热处理对回收血中肿瘤株细胞的杀伤作用和对红细胞NAKATP酶活性的影响.pdf
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1、2 5 8中华麻醉学杂志2 0 0 6 年3 月第2 6 卷第3 期C h i n J A n e s t h e s i o l , M a r c h 2 0 0 6 , V o l 2 6 , N o . 3 容 量 治 疗 热处理对回收血中肿瘤株细胞的杀伤作用和 对红细胞 N a - K - A T P酶活性的影响 吴剑波类维富赵丽云孙宝柱 摘要】 目的 探讨不同温度热处理对回收血中肿瘤细胞的杀伤作用和对红细胞N a - K - A T P 酶活性的影响。方法将培养好的S G C - 1 7 0胃癌细胞株和 L O V O大肠癌细胞株分别加人浓缩红细胞 中, 采用水浴法加温处理。根据加
2、温温度不同分为5 组: 3 7 组、 4 2 组、 4 3 组、 4 5 组、 4 7 组, 加热 时间均为4 0 m i n 。采用密度梯度离心法分离肿瘤细胞, 台盼蓝染色计数存活肿瘤细胞; 测定肿瘤细胞 的克隆形成、 D N A B r d U r d 标记情况, 测定红细胞膜 N a - K - A T P 酶活性。结果与3 7 组比较, 4 2 C 一 4 7 组存活肿瘤细胞数均减少, 肿瘤细胞克隆形成率减少, 肿瘤细胞 D N A B r d U r d 标记率降低, 4 3 9 C 一 4 7 组红细胞膜 N a - K - A T P 酶活性降低( P 0 . 0 5 ) 。结论
3、4 2 - 4 7 9 C 温度加热4 0 m i n 不能完全杀灭肿瘤细胞, 4 3一4 7 9 C 温度加 热4 0 m i n 对红细胞膜 N a - K - A T P 酶活性还有明显抑制作用。 【 关键词】 高温, 诱发; 肿瘤细胞, 培养的; 红细胞; N a ( +) K ( +) 交换 A T P 酶 H y p e r t h e r m i a : i t s e f f e c t i v e n e s s i n k i l l i n g t u m o r c e ll s a n d W U J a n,b o ,L E I W e i f u ,Z H A O
4、 L i- y u n , e t a l . i n f l u e n c e o n N a 十 - K十 一 A T P a s e a c t i v i t i e s i n D e p a r t m e n t o f A n e s t h e s i o lo g y ,Q i l u H o s p i t a l o f S h a n d o n g U n i v e r s i t y A b s t r a c t I ,J i n a n 2 5 0 0 1 2 , C h i n a O b j e c t i v e T o in v e s t i g
5、 a t e t h e e ff e c t i v e n e s s o f h y p e rt h e r m i a c e l l s a n d i t s i n fl u e n c e o n N a 一 K - A T P a s e a c t i v i t i e s i n e r y t h r o c y t e s . Me t h o d s f d if f e r e n t d e g r e e s i n k i ll i n g t u m o r C u l t u r e d l o w d i ff e ren t i a t e d
6、s t o ma c h g l a n d t u m o r c e l l s ( S G C - 1 7 0 ) a n d l a r g e in t e s t in e c e ll s ( L O V O )( l x , g l a n d t u m o r i n w a r m b a t h o f 1 J. m l 一 e a c h ) w e r e m ix e d w i t h c o n c e n t r a t e d R B C s r e s p e c t i v e l y a n d i n c u b a t e d3 7 9 0,4
7、2 C,4 3 9 C ,4 5 C o r 4 7C f o r 4 0 m i n r e s p e c t iv e l y . a n d t h e l i v e A f t e r h y p e rt h e r m i c t r e a t m e n t t u m o r c e ll s w e re i s o l a t e d f r o m R B C s u s i n g d e n s i t y g r a d i e n t c e n t r i f u g a t i o n f o r ma t i o n o f t u mo r c e
8、ll s w e re c o u n t e d b y t y p a n s t a i n i n g . T h e i s o l a t e d t u m o r c e ll s w e re t h e n c u l t u r e d a n d t h e c l o n e c e l l s w a s c h e c k e d . T h e c u l t u r e d t u m o r c e ll s w e r e m a r k e d w i t h 5 - b ro m o d e o x y m i d i n e a n d D N A
9、me t a b o l i s m d e t e r mi n e d. w a s e x a mi n e d T h e N a 奋 - K 十 一 A T P a s e a c t i v i t i e s i n R B C a f t e r h y p e rt h e r m i c t r e a t m e n t w e re a l s o R e s u l t s T h e a m o u n t o f t u m o r c e l l s w a s s i 加f i c a n t l y d e c r e a s e d b y 4 0 m i
10、 n h y p e rt h e r m i c t re a t m e n t t e m p e r a t u r e- d e p e n d e n t m a n n e r f r o m 4 2 - 4 7 9 0 a s c o m p a r e d w i t h t h e c o n t ro l g r o u p ( 3 7 U )( P 0 . 0 5 ) , 见表 t o 讨论 临床手术中回收血液的主要成分为红细胞, 因 此本研究将胃癌细胞株和大肠癌细胞株加人红细胞 悬液, 加温温度和时间参考文献 2 。本研究结果表 明, 不同温度热处理对肿瘤细胞的生长均
11、有一定的 抑制作用, 但肿瘤细胞均可看到克隆形成; B r d U r d 标 记测定肿瘤细胞 D N A代谢物的生长情况, 显示热处 理后肿瘤细胞 D N A增殖率降低, 提示热处理可抑制 肿瘤细胞的增殖活性, 但不能完全杀灭肿瘤细胞。 4 2 热处理对红细胞膜 N a - K 十 一 A T P酶活性无影 响, 但随着热处理温度升高后红细胞膜 N a - K - A T P 酶活性降低。提示临床上肿瘤病人术中回收的 血液, 经热处理后回输, 并不能排除肿瘤细胞播散的 风险。 中华麻醉学杂志2 0 0 6 年3 月第2 6 卷第 3 期C h i n J A n e s t h e s i
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