原酶基因表达和活性的影响 = + 5= 8 P . + + 4 “甘“璐“刘“琼“刘“宏“徐辉碧 ! 华中科技大学药物研究所“ 武汉“ # $ $ / # # “#;“ 0 “ ;方法和酶活性测定分析N A C / G和- ;基因表达 水平和活性$结果“D E硒能降低大鼠肝脏组织中N A C / G 和- ; 3; (=表达水平及活性! 灯盏花素能增加补硒大鼠 肝脏中N A C / G和- ; 3; (=表达水平和活性$D E硒对 大鼠肾脏% 睾丸组织N A C / G和- ; 3; (=表达水平和活 性无明显影响$结论“灯盏花素能有效
2、拮抗D E硒所致的 N A C / G和- ;3; (=表达和活性的下降! 且D E硒所致的 N A C / G和- ;3; (=表达和活性的下降具有组织特异性$ 提示补硒不宜取允许的最高摄入量$ 关键词“硒# 灯盏花素# 谷胱甘肽过氧化物酶# 硫氧还蛋白还 原酶# 基因表达# 酶活性 “硒 L . b . B . 6 : . L 6 J 4 . H 确定的硒的最高摄入量 是两种重要的硒酶! 为探讨硒的毒性及能否用 灯盏花素拮抗! 本实验测定了灯盏花素对补硒大鼠 肝脏% 肾脏% 睾丸组织中N A C / G和- ;基因表达和 对硒酶活性的影响$ !“材料和方法 !9 !“动物“健康c 5 H
3、J 4 B大鼠! 体重! 0 $%“ “ $7 ! 由湖北省卫生防疫站动物实验中心提供$依照实验 动物标准条件饲养大鼠! 自由进食和饮水$ !9 “药物“灯盏花素! 由云南玉溪药业提供! 纯度 , 1T以上! 用生理盐水溶解稀释$( 4“A . M#为天津 市化学试剂研究所产品$ !9 $“动物分组“将大鼠随机分为组“ 正常对照 组% 腹腔注射含硒为 $ =和0 R J R 2 T 表达的测 定 !9 /9 !“总; (=提取“采用- ; L R ) +试剂盒提取组 织中的总; (=! 提取的; (=经紫外测得= “ 1 $)=“ 0 $ “取“ ; 扩增$经, %Y放 置% 3 5 6后!
4、;循 环# %次$ ;条件为“, Y %H!% 1Y # $H!上 游 引 物 为% k / N N / N=- - =- - N N - - = / # k! 下 游 引 物 为% k / = =N =N =-= - = / # k! 扩增产物长度 为产物分析“取! $扩增产物于 ( 产 物的含量$为比较各组大鼠3; (=的相对表达水 平# 以目的3; (=和相应的+/ 4 : J 5 63; (=的比值 来表示各组大鼠3; (=丰度的差别$ !# 5“Q ( 6 ; =和0 R活性的测定“N A C / G活性采 用(= ? C偶 联 法# 底 物 为C“M “ 活 性 由 - ;催化的%
5、 依赖于(= ? C的%#% k / P 5 J U 5 ) 8 5 H!“ / 6 5 / J B ) 8 . 6 R ) 5 :4 : 5 P“ !? -( F“中 二 硫 键 的 还 原 来 表 示 =和0 RJ R ; 2 T表达水平的影响“由 5 7!#“可知# 补硒 $ 3; (=表达水平低于正常对照组# 补硒 $3; (=表达水平与仅补硒组相比升高# 仅补 灯盏花素组大鼠肝脏中N A C / G和- ; 3; (=表 达水平与正常对照组相比无明显差别$而在大鼠肾 脏和睾丸组织中其N A C / G和- ;3; (=表达水 I D F!“T F * - B ,F , : , : ,
6、 ) A - B 9 H B - , D B % R9 - B E K ) A B Q ( 6 ; =* C E0 RD C- * A : D X , -!*“ # D E C , S!+“* C EA , A D !)“ “E 4 6 .!): ) 6 J B ) + 7 B ) Q I*E 4 6 .“) 6 + aD EA .7 B ) Q I*E 4 6 .#)D EA .j H : Q J . + + 4 B 5 67 B ) Q I* E 4 6 .)H : Q J . + + 4 B 5 67 B ) Q I*E 4 6 .K) ; 3 4 B . B ! % #, , =!*“
7、* C E0 R!+“J R 2 T: , X , : D C- * A K 9 9 : , J , C A , EG D A H1 4( , !$9 $ %5 =!*“* C E0 R!+“* ) A D X D A D , D C- * A K 9 9 : , J , C A , EG D A H1 4( , “!$9 $ %5 =和0 R活性 的影 响“由 5 7#可 知$ 补 硒 $活性显著 低于正常对照组$ 补硒 $活性与仅补 硒组相比升高$ 仅补灯盏花素组大鼠肝脏中N A C / G和- ;活性与正常对照组相比无差别#而在大 鼠肾脏和睾丸组织中其N A C / G和- ;活性在组
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